熒光光度法測定啤酒中的甲醛

肖春妹，王榮福

（1.泉州師范學院，福建 泉州 362011；2.中國石油四川石化有限責任公司，四川 成都 611930）

熒光光度法測定啤酒中的甲醛

肖春妹1，王榮福2

（1.泉州師范學院，福建 泉州 362011；2.中國石油四川石化有限責任公司，四川 成都 611930）

考察了乙酸銨、乙酰丙酮的濃度、pH值等因素對甲醛與乙酰丙酮及乙酸銨特性反應的影響，得到最佳反應條件.在此基礎上建立了熒光光度法測定啤酒中的甲醛含量新方法，實驗結果表明：該方法具分析時間短、精密度和回收率高，可用于啤酒中痕量甲醛的分析.

甲醛；熒光光度法；啤酒

在傳統的啤酒生產過程中，糖化時加入適量甲醛可有效地減少麥汁中多酚和花色苷含量，使啤酒非生物穩定性大為改善，并增加了啤酒的透明度和穩定性，而且也使麥汁及啤酒的還原性下降,提高啤酒的保質期[1]，故成品啤酒中存在著少量甲醛.由于啤酒行業的競爭過于激烈，某些廠家為了增加啤酒的感觀等，在制作過程中也加入少量甲醛，可能導致甲醛殘留超出國家標準限制.因此，檢測啤酒中甲醛的含量一直是啤酒行業乃至社會都非常關注的問題.本文根據甲醛與乙酰丙酮反應產生的黃色物質在激發下可發射熒光的性質來測定啤酒中甲醛的含量[2].

1 實驗方法

1.1 主要儀器

熒光光度計，Cary/Eclipse，東南化學儀器有限公司；數字酸度計，pHS-3C，杭州東星儀器設備廠.

1.2 主要實驗藥品

甲醛，上海聯試化工試劑有限公司；乙酰丙酮，國藥集團化學試劑有限公司；檸檬酸銨，天津基準化學試劑有限公司；乙酸銨，上海試劑四廠；鉬酸銨，上海試劑四廠；冰乙酸，上海聯試化工試劑有限公司；乙醛，上海試劑一廠，等試劑.

1.3 溶液的配置

1.3.1 碘量法標定HCHO所需的溶液的配置，參考文獻[3].

1.3.2 熒光光度法測定HCHO的濃度所需的溶液的配置

銨鹽的配置 [NH4+]=0.5mol/L鉬酸銨溶液50mL;[NH4+]=6mol/L檸檬酸銨溶液 50mL；[NH4+]=6mol/L乙酸銨溶液250mL，按常規方法以相應的鹽和二次蒸餾水溶解配制.

2.0 ug/mLHCHO標準溶液250mL:取已經標定的HCHO標準溶液（1.706g/L）0.29mL準確釋成250mL.

0.05 mol/L的乙酰丙酮(現配現用)100mL:移取密度為0.972-0.974g/mL的乙酰丙酮0.52mL，用100mL容量瓶定容.

1：4乙酸水溶液（體積比）：移取10mL乙酸稀釋成50mL.

濃度是HCHO的10倍的乙醛溶液：取0.1mL乙醛（40.0%）準確稀釋成25mL；再取其中的2.9mL稀釋成250mL溶液.

1.4 啤酒樣品的提取

取瓶裝啤酒一瓶，放置冰箱中，冰至10-15℃，取出，開蓋后快速過濾到燒杯中，除去啤酒中的CO2.準確移取過濾后的啤酒試樣100mL于250mL圓底燒瓶中，加25mL蒸餾水，幾粒沸石.用普通蒸餾裝置緩緩蒸餾，用100mL容量瓶接收（外加冰水?。┘s95mL，取下容量瓶，放置至室溫，用蒸餾水定容至刻度.則該樣品中的HCHO含量就是啤酒中的HCHO含量.

2 結果與討論

2.1 熒光最佳激發波長和發射波長的確定

乙酰丙酮和甲醛在乙酸銨—乙酸體系中與NH4+反應生成的黃色產物具有熒光性質，其激發光譜和發射光譜見圖1，由圖可以看出最佳激發波長為424nm，最佳發射波長為515nm.因此，本實驗采用激發光譜波長為424nm，發射光譜波長為515nm.

2.2 銨鹽的確定

鉬酸銨、檸檬酸銨和乙酸銨這三種銨鹽都能跟乙酰丙酮、甲醛反應，都能較快生成黃色物質.實驗表明，鉬酸銨溶解度很小，且隨pH值降低,反應體系中就會有鉬藍生成,干擾產物的顏色，因此不宜選擇鉬酸銨；檸檬酸銨在濃度較高時也有干擾峰出現,因此不宜選擇檸檬酸銨.乙酸銨的溶解度大，[NH4+]可達6mol/L，且乙酸與乙酸銨能形成緩沖體系,保證了pH值穩定，從而使體系穩定.從圖2可以看出，隨乙酸銨加入的量的增加，產物的熒光強度也隨著增大，在5.0mL以上的乙酸銨時，熒光強度維持恒定，因此實驗中乙酸銨的最佳加入量是5.0mL.

2.3 乙酰丙酮濃度對If值的影響

在424nm激發波長下，固定HCHO、乙酸銨，改變乙酰丙酮的加入量，測定其熒光強度，從圖3可以看出，隨著乙酰丙酮的加入量的增加，熒光強度最終趨于穩定.

2.4 體系pH值對熒光強度的影響

在424nm激發波長下，固定HCHO、乙酸銨、乙酰丙酮，改變乙酸加入量.測定體系的不同pH值和熒光強度值，從圖4可看出，隨著pH值的增加，熒光強度先增加，然后降低，在pH=6.0時, 熒光強度值最大.

2.5 啤酒樣品的測定

2.5.1 標準曲線的線性關系

在以上最佳的實驗條件下，測定一系列不同HCHO濃度(Y)的體系的熒光強度值(X)，得到的標準曲線Y=0.11503X-0.31715，r=0.999，表明有良好的線性關系.

2.5.2 精密度得測定

對5個不同品牌的啤酒樣品分別重復測定5次，測得RSD為0.23～3.20%，表明有良好得精密度.

2.5.3 回收率的測定

往已測定的啤酒中加入已知濃度的HCHO，測定其回收率，結果如表1所示，其平均回收率為99.0%.

表1 回收率的測定

3 結論

考察了乙酸銨的濃度、乙酰丙酮的濃度和體系的溫度、pH值等因素對甲醛測定的影響，確定了體系反應的最佳條件.在該條件下，建立了啤酒中甲醛得測定方法，實驗結果表明，該方法具有分析時間短，精密度和收回率高，可用于啤酒中痕量甲醛的分析.

〔1〕管敦儀.啤酒工業手冊[M].北京：輕工業出版社,1985.7，10-11.

〔2〕羅斌.啤酒中甲醛殘留測定方法之探討[J].江西化工,2002（4）.

〔3〕華中師范大學,東北師范大學，等.分析化學實驗[M].北京：高等教育出版社,2001.96-100.

TS262.5

A

1673-260X（2012）06-0108-02