當歸補血湯對環磷酰胺所致家兔血細胞減少的影響

張 敏，李旭廷，曾富強，袁定勝，李金良，王 斌

（四川省畜牧科學研究院，四川 成都 610066）

當歸補血湯是經典的氣血雙補名方，由金元四大家之一的李東垣所創制，首見于《內外傷辨惑論·暑傷胃氣論》。該方由黃芪和當歸以5∶1比例組成，臨床主要用于勞倦內傷、氣弱血虛和陽浮外越等癥?，F代研究表明，當歸補血湯水煎液中含有當歸多糖、黃芪多糖以及阿魏酸等多種生物活性成分，具有改善血液系統功能，調節機體免疫功能、保肝、抗氧化等多種功能。本研究選擇家兔作為研究對象，使用環磷酰胺制造家兔血虛證模型，考察當歸補血湯對家兔血虛證的治療效果，為其在畜牧生產中的應用提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實驗動物 8周齡左右的健康新西蘭白兔40只，體重1.7～1.9kg，雌性，購自成都某兔業發展有限責任公司。

1.1.2 藥品 黃芪、當歸飲片均購至成都某藥業有限公司，按照5∶1比例用純凈水浸泡1 h，加熱煎煮2次，每次2 h，合并2次濾液，減壓濃縮至生藥含量為1 g/mL。注射用環磷酰胺，通化某制藥有限公司生產，批號：100101；玉屏風口服液，廣州某藥業股份有限公司生產，批號：100302。旋轉蒸發儀，上海亞榮儀器廠生產。

1.2 方法

1.2.1 試驗家兔的分組與處理 將40只家兔空腹稱重后，隨機分為4組，每組10只。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組按75mg/kg體重腹腔注射環磷酰胺（Cy），連續3d，誘發家兔血細胞減少，Ⅳ組等劑量注射生理鹽水作為健康空白對照。試驗第4日起，Ⅰ、Ⅱ組分別口服給予1mL/kg的當歸補血湯和玉屏風口服液直至試驗結束，Ⅲ組、Ⅳ組口服等量生理鹽水至試驗結束。試驗期為15d。觀察白細胞計數（WBC）、紅細胞計數（RBC）、平均血紅蛋白含量（HGB）、血小板計數（PLT）等血液學指標和增重等生長性能指標。

1.2.2 樣品的采集與檢測 各組均于試驗的第15 d空腹稱重，然后在耳緣靜脈采血，肝素抗凝，檢測白細胞計數（WBC）、紅細胞計數（RBC）、平均血紅蛋白含量（HGB）、血小板計數（PLT）。

1.2.3 數據處理 所有試驗數據用SPSS軟件進行分析處理，LSD比較差異顯著性；所有數據用“平均值±標準差”表示，P＜0.05表示差異顯著。

2 結果與分析

2.1 當歸補血湯對家兔血液學指標的影響 各組家兔于試驗的第15d進行耳緣靜脈采血，肝素抗凝，檢測血常規，結果見表1。

表1 DBT對環磷酰胺造模家兔血液學指標的影響（n=10）

從表1可見，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組與Ⅳ組相比，WBC、RBC、HGB、PLT 指標均下降，且達到差異顯著（P＜0.05）。表明環磷酰胺所致家兔血細胞減少的“血虛”病癥模型造模成功。Ⅰ、Ⅱ組各項血液學指標均顯著優于Ⅲ組（P＜0.05），Ⅰ組與Ⅱ組相比，各項指標Ⅰ組也高于Ⅱ組（P＜0.05）。表明中藥制劑DBT和YPF對環磷酰胺所致的家兔血細胞減少有顯著的恢復作用，且DBT對血細胞生成的促進作用要優于傳統中藥制劑YPF，但仍不能恢復至正常水平。

