犬細小病毒病的最新研究進展

陸冠亞 王仍瑞

犬細小病毒病的最新研究進展

陸冠亞 王仍瑞

細小病毒病，是由犬細小病毒引起的犬的一種高度接觸性傳染病，以犬急性出血性腸炎或幼犬急性心肌炎為主要特征，給養犬業的發展造成了嚴重的損失。本文就犬細小病毒病的病原、流行特點、臨床癥狀、病理變化、診斷和防制措施等研究近況進行綜述。

一、病原

犬細小病毒病病原為犬細小病毒2型（CPV-2），它屬于細小病毒科，細小病毒屬。病毒粒子細小，直徑20～22nm，20面體對稱，無囊膜，在氯化銫中的浮密度為1.43g/cm3?；蚪M為單股DNA，大小為5233bp。病毒粒子有VP1、VP2、VP3三種多肽，其中VP2是衣殼蛋白主要成分，有血凝活性，能在4℃和25℃凝集豬和恒河猴的紅細胞，但不能凝集其他動物的紅細胞。本病毒能在多種不同類型的細胞內增殖，通常用MDCK和F81等傳代細胞分離培養病毒。在MDCK上常形成核內包涵體。CPV-2易發生抗原漂移，近年來，在抗原性、宿主范圍和血凝性上都發生了變化。CPV-2有a、b、c三個亞型，但致病性無明顯差異，我國目前以CPV-2a流行為主。

病毒對外界環境有較強的抵抗力，室溫下可存活3個月，60℃時能存活1h，在pH值3～9和56℃條件下能穩定1h以上，室溫下糞便中的病毒在6 個月以內仍具感染性。CPV對甲醛、β-丙內酯、羥胺和紫外線敏感，但對氯仿、乙醚等有機溶劑和去膽堿鹽有較強的抵抗力。

二、 流行病學

CPV主要感染犬，偶爾也可見于貂、狐、狼等其他犬科和鼬科動物。各種年齡和品種的犬均易感，但純種犬易感性極高。2～4月齡幼犬易感性最強，病死率最高。3～4周齡犬感染后成急性致死性心肌炎的為多；8～10周齡以腸炎為主，但心肌細胞有核內包涵體。小于4周齡仔犬和大于5歲齡的老犬發病率低。本病多為散發，同窩發病率高，犬場常呈地方流行，持續時間長。

病犬是主要的傳染源。在感染后3～4天，即可通過糞、尿、唾液、嘔吐物等向外界排毒，傳染性強。7～10天后隨著體內抗體的增多，感染性降低。病毒主要隨污染的飼料、飲水，經消化道進入機體，外寄生蟲也能成為傳播媒介。病愈犬的糞尿長期帶毒，不經嚴格消毒的車輛、用具、飼養和醫療人員的衣、鞋、器具等也可成為散播本病的媒介。

本病一年四季均可發生，但以冬春季多發。長途運輸、飼養管理條件驟變以及寒冷、擁擠、衛生條件差等均可促進本病發生。

三、臨床癥狀

本病在臨床上主要以兩種形式出現，即腸炎型和心肌炎型。有的病犬同時具有腸炎型和心肌炎型的臨床癥狀，發病時間短，死亡率95%。

（一）腸炎型

潛伏期為7～14天，多見于青年犬。發病早期精神沉郁，食欲減少甚至廢絕，鼻鏡干燥，體溫高達40～41℃以上，成年犬發病一般不發熱。病犬常先嘔吐后腹瀉，嘔吐物中無食糜，開始為白色泡沫，繼而粘稠量少、沾取成絲，隨著脫水加重則成黃色，極個別的有淡綠色膽汁，帶血。排便次數增多，糞便呈黃色或灰黃色，稠厚惡臭，尿量減少，淡茶色。中期食欲廢絕，渴欲增加，頻繁嘔吐，腹瀉常呈噴射狀，糞便稀薄，混有大量黏液、氣泡或脫落的腸粘膜碎片。病后2～3天，糞便呈蕃茄汁樣，混有血絲，并有特殊血腥臭味。后期病犬消瘦、乏力、嗜睡、腹部蜷縮，眼球凹陷，皮膚彈性減退，因脫水致電解質紊亂，易發生酸中毒而于數小時至兩天死亡。病程稍長的，末期體溫降低、肢端濕冷，可視粘膜蒼白，排便失禁，尾部及后腹部常被糞便污染，嚴重者肛門松弛開張，衰竭死亡。病程短的4～5天，長的1周以上。

