牛王刺對小鼠腸系膜微循環的影響

董興高

湖北民族學院醫學院，湖北 恩施 445000

牛王刺為豆科植物云實Caesalpinia decapetala(Roth)Alston［Reichrdia decapetala Roth;Caesalpinia sepiaria Roxb.］的干燥根。為恩施常用民族藥物，味辛性溫。具祛風除濕，散瘀止痛，解毒消腫功效［1－2］。我們前期研究已證實牛王刺具有明顯的鎮痛、抗炎作用［3－4］。本實驗觀察了牛王刺對正常小鼠腸系膜微循環細動、靜脈血管口徑以及毛細血管開放量情況的影響，探討其活血作用的機制，為開發利用牛王刺提供理論依據。

1 材料和方法

1.1 藥材 牛王刺由湖北咸豐縣中醫院提供。

1.2 動物 ICR昆明小鼠，體重18～22g，雌雄兼用，由湖北省實驗動物研究中心提供，合格證號:SCKK2003－0005。

1.3 試劑 烏拉坦溶液由本院醫學實驗中心提供，乙醇為分析純。

1.4 供試液的制備 取供試藥材適量，用50%乙醇超聲提取2次，每次45分鐘，合并，回收乙醇，濾過，將濾液濃縮配制成1g/ml(按生藥材計算)的水溶液，備用。

1.5 儀器 CQ－250超聲波清洗器 (上海弘興超聲電子儀器有限公司)，X52－H光學顯微鏡 (成都泰盟科技有限公司提供)，TK－C721EC彩色攝象機 (北京杰偉世音頻設備有限公司組裝)，HW－2000微循環數字恒溫儀 (成都泰盟科技有限公司生產)，BI2000圖象分析系統 (成都泰盟科技有限公司生產)等。

1.6 小鼠腸系膜微循環的測定 選取小鼠10只，按照每只0.5ml牛王刺提取液的標準灌胃后，按0.7ml/100g標準肌注烏拉坦溶液麻醉，沿小鼠腹部中線用手術剪刀切開，置顯微鏡載物臺上并固定，調節顯微鏡，在回盲部分別選取10～20μm之間的細動脈和20～30μm之間的細靜脈各一支，用100倍鏡進行觀察，用顯微測微尺分別測定給藥后10min、20min、30min、60min小鼠腸系膜微循環細動脈(A)及細靜脈 (V)的口徑。同時記錄給藥后10min、20min、30min、60min毛細血管開放數量 (毛細血管網交點記數法)，以判斷微循環改善情況［5］。

1.7 統計學方法 以平均值±SD表示，配對t檢驗，由spss11.5系統完成。

2 結果

2.1 牛王刺對小鼠腸系膜微血管口徑的影響 給藥后小鼠腸系膜微循環細動、靜脈口徑在60min內呈增大狀態，30min時為作用高峰，60min仍然有擴張作用，與10min時作用強度相似，與給藥前相比差異均有統計學意義 (表1～2)，表現出快速而持久的擴張血管的作用，從而改善局部的微循環。

表1 牛王刺對正常小鼠腸系膜細動脈口徑的影響(±SD，n=10)

表1 牛王刺對正常小鼠腸系膜細動脈口徑的影響(±SD，n=10)

注:與給藥前相比，＊＊p＜0.01。

給藥前A口徑(m)給藥后A口徑 (m)10min(增加值)20min(增加值)30min(增加值)60min(增加值)15.4 ±1.43 16.7 ±1.53＊＊(1.30±0.840)18.3 ±1.57＊＊(2.60±0.673)19.3 ±1.70＊＊(3.90±0.735)16.6 ±1.48＊＊(1.20±0.630)

表2 牛王刺對正常小鼠腸系膜細靜脈口徑的影響 (±SD，n=10)

表2 牛王刺對正常小鼠腸系膜細靜脈口徑的影響 (±SD，n=10)

注:與給藥前相比，*p＜0.05，＊＊p＜0.01。

給藥前V口徑(m)給藥后V口徑 (m)10min(增加值)20min(增加值)30min(增加值)60min(增加值)25.5±2.20 26.7±2.40*(1.20±1.220)27.9 ±2.41＊＊(2.40±0.962)28.8 ±2.74＊＊(3.30±0.820)26.5 ±1.95＊＊(1.00±0.941)

2.2 牛王刺對小鼠毛細血管開放量的影響 給藥后小鼠腸系膜血流速度加快，毛細血管開放數量增多，在30min時達到高峰，60min時仍然有較好的作用，作用強度與10min時相似，與給藥前相比差異均有統計學意義 (表3)。

表3 牛王刺對正常小鼠腸系膜毛細血管開放量的影響 (±SD，n=10)

表3 牛王刺對正常小鼠腸系膜毛細血管開放量的影響 (±SD，n=10)

注:與給藥前相比，＊＊p＜0.01。

給藥后 (個/mm2)給藥前(個/mm2)10min(增加值)20min(增加值)30min(增加值)60min(增加值)4.7 ±0.68 5.7±1.20＊＊(1.0±0.65)6.8 ±1.23＊＊(2.1±0.62)8.2 ±1.12＊＊(3.5±0.68)5.5 ±0.95＊＊(0.8±0.46)

3 討論

本實驗采用活體腸系膜微循環觀察法，檢測了牛王刺對小鼠腸系膜微循環的影響。實驗結果表明牛王刺對小鼠腸系膜細動脈和細靜脈口徑均具有不同程度的擴張作用，能增加微毛細血管的開放數量，作用迅速持久。另外，在實驗中觀察到在給藥后10～15min，伴隨著毛細血管開放數量的增加，微循環血流速度也明顯加快。因此，擴張毛細血管、增加毛細血管開放數量和增加微循環血流速度是牛王刺具有良好活血、鎮痛作用的機制之一，這將為牛王刺用于臨床治療微循環障礙類疾病提供參考。但牛王刺對腸系膜微循環影響的主要活性部位或成分還有待進一步明確。研究其對血液流變性和凝血機制的影響，能更全面深入了解牛王刺活血和鎮痛的作用機理。

［1］方志先.土家族藥物志 (上冊) ［M］.北京:中國醫藥科技出版社，2007:190.

［2］國家中醫藥管理局《中華本草》編委會.中華本草 (第4卷) ［M］.上海:上?？茖W技術出版社，1999:370.

［3］董興高.牛王刺鎮痛作用的實驗研究 ［J］.中國民族民間醫藥，2012，21(174):35.

［4］董興高.牛王刺抗炎作用的實驗研究 ［J］.中國民族民間醫藥，2012，21(177):48－50.

［5］陳奇.中藥藥理研究方法學［M］.北京:人民衛生出版社，1993:499－503.