2.2 DBT對家兔體重指標的影響 DBT對家兔體重的影響見表2。Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ組在增重和增重率的數值上要高于Ⅲ組，但統計學顯示差異不顯著（P＞0.05）。表明環磷酰胺對成年家兔生長并無明顯的抑制作用，但有減緩生長性能的趨勢，而DBT和YPF對環磷酰胺導致的家兔生長性能下降有一定的抵抗作用，但無統計學意義。

表2 DBT對環磷酰胺造模家兔體重增長的影響（n=10）

3 討論

3.1 環磷酰胺作為臨床常用的抗腫瘤藥物具有一定的細胞毒性，本試驗利用其對動物機體免疫功能和造血功能有損害從而制造出免疫抑制動物模型。本試驗首次選用成年新西蘭白兔腹腔注射75 mg/kg的環磷酰胺，造成血細胞減少的“血虛”病證模型，從造模后家兔的血液學指標（WBC、RBC、HGB、PLT）檢測結果來看，均顯著低于正常對照組（P＜0.05），證明以血細胞減少為主要癥狀的家兔“血虛”模型建立成功。

3.2 當歸補血湯作為傳統經典治療“氣血兩虛”的中藥方劑，自李東垣創制以來已近千年，在臨床中有著豐富的應用成果，并取得了很好的療效。本試驗在造模后分別給予DBT和YPF治療，可明顯提高造模家兔的白細胞、紅細胞生成，提高血紅蛋白含量，與DBT在其他實驗動物體內作用的研究結果相同。在生長性能影響方面，未能觀察到DBT對環磷酰胺所致家兔的增重有明顯影響，一方面可能是因為選擇了成年家兔作為實驗動物，其生長發育本身已經成熟，可變化程度不如仔幼兔；另一方面也符合其他學者在DBT相關研究中得出的DBT對動物生長性能影響不大的結論。

綜上所述，當歸補血湯具有顯著的促進“血虛”動物血細胞生成的作用，對實驗動物生長性能無負面影響，可作為畜牧生產和獸醫臨床上畜禽各種原因所致的貧血、白細胞減少的治療用藥。

[1] 黃兆勝，危建安，王宗偉．當歸補血湯實驗研究進展[J]．中成藥，2001，23（9）：680－683．

[2] 柳英霞，萬益群．當歸補血湯中化學成分的研究[D]．南昌：南昌大學分析測試中心，2006：2－5．

[3] 王燕平，李曉玉，宋純清，等.當歸補血湯中不同組分對正常及血虛小鼠免疫功能的影響[J]．中草藥，2002，33（2）：135－138．

[4] 寧 煉，陳長勛，金若敏，等.當歸補血湯促進造血功能的成分及其作用的研究[J].中國中藥雜志，2001，27（1）：50-53.

[5] 劉伯成，劉良，王永祿，等．當歸補血湯的藥理學研究進展[J]．甘肅中醫學院學報，2005，22（5）：48－50．

[6] 王和平，趙喜新，田開宇.小鼠白細胞減少模型白細胞及骨髓粒系細胞的動態變化[J].鄭州大學學報（醫學版），2002，37（4）：439-441.

[7] 陳奇.中藥藥理實驗方法[M].北京：人民衛生出版社，1993：1010.

[8]Zheng KY，Choi RC，Cheung AW，et al.Flavonoids from radix astragali induce the expression of erythrop-oietin in cultured cells：a signaling mediated via the accumulation of hypoxia-inducible factor-1α [J].J Agric.Food Chem.，2011，59（5）：1697-1704.

[9] Zhang XL，Yu XH，Tang XY，et al.Prophylactic immunization of Dangguibuxue detection against crypto-sporidium infection in immune suppressed mice[J].Chinese Journal of Parasitology and Parasitic Diseases，2008，26（3）：179-182.

[10]Hsieh C，Lin WC，Lee MR，et al.Dangguibuxuetang modulated the immunity of tumor bearing mice[J].Immunopharmacol Immunotoxicol，2003，25：259-271.