（二）心肌炎型

多見于流行初期或缺乏母源抗體的4～6周齡幼犬。常突然發病，初期精神尚好，僅有輕度腹瀉、嘔吐和體溫升高，后發展迅速，可視粘膜蒼白，病犬迅速衰弱，呻吟、干咳、呼吸困難，聽診有心內雜音，心律不齊，心電圖R波降低，S-T波升高。病犬常因急性心力衰竭突然死亡。病死率60%～100%，只有少數輕型病例可以治愈。

由于毒素的作用，易繼發呼吸困難、喘，最后心力衰竭死亡。毒素或作用于神經，造成腦出血、神經紊亂，作用于坐骨神經，造成癱瘓。

四、病理變化

病毒侵入后，感染的頭兩天，在口咽部復制，通過血流傳播到其它器官，3～5天后出現病毒血癥。病毒通過血流到達腸粘膜，并發生全身性感染。

（一）腸炎型

病死犬可視黏膜蒼白，皮下干燥，血液粘稠暗紫色，犬胃內空虛，底部有少量的出血點。小腸以空腸和回腸病變嚴重，腸壁漿膜暗紅色，漿膜下充血出血，黏膜壞死、脫落、絨毛萎縮，有時覆蓋纖維素性假膜。腸腔擴張，內容物水樣并混有血液和粘液，惡臭。大腸內容物稀軟，帶血，粘膜上有許多出血點。腸系膜淋巴結腫大，切面呈彌漫性出血。組織學檢查，小腸后段粘膜上皮變性壞死，有些變性或完整的上皮細胞內含有核內包涵體。隱窩腫大，腸腺消失，殘存腺體擴張，內含壞死的細胞碎片。

（二）心肌炎型

病變主要局限在肺和心臟。肺水腫，局灶性充血、出血，使肺表面色彩斑斕。心臟擴張，房室內有出血快。心肌和心內膜有非化膿性壞死灶，心肌損傷，有出血性斑紋，冠狀溝有少量出血點。組織學特征為心肌纖維彌漫性淋巴細胞浸潤，間質水腫和局限性心肌變性，受損心肌細胞中常有核內嗜堿性包涵體。膽囊充盈。

五、診斷

（一）臨床檢查：細小病毒病犬的嘔吐物往往是從白色、黃色到醬紅色泡沫，頻繁嘔吐，連續3～4天。待嘔吐停止，腹瀉開始。由灰黃色稀便到醬紅色血便。呈噴射狀水瀉，此時的病犬兩眼凹陷，弓背蜷縮，肛門松弛?？沙踉\為犬細小病毒性腸炎。

（二）組織學檢查

取小腸后段和心肌病料作組織切片，腸上皮細胞和心肌細胞可見核內包涵體。

（三）血常規檢驗

自病犬耳緣靜脈采血，WBC 計數低于6.0×103/mm3明顯減少（正常值應大于6.0×103/mm3）。

（四）快速檢驗

1.取病犬糞便，采用犬細小病毒快速診斷盒進行檢驗，如呈陽性反應，即可確診。

2.取糞便少許放于稀釋液中取一些滴于膠體金試紙條上5 min 后可見2 條紅線。

（五）病毒學檢查

1.電鏡檢查：采病犬糞便，直接或加等量PBS后混勻，離心，上清液加等量氯仿振動，再如前處理一次。吸取上清液滴于銅網上，用2%磷鎢酸負染后電鏡檢查。病初期可見大量均一直徑20～22nm圓形和六邊形散在病毒粒子。后期由于腸粘膜分泌性抗體出現，?？梢姶髩K聚集狀態的病毒粒子，效果欠佳。

