水通道蛋白1在卵巢癌組織中的表達

王艷麗,朱繼紅,高永梅,張利群

(吉林大學第一醫院婦產科,吉林長春130021)

卵巢癌患者大多伴有大量腹水,目前其病理機制尚不完全清楚。水通道蛋白1(AQP1)是Agre最早發現的水通道,它分布廣泛,具有特異轉運水的功能,與多種疾病的發生和發展密切相關,目前已成為眾多學者研究的熱點[1]。AQP-1與卵巢腫瘤的關系國內外至今報道很少,本試驗通過免疫組織化學技術檢測AQP1在卵巢癌組織的表達,并初步探討其意義。

1 資料與方法

1.1 標本來源

收集吉林大學第一、第二醫院2000-2004年手術治療的66例卵巢漿液性腫瘤標本和10例卵巢正常組織作為對照。66例卵巢漿液性腫瘤標本中,良性12例,交界性8例,惡性46例,在46例卵巢漿液性惡性腫瘤中,從病理分化程度上看:高分化12例,中分化18例,低分化16例;從臨床分期上看:Ⅰ期14例,Ⅱ期18例,Ⅲ-Ⅳ期14例;有腹水36例(腹水均以腹腔穿刺放液或開腹后以出量計算,＞200 ml認為有腹水)?；颊吣挲g38-83歲,平均年齡58歲。上述標本離體后經4%多聚甲醛固定48小時,石蠟包埋,連續切片3 μ m厚,HE染色,病理證實。

1.2 試劑與方法 AQP1單克隆抗體及SP試劑盒由福州邁新公司提供,常規免疫組織化學染色,DAB發色。以PBS代替一抗作陰性對照,分別以已知的AQP1陽性的卵巢癌組織切片作陽性對照。

1.3 結果觀察和判定

AQP1腫瘤細胞的細胞漿出現棕黃色顆粒作為陽性細胞,表達的判定以陽性細胞百分率進行評估。陽性細胞＞50%為陽性表達;陽性細胞＜50%為陰性表達。

1.4 統計學分析 各組率的比較采用 χ2檢驗。

2 結果

2.1 AQP1在正常卵巢組織及卵巢漿液性腫瘤組織中的表達

AQP1在卵巢漿液性癌及卵巢交界性漿液性腫瘤中陽性率分別為82.6%和62.5%,明顯高于正常卵巢,差異有顯著性(P＜0.05)。卵巢良性漿液性腫瘤陽性率為25%,與正常卵巢組織比較,差異無顯著性(P＞0.05)。(見表1)

表1 AQP1在正常卵巢和卵巢漿液性腫瘤組織中的表達

2.2 AQP1表達與卵巢漿液性癌臨床病理特征

卵巢漿液性癌中AQP1的表達與臨床分期、病理分級以及有無腹水的關系見表2,不同臨床分期和病理分級的卵巢漿液性癌組織中AQP1陽性率比較,差異均無顯著性(P＞0.05);卵巢漿液性癌有無腹水時癌組織AQP1表達陽性率分別為72.2%和40%,兩者比較,差異有顯著性(P＜0.05)。

表2 卵巢漿液性癌不同臨床病理特征與AQP1表達的關系

3 討論

1988年Agre等在鑒別人類Rh血型抗原時偶然在紅細胞膜上發現了1種新的跨膜蛋白[1]。1991-1992年Agre等又完成了該蛋白的分子克隆和功能鑒定,證明該蛋白具有水通道功能,從而確認了細胞膜上存在轉運水的水通道蛋白的理論[2]。這種新的跨膜蛋白分子量為2.8×103,于1997年被正式命名為水通道蛋白1(AQP1).隨后,在許多動、植物及微生物中相繼發現水通道蛋白。目前哺乳動物的組織中已經鑒定13種水通道白(AQP0-AQP12),廣泛分布于各種組織和器官,在維持機體的水平衡中起著重要的作用,且與水平衡紊亂所造成的一些疾病密切相關,其中以AQP1分布最廣,作用最多。AQP1廣泛分布于機體,特別是那些與液體吸收和分泌有關的上皮細胞及可能協同水跨膜轉運的內皮細胞中,AQP1只允許水自由雙向的穿過細胞膜,不轉運離子,質子等[3]。研究發現:多種腫瘤組織亦表達AQP1,可能與腫瘤細胞的起源,生長、轉移等密切相關[4,5]。此外,在微血管內皮細胞也發現AQP1的高度表達,推測AQP1的高表達也可能與腫瘤的血管新生有關[6-8]。本實驗研究發現:AQP1在正常卵巢、卵巢良性漿液性腫瘤、卵巢交界性漿液性腫瘤、卵巢漿液性癌腫均有表達。與正常卵巢陽性率20%比較,卵巢交界性漿液性腫瘤、卵巢漿液性癌陽性率分別為82.6%和62.5%,明顯高于正常卵巢,差異有顯著性(P＜0.05);卵巢良性漿液性腫瘤雖有表達,但是與正常卵巢組織比較,差異無顯著性(P＞0.05)。卵巢癌在病理分級和臨床分期上,差異沒有顯著性(P＞0.05),與石一復[9]等研究結果不同,考慮可能和研究樣本的數量相對較少有關。由此推測考慮AQP1可能與卵巢癌的發生、發展有關。卵巢漿液性腫瘤腹水的發生均在惡性腫瘤中出現,交界性和良性腫瘤中均未出現,而且惡性卵巢漿液性腫瘤有腹水和無腹水AQP1的表達比較差異有顯著性(P＜0.05),由此推測卵巢癌的腹水的發生可能和AQP1有關。

AQP1在腹膜毛細血管、內皮細胞、間皮細胞均有表達,考慮與腹水的吸收有關;Yang等[10]應用基因敲除技術研究發現AQP1敲除后的小鼠對水通透性能力明顯下降,但對非滲透性水重吸收無影響。Akiba等[11]利用腹膜間皮細胞培養研究發現:隨著培養液中葡萄糖和甘露醇濃度的升高,AQP1mRNA表達增強,這就為細胞因子血管活性介質、滲透性物質調節腹膜AQP1表達和水轉運提供可能,也為今后調控AQP1來改變腹膜水通透探索一系列藥物提供實驗依據(包括增加腹水重吸收及加強利尿藥物的療效)。本研究明確了AQP1在卵巢癌組織中高表達,可能為卵巢癌的病理機制和卵巢癌腹水的發生到增多可能提供了新的理論依據,為卵巢癌的臨床治療提供新的靶點。

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