COX-2和VEGF在食管鱗狀細胞癌原發灶與復發轉移灶表達及意義

張巍巍*

（河南省新鄉市中心醫院腫瘤放射治療科，河南 新鄉 453000）

COX-2和VEGF在食管鱗狀細胞癌原發灶與復發轉移灶表達及意義

張巍巍*

（河南省新鄉市中心醫院腫瘤放射治療科，河南 新鄉 453000）

目的 探討食管癌原發灶與復發轉移灶間 COX-2 和 VEGF 表達情況及其臨床意義。方法 應用免疫組化方法檢測 47 例乳腺癌患者的原發灶和復發轉移灶中 COX-2 和 VEGF 的表達情況及其相關性。結果 COX-2 和 VEGF 在原發灶和復發轉移灶的陽性表達率分別為82.9%、61.7% 和 87.2%、68.1%，且 COX-2 與 VEGF 表達在原發灶和復發轉移灶中均有相關性。COX-2 和 VEGF 在原發灶和復發轉移灶中發生變化的比例分別為 8.5% 和 10.6%。結論 COX-2 和 VEGF 在食管癌的發生發展中可能起到不同作用，在腫瘤進展的不同階段其表達存在明顯差異。

食管癌；COX-2；VEGF

食管癌是世界上常見的惡性腫瘤之一，2008年全世界新增發病48萬，病死人數達40萬[1]。我國為其高發區之一，嚴重威脅著我國人民群眾的生命健康，復發轉移仍是治療失敗的主要原因[2]。COX-2和VEGF均為腫瘤血管形成中的重要調節因子，在腫瘤的復發轉移中起著重要作用。因此我們選擇上述兩個蛋白，檢測其在食管癌原發灶及復發轉移灶之間的表達，分析其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 資料收集

2008年1月1日至2011年12月31日新鄉市中心醫院經病理組織學確診的47例食管癌癌組織及其轉移灶標本。其中男性26例，女性21例；年齡34～84歲，中位年齡58歲；病理類型均為鱗狀細胞癌；其中胸腔復發15例，鎖骨上淋巴結轉移17例，肺轉移5例，腦轉移2例，骨轉移5例，腹腔轉移3例。

1.2 主要試劑

COX-2和VEGF受體抗體均購自福州邁新生物技術開發有限公司，EDTA緩沖液、DAB、Maxvision、二抗等試劑也購自福州邁新生物科技有限公司，二甲苯、乙醇、蘇木精等其他試劑購于市售。

1.3 免疫組化檢測

所有標本組織標本均在手術后30min后放入中性福爾馬林固定液中固定，經脫水、浸蠟等常規步驟后石蠟包埋。進行4μm厚連續切片，二甲苯脫蠟后，常規梯度乙醇脫苯入水，3%過氧化氫處理30min，PBS充分洗滌后置入檸檬酸緩沖液，高壓鍋進行抗原熱修復，自然冷卻至室溫，滴加COX-2和VEGF抗體，放入濕盒中4℃冰箱孵育過夜，PBS充分洗滌后滴加生物素標記二抗，室溫孵育60min，PBS充分洗滌后DAB顯色，蒸餾水沖洗，蘇木精復染，然后脫水、透明、中性樹脂封片。用已知的陽性切片作陽性對照，用PBS替代一抗作為陰性對照。

1.4 COX-2和VEGF結果判斷

根據細胞著色的情況對每張切片進行半定量評價，參照文獻[3]方法，首先將切片色強度分為：0分陰性，1分弱陽性（染色強度為淡黃或淺棕色），2分強陽性（染色強度為黃或棕色）；然后根據染色強度部分所占比例計為為0分：0%～4%；1分：5%～24%；2分：25%～49%；3分：50%～74%；4分：75%～100%。兩者乘積后各個部分相加作為每一張切片的最后計分。結果判定由三位資深病理學醫師單獨進行，取兩者平均值。

1.5 統計學分析

采用SPSS15.0統計軟件進行處理，采用卡方檢驗與Spearman等級相關檢驗進行結果分析。P＜0.05為差異有顯著性，具有統計學意義。

2 結 果

2.1 COX-2和VEGF在原發灶及復發轉移灶間的表達

COX-2在食管癌原發灶與復發轉移灶的陽性率分別為82.9%和87.2%，差異有統計學意義（P＜0.05）；VEGF在食管癌原發灶與復發轉移灶的陽性率分別為61.7%和68.1%，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 COX-2及VEGF在食管癌原發灶及復發轉移灶表達［n(%)］

2.2 COX-2和VEGF表達的相關性

在食管癌原發灶中，COX-2與VEGF共陽性7例，共陰性3例，兩者之間有相關性（P＜0.05）；在食管癌復發轉移灶中，COX-2與VEGF共陽性9例，共陰性2例，兩者之間有相關性（P＜0.05）。

2.3 COX-2和VEGF在原發灶與復發轉移灶間的表達變化

在47例食管癌癌患者中，COX-2的表達由陽性轉為陰性1例，陰性轉為陽性3例，共4例發生COX-2表達的變化，占8.5%；VEFG的表達由陽性轉為陰性1例，陰性轉為陽性4例，共例發生VEGF表達的變化，占10.6%。

3 討 論

食管癌是世界上常見的惡性腫瘤之一，我國為其高發區之一，且食管癌患者就診時大多屬于晚期，嚴重威脅著我國人民群眾的生命健康。隨著對食管癌研究的深入，食管癌根治性切除術有了很大的進步。但由于淋巴結清除的局限性和隱匿微小轉移的存在，術后復發轉移仍是治療失敗的主要原因[2]。