2.免疫膠體金電鏡檢查：將接種CPV 的FK18 細胞培養物經3次凍融，加入驢抗犬細小病毒混勻，離心，用蒸餾水或PBS 懸浮沉淀物。向抗原抗體免疫復合物中加入稀釋的膠體金A蛋白液混勻，用蒸餾水或PBS充滿管，離心。將沉淀物懸浮，負染，干燥后觀察，可看到大量聚集的病毒粒子及抗體抗原免疫復合物和周圍附有的免疫金顆粒。

3.免疫電鏡檢查：用對流免疫電泳方法對犬PCV免疫復合物中抗體進行檢測。

病毒分離與鑒定：新疫區為了對流行毒株進行研究比較可采用此法。常用原代或次代犬胎腎或貓胎腎細胞培養物或它們的細胞系進行培養。最簡便的病毒鑒定方法是接種3～5天后用熒光抗體檢測細胞中的病毒或測定培養液中病毒的血凝性。

（六）血清學檢查：常用血凝和血凝抑制試驗。發病早期，可取病犬細胞培養物或糞便進行HA試驗測病毒校價。用0.5%～1%豬紅細胞作指示系統，HA＞1∶80可作為陽性感染指示標準。發病后期，由于IgM等抗體的出現，使CPV抗原失去血凝性，此時，用二巰基乙醇處理，便可檢查到糞便中的IgM等抗體和CPV抗原。血凝抑制試驗主要用于流行病學檢查，也可用于檢測糞便中的抗體。

（七）酶聯免疫吸附試驗：采用雙抗體法，應用特制的酶標反應小管、板或纖維素膜。國內外已研制出多種試劑盒。如用CPV單克隆酶標抗體制成的CPV快速診斷盒，可在2h內檢出糞便中的CPV抗原。

（八）PCR診斷技術：采用PCR試劑盒，簡便、靈敏、特異，可檢出微量CPV的DNA。

另外還可用熒光抗體試驗、免疫擴散試驗、核酸探針技術等法診斷本病。

六、預防

預防本病主要依靠注射疫苗和嚴格犬的檢疫制度。目前國內使用的疫苗有同源的和異源的滅活苗和弱毒苗兩類。異源苗是指貓泛白細胞減少癥滅活苗或弱毒苗，安全可靠。國外多傾向使用犬細小病毒滅活苗或弱毒苗。國內多生產單苗、二聯苗、三聯苗和五聯苗。一般幼犬于6～8周齡首免，滅活苗接種9次，間隔2～3周；弱毒苗接種1次，以后每年加強免疫1次。母犬則在產前3～4 周免疫接種。

新購進犬要問清防疫情況，隔離觀察，確保無病后再混群飼養。未經免疫的犬應先注射犬細小病毒單抗和犬瘟熱單抗，3周后再去接種疫苗，能起到很好地預防作用。

平時要加強飼養管理，提高抗病能力。在飼養方面，飼喂富有營養的飼料，提高犬的抗病力，減少疾病的發生。在管理方面，犬舍要做好清潔衛生工作，減少病原體的存在與傳播，控制疫病的發生和流行。

畜主要做好定期檢疫工作，一旦發現本病，應立即采取緊急隔離措施，固定飼養人員及工具，注意進行犬舍、用具及環境的徹底消毒，對犬舍和飼養用具用2%～4%燒堿液、1%福爾馬林、0.5 %過氧乙酸反復消毒。對無治愈希望的病犬，應盡早捕殺，焚燒深埋。

七、治療

本病早發現、早診治效果理想，治愈率可達90%以上。犬齡越大，治愈越快，心臟功能低下者、脫水嚴重者多預后不良。以提高動物機體免疫功能，調節機體滲透壓，防止脫水和繼發感染為原則。

