甘草酸二銨腸溶膠囊的制備與質量控制

吳云珍，宋旭瑩，陸紀宏

(浙江金華康恩貝生物制藥有限公司，321016)

甘草酸二銨是從甘草中提取的α體甘草次酸衍生物，具有抗炎、抗變態反應、抗病毒、保護細胞膜結構、調節免疫、改善肝功能等多種作用。甘草酸二銨屬于弱酸性化合物，微溶于水，且水溶液不穩定，在酸性水溶液中很快分解［1］。目前上市的甘草酸二銨腸溶膠囊采用腸溶膠囊殼達到腸道釋放的目的。有學者指出，腸溶膠囊均為明膠膠囊外包腸溶衣制成，由于明膠的特殊性質，這種傳統的包衣方式很難達到理想的效果，或是影響藥物性質，或是影響整體膠囊的穩定性。本實驗中，筆者在考察藥物穩定性及篩選輔料的基礎上，采用擠出滾圓工藝及流化床包衣法制備甘草酸二銨腸溶微丸，更好地控制了藥物釋放，以體外溶出度為評價指標，并依據正交實驗設計對處方進行了優化。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 E-50軸向單螺桿擠出機(重慶英格)，S-250滾圓機(重慶英格)，WBF-2G型包衣造粒機(重慶英格)，ZRS-8G型溶出儀(天津大學無線電廠)，Agilent1100高效液相色譜儀(美國安捷倫公司)，AG135型電子分析天平(梅特勒-托利多儀器有限公司)，TU-1800S型紫外-可見分光光度計(北京普析通用儀器有限公司)。

1.2 試藥 甘草酸二銨(西安富捷藥業有限公司，批號:100904，純度:99.2%)，煙酰胺對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號:100115-200703)，羥丙基甲基纖維素E5(上?？房倒?，微晶纖維素(湖州展望天明藥業有限公司)，磷酸氫二鈉(上海展云化工有限公司)，磷脂酰膽堿(上海太偉藥業有限公司 )，鄰苯二甲酸二乙酯(中國醫藥集團化學試劑有限公司)，Eudragit L30D-55(德固賽公司)，滑石粉(萊州市風羽滑石粉有限公司)。

2 方法

2.1 載藥微丸的制備 采用擠出滾圓造粒機制備微丸。稱取處方量藥物及輔料，過篩混合均勻，加2%羥丙甲基纖維素(hydroxy propyl methyl cellulose，HPMC)適量制成軟材，經擠出篩板(孔徑0.8 mm)擠成直徑相當的條狀，進滾圓機使顆粒完全滾圓，于50℃烘干，取0.80～1.18 mm(18～24目)微丸包衣。

2.2 隔離微丸的制備 按處方量將HPMC用適量純化水預先溶解，加入磷酸氫二鈉，攪拌30 min，過內徑0.180 mm(80目)篩，即得HPMC包衣液，備用。開啟流化床設備并選擇適當程序，設備加熱至顯示溫度(45±2)℃。加入藥丸，加熱，至顯示溫度(40±2)℃。開始噴HPMC溶液［設備參數:進風溫度38～50℃，氣壓:0.2 ～0.4 MPa，霧化壓力0.2 ～0.5 MPa，引風機頻率26～43 Hz，溫度設定35～50℃，蠕動泵流量10～60 r·min-1，產品溫度(35±5)℃］，質量增加約 5%。噴涂完畢，隔離丸于流化床設備內沸騰20～25 min出料，過內徑0.710～1.180 mm(16～24目)篩。

2.3 腸溶顆粒的制備 將鄰苯二甲酸二乙酯、滑石粉、磷酸氫二鈉加入適量水中，攪拌均勻，然后按比例加入Eudragit L30D-55分散體，攪拌60 min，過內徑0.180 mm(80目)篩，即得緩釋層水分散體包衣液，備用。取隔離微丸，置包衣造粒機中，用已配制好的丙烯酸樹脂包衣溶液進行包衣［設備參數:進風溫度設定38 ～50 ℃，氣壓壓強:0.2 ～0.4 MPa，霧化壓強:0.2 ～0.5 MPa，引風機頻率25 ～50 Hz，溫度設定35～50 ℃，蠕動泵流量10～30 r·min-1，產品溫度(40±2)℃，增質量約12%］。包完衣后置于50℃烘箱內干燥老化24 h，取出得腸溶微丸。

2.4 耐酸力與釋放度測定

2.4.1 液相色譜條件［3］色譜柱為十八烷基鍵合填充柱(100 mm×4.6 mm，5μm);流動相:甲醇-水-四氫呋喃-5% 醋酸銨(5∶9∶3∶4);流速:1.0 mL·min-1;檢測波長:252 nm;柱溫:室溫;進樣體積:10 μL。