人類COX-2基因定位于1號染色體的1q25，全長8.3kb，由10個外顯子和9個內含子構成，編碼604個氨基酸殘基組成的多肽。COX-2是誘生型花生四烯酸的環氧酶代謝途徑中的限速酶，可催化花生四烯酸轉化為前列腺素。在正常狀態下，COX-2在各種因素（如細胞因子、缺氧、內毒素、高脂飲食、致癌劑、癌基因、病毒癌基因產物以及紫外線等）的刺激下增加表達?，F在的研究發現：COX-2可通過促進細胞增殖、抑制細胞凋亡、促進血管形成、抑制免疫功能等機制，參與腫瘤的發生和發展。體內外食管癌的研究中表明，COX-2在食管癌細胞的增殖及癌變中起著重要作用[4,5]。人VEGF基因定位于染色體6p21，由8個外顯子和7個內含子組成，全長14kb。由于外顯子剪切的不同而形成不同的亞型，編碼產物為34-45kD的同源二聚體糖蛋白。VEGF經過轉錄水平的剪切，可產生5種異構體，根據氨基酸的長短依次命名為VEGFl2l，VEGFl45，VEGFl65，VEGFl89和VEG206，其中VEGF121、VEGF165和VEGF189在人類表達。VEGF是腫瘤組織中最重要的促血管生長因子，它參與腫瘤細胞的生長增殖、分化及轉移等過程。Liu等的研究表明：VEGF-C在食管癌組織中的表達明顯高于癌旁組織[6]；VEGF-C和VEGFR-D在食管癌中高表達可以促進腫瘤的轉移[6,7]。本研究發現，食管癌原發灶及其復發轉移灶組織中COX-2、VEGF的表達均高表達，且COX-2和VEGF在食管癌原發灶及其復發轉移灶組織中的表達差異有顯著意義，與國內外眾多報道相一致，且表明COX-2和VEGF在食管癌的復發轉移中起著重要作用。此外，COX-2和VEGF在食管癌原發灶與復發轉移灶間存在變化，變化率分別為8.5%和10.6%，表明COX-2和VEGF在食管癌的演進過程可能發揮著重要作用。

此外，我們的研究還發現，COX-2與VEGF在食管癌原發灶及其復發轉移灶中的表達存在相關性，表明COX-2可能通過某種機制上調了VEGF的表達，從而促進腫瘤的血管形成，加速其發展轉移。YEON等的研究發現，VEGF- C在食管鱗狀細胞癌中的表達與COX-2的表達密切相關，且VEGF-C與原發腫瘤的浸潤深度，腫瘤分期及淋巴結轉移相關[8]。Su等在肺腺癌的研究中發現，COX-2可上調VEGF-C的表達，進而促進淋巴管生成和淋巴結轉移[9]。

總之，COX-2和VEGF在食管癌原發灶及其復發轉移灶中呈高表達狀態，且兩者之間存在有相關性。COX-2和VEGF均為食管癌發生發展中的重要因子，可能在不同的階段存在差異性表達，發揮不同的作用。

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[3]于鐘,袁宇紅,詹俊,等.食管癌中COX-2表達與其臨床病理特征及預后的關系[J].中國病理生理雜志,2006,22(11):2212-2217.

[4]Zhang L,Tu J, Yu ZL,et al.Effects of the inhibition of cyclooxygenase-2 on human esophageal cancer cells: inhibition of cell proliferation and induction of apoptosis[J].Pathol Oncol Res, 2010,16(1):39-45.

[5]Zhi H,Wang L,Zhang J,et al.Significance of COX-2 expression in human esophageal squamous cell carcinoma[J].Carcinogenesis, 2006,27(6):1214-1221.

[6]Liu P,Zhou J,Zhu H,et al.VEGF-C promotes the development of esophageal cancer via regulating CNTN-1 expression[J].Cytokine, 2011,55(1):8-17.

[7]Kozlowski M,Naumnik W,Niklinski J,et al.Vascular endothelial growth factor C and D expression correlates with lymph node metastasis and poor prognosis in patients with resected esophageal cancer[J].Neoplasma,2011,58(4):311-319.

[8]Byeon JS,Jung HY,Lee YJ,et al.Clinicopathological significance of vascular endothelial growth factor-C and cyclooxygenase-2 in esophageal squamous cell carcinoma[J].J Gastroenterol Hepatol, 2004,19(6):648-654.

[9]Su JL,Shih JY,Yen ML,et a1.Cyclooxygenase-2 induces EP1-and HER-2/N eu-dependent vascular endothelial growth factor-C up-regulation:a novel mechanism of lymphangiogenesis in lung adenocarcinoma [J].Cancer Res,2004,64(2):554-564.

The Expression and the Significance of COX-2 and VEGF in the Primary and Recurrent Focuses of Esophagus Cancer

ZHANG Wei-wei
(Department of Cancer Radiotherapy, Xinxiang Center Hospital, Xinxiang 453000, China)

ObjectiveTo investigate expressions of COX-2 and VEGF in the primary and recurrent focuses of esophagus cancer patients and their clinical significance.Methods47 cases of esophagus cancer patients were analysised on the expressions and the correlation between COX-2 and VEGF in the primary and recurrent focuses of esophagus cancer by immunohistochemistry.ResultsThe positive expression rates of COX-2 and VEGF were 82.9%, 61.7% in the primary esophagus cancer, and 87.2%, 68.1% in its recurrent focuses. COX-2 was related to VEGF in primary esophagus cancer and its recurrent focuses. The proportion of COX-2 and VEGF’s changing between the primary and recurrent esophagus cancer was 8.5% and 10.6% respectively.ConclusionCOX-2 and VEGF may act different effects in the development and progression of esophagus cancer, and their expressions are obviously different.

Esophagus cancer; COX-2; VEGF

R735.1

：B

：1671-8194（2013）04-0007-02

*通訊作者：E-mail：zww3654@126.com