（一）增強免疫

早期大劑量應用抗犬細小病毒高免血清、單克隆抗體或球蛋白等生物制品可以中和體內病毒。高免血清用量為0.5～1ml/kg 體重，連用3～5天。使用單抗等2～5ml/kg，每天1次，連用3天以上。同時配合轉移因子3～6萬或胸腺肽5～10mg，每日或隔日1次，連用3～5次。使用犬細小病毒性腸炎免疫球蛋白治療病犬治愈率高，平均達90.05%，尤其是小于3 月齡的幼犬，治愈率高達93.88%。

（二）合理補液

病犬常因劇烈嘔吐、腹瀉、脫水，造成機體電解質平衡紊亂并發酸中毒，引起機體衰竭而短期死亡，因此補液是關鍵。應根據脫水程度與全身狀況，確定補液量和所需添加的成分。一般靜脈補液量輕度脫水時為40～50ml/kg ，中度 50～80ml/kg ，重度 80～120ml/kg。

發生脫水的性質以低滲和等滲為主。初期多屬低滲性脫水，補鹽為主，補糖為輔，臨床上以2份復方生理鹽水，1份5%的葡萄糖為宜。酌情加入ATP、輔酶A、VC、肌苷等。中后期發生等滲性脫水，甚至休克，應補充等滲液或混合液（2∶2∶1）（2份生理鹽水、2份GS，1份1.5%NaCO3）。發生休克時，應先用6%的右旋糖酐或代血漿20ml/kg靜注，然后滴注2∶2∶1混合液，也可肌注地塞米松5～15mg。同時應注重補鉀，采取少量，多次、慢速、不宜過早的原則，一般每天靜注10%氯化鉀5～10毫升 2～3 天。病犬后期伴有震顫、抽搐時，應考慮及時補鈣，用10%的CaGS 1～2ml/kg+5%GS 20～40ml/kg 緩慢靜注或滴注?；謴推诮M織細胞處于饑餓狀態，機體低血糖，宜以25%GS、10%KCL、VC、VB6、肌苷、氨基酸等幫助肝功能的恢復和組織細胞的生成與釋放。

在整個輸液過程中，須掌握以下原則：缺什么補什么，缺多少補多少；先鹽后糖，先快后慢；見尿補鉀，見酸補堿，見驚補鈣。

亦可采取腹腔補液，避免因靜脈輸液引起心肺負擔加重，出現輸液反應。一般犬的腹腔補液量80m1/kg體重為宜，臨床上常用糖鹽水150ml～1500ml、VC 注射液1000mg～3000mg 、地塞米松注射液6mg～20mg腹腔注入。VK3 注射液5ml～10Mi，林可霉素注射液60萬～300萬單位或用頭孢唑林鈉0.5g～0.6g，肌注。體溫下降用肌苷2ml～8ml、樟腦磺酸鈉注射液1ml～3ml、阿托品注射液3mg～20mg，8小時肌注1次。

（三）對癥治療

1.止吐：可選用阿托品和維生素B6等。應注意：當病犬胃腸空虛且便血時，不宜選用動力性止吐藥，如胃復安、嗎丁啉會加重胃腸炎出血癥狀，可選用使胃腸活動靜息的止吐藥，如愛茂爾、阿托品和氯丙嗪等。

2.止瀉：主要著重于消炎。臨床用于治療的抗生素有氨基糖甙類、四環素類、喹諾酮類，共同特點是對最易引起腸炎的革蘭氏陰性菌有抑制或殺滅作用。但當腹瀉為出血性時，不宜選用氯霉素；伴有頻繁嘔吐時，不應選用對胃腸黏膜強刺激，易引起嘔吐的土霉素和四環素；喹諾酮類的吡哌酸和氟哌酸療效顯著，但常因口服給藥引起嘔吐。因此，選用氨基糖甙類抗生素，肌肉或靜脈注射較合理。對嚴重的腸道感染，可聯合應用廣譜半合成青霉素，及短期應用糖皮質激素。同時適時用藥減緩腸蠕動，如與氨基糖甙類抗生素混合肌注阿托品或口服普魯本辛、顛茄或復方苯乙哌啶等抗膽堿藥。