2.4.2 耐酸力測定 取本品6粒，照《中華人民共和國藥典》2010年版二部附錄X C第一法溶出度測定法，以鹽酸溶液(9→1 000)500 mL為溶劑，100 r·min-1，經2 h，取下轉籃，以水沖洗除去轉籃內顆粒表面的酸液至中性，將轉籃內顆粒移置100 mL量瓶，加磷酸鹽緩沖液(pH11.0)(取 0.25 mol·L-1磷酸鈉溶液 110 mL，加 0.5 mol·L-1磷酸氫二鈉溶液220 mL，用水稀釋至1 000 mL，混勻)約60 mL，超聲處理使甘草酸二銨溶解，加上述緩沖液稀釋至刻度，精密量取5 mL，置50 mL棕色量瓶，用水稀釋至刻度，搖勻，精密量取20 μL 注入液相色譜儀，照“2.4.1”項方法測定。另取煙酰胺對照品10 mg，精密稱定，以磷酸鹽緩沖液(pH=11.0)溶解并稀釋成約 1 μg·mL-1溶液，同法測定，按外標法以峰面積計算，結果乘以1.898，耐酸力不得小于90%。

2.4.3 釋放度的測定［4］照《中華人民共和國藥典》2010年版二部附錄X D釋放度測定法第二法。取6片，以人工胃液500 mL為溶劑，轉速100 r·min-1，2 h后，在容器中加入預熱至37℃的0.235 mol·L-1磷酸氫二鈉溶液400 mL，繼續依法操作，經45 min時，精密量取續濾液5 mL置于具塞試管中，加0.25 mol·L-1氫氧化鈉溶液1.0 mL，搖勻，作為供試品溶液。另取煙酰胺對照品10 mg，精密稱定，以磷酸鹽緩沖液(pH=11.0)溶解并稀釋成約 1 μg·mL-1溶液，作為對照品溶液。取供試品溶液和對照品溶液，照“2.4.1”項方法測定，按外標法以峰面積計算，結果乘以1.898，每粒的釋放量不得小于75%。

2.4.4 線性關系考察 取甘草酸二銨適量，用磷酸鹽緩沖液(pH=11.0)配制成1 mg·mL-1儲備液，分別吸取1，2，5 mL 置于 100 mL 量瓶，吸取 1，2，5 mL 置于10 mL量瓶，加入磷酸鹽緩沖液(pH=11.0)稀釋至刻度，成濃度為 10，20，50，100，200，500 μg·mL-1系列溶液，依法測定，以甘草酸二銨濃度與相應的峰面積進行線性擬合，得方程:Y=0.305X+170.69，R2=0.999 4。結果表明，在10～500 μg·mL-1濃度范圍內，甘草酸二銨的量與相應的峰面積呈良好的線性關系。

2.4.5 耐酸力和緩沖液中釋放度測定 將3批甘草酸二銨腸溶微丸按“2.4.2”和“2.4.3”項檢測，結果批號為010215，010216，010217的樣品，耐酸力分別為93.7%，95.1%，96.5%;釋放度分別為 86.6%，91.8%，88.7%。由此可知，3批甘草酸二銨腸溶微丸均符合標準規定。

2.5 腸溶微丸處方優化 選取微晶纖維素含量(A，%)、HPMC 增質量(B，%)和 Eudragit增質量(C，%)為因素，以45 min藥物溶出度為指標，采用L9(34)正交設計實驗優化處方(表1)，篩選出符合要求的最優處方。

表1 正交實驗因素與水平%

3 結果

3.1 腸溶微丸處方優化結果 正交實驗結果見表2，由表2可知，最優處方為 A2B2C1，即微晶纖維素為15%，HPMC增質量為4%，Eudragit L30-D55增質量為18%。

3.2 腸溶微丸溶出度測定結果 按最優化處方，制備3批腸溶微丸并測定在人工胃液中溶出2 h后，人工腸液45 min中的溶出度。腸溶微丸在人工腸液中釋放迅速，達到了速釋的目的。

3.3 腸溶微丸含量及耐酸力考察結果 腸溶微丸3批，含量及耐酸力測定結果3批樣品耐酸力良好，批次間差異較小。

表2 正交實驗設計表

4 討論

甘草酸二銨腸溶膠囊是中藥甘草有效成分的第3代提取物及磷脂酰膽堿的混合物。具有較強的抗炎、保護肝細胞膜及改善肝功能的作用。該產品使用擠出滾圓-微型流化床包衣法制備甘草酸二銨微丸，以正交實驗法對處方進行了優化，腸溶微丸耐酸性好，在人工腸液中釋放迅速、完全，批次間差異較小。本實驗制備工藝簡單、易操作、重復性好，適宜工業化生產。

［1］SHIOTA G，HARADA K，LSHIDA M，et al.Inhibition of hepatoceular carcinomaby glycyrrhizin in diethylnitrosamine-treated mice［J］.Carcinogenesis，1999，20(1):59.

［2］王中彥，唐星，張向榮，等.硝苯地平阿替洛爾緩釋膠囊的制備與體外釋放［J］.沈陽藥科大學學報，2003，19(2):90－91.

［3］甘草酸二銨膠囊［S］.WS12(X2416)22003Z.

［4］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(二部)［M］.北京:中國醫藥科學技術出版社，2010:附錄X85，87.