3.止血：止胃腸出血常用止血藥有：安絡血、止血敏、維生素K3 、止血芳酸等。發病初期用安絡血或止血敏，可降低毛細血管通透性、促使血小板釋放凝血因子；中期可用VK3 ，促使血漿凝血因子的生成；后期用止血芳酸或氨甲苯酸，抑制纖維蛋白溶解。同時補充適量CaGS和維生素，可降低消化道黏膜通透性，提高療效，促進損傷愈合。

（四）抑制病原與預防繼發感染

以選用抗病毒藥為主，如病毒靈、病毒唑等。同時，使用抗菌藥如氨芐西林、慶大霉素等防止繼發細菌感染。但不要長時間使用，以防腸道正常菌群失調，反而延緩腸道消化功能的恢復。

（五）輔助療法

1.灌腸：因病犬的嘔吐中樞反應靈敏, 口服用藥一般不宜采用，可將藥物灌腸吸收，對于應用腸道止血藥效果更佳?？上扔?.1%高錳酸鉀溶液不保留灌腸,清洗腸內糞便和瘀血。然后用諾氟沙星、小兒瀉痢停、鞣酸苦參堿膠囊、甲硝唑片、云南白藥膠囊、安絡血片碾成粉末混合加入止血敏注射液，口服補液鹽水(ORS)中，應保留灌腸20分鐘以上，使藥液達到整個小腸。也可用白頭翁湯合郁金散加減，水煎灌腸。每天1次，連用2～3次，具有良好的止瀉、止血、消炎的效果。

2.輸血療法：采用相合血試驗選擇供血犬，取抗凝血10～15ml加入5%葡萄糖生理鹽水和1支地塞米松一次靜注，再作一般抗病毒治療1～2天便可治愈不復發。因為輸血可補充受血病犬的凝血因子，迅速刺激機體的造血機能，提高機體的免疫抗病力，所以起到了加快戰勝病毒的效果。

（六）中醫治療

綜合臨床癥狀及病理變化，可將其病理病機概括為：濕熱之毒內郁脾腑，侵入營血，傷脾耗血。第一病位是小腸，第二病位是心。小腸屬脾，治療當以調理脾腑運化水濕為基礎，宣化清解濕毒為主，涼血益陰解血毒為輔。

1.藥物治療：發病初期為濕毒內郁，脾氣受損。治療以化濕解毒為主，輔以健脾理氣、清熱涼血。藥用石菖蒲、木通、連翹、茵陳、生白術、白頭翁、苦參、茜草、虎杖等。 發病中期為濕毒擁盛，氣機逆亂，毒入心營、耗血傷氣。治療宜化濕解毒清熱、止嘔、涼血、補陰益氣。藥用川連、苦參、飛滑石、玄參、雙花、藿香、蛇舌草、穿心蓮、生地、黨參、虎杖、茜草、地榆、郁金、朱砂、紫草等。發病后期為陰竭陽脫、氣陰兩敗。治療用益陰回陽之法，宜重陰重陽兼以益氣。用洋參附子湯一般可使危重病情得到緩解。在病犬精神、體力恢復后，再配以化濕解毒、益陰涼血之藥調理，可參照黃連解毒湯、藿香正氣散與炙甘草湯的組方適當加減，將三方化為一方用，可得良效。

2.針灸療法：針灸脾俞、胃俞、三焦俞、大腸俞、關元俞、小腸俞、后海穴。

（七）中西醫結合治療

合理用藥效果更佳。

（八）加強護理

病初要禁食禁水1～2天，若出現好轉再給予少量易消化的營養餐，采用多酶片、復合維生素B等促進消化機能藥物，以促進患犬恢復食欲，達到疾病康復的目的；出現體溫下降的病犬可用250W的紅外線燈加熱以利于體溫回升。

(作者單位：陸冠亞，南京出入境檢驗檢疫局，211106；王仍瑞，廈門出入境檢驗檢疫局，361012）

（編輯：李 冰）