Vitros5.1FS自動生化分析儀生物參考區間驗證

鄒 麟，張莉萍，徐華健

（重慶醫科大學附屬第一醫院檢驗科 400016）

適宜的生物參考區間對疾病預防、診斷、療效及預后都有重要的指導意義［1－2］，依據檢測項目、檢測方法和檢測人群制訂適合各實驗室的生物參考區間是保障檢驗結果有效性的重要環節。美國臨床實驗室標準化協會（CLSI）C28－A2提出建立實驗室生物參考區間的方法要求高程序復雜，因此在實驗室現有條件下自行制定生物參考區間存在一定的困難，可通過轉移、引用方法確立生物參考區間［3－4］。本研究依據ISO15189：2003（E）對臨床生化檢測的規范化要求［5］，對本實驗室美國強生公司Vitros5.1FS自動生化分析儀檢測系統中的20個檢測項目的生物參考區間進行了驗證。

1 資料與方法

1.1 一般資料 健康參考個體選擇男、女各20例，來源于本院體檢中心自愿體檢者。對自愿者發放“知情同意書”和“健康調查表”，初步確定符合規定要求后，進行全面體檢，綜合所有體檢結果，確認為完全健康者后錄用為研究對象，并按要求獲取新鮮血液樣本［6］。

1.2 儀器與試劑 Vitros5.1FS自動生化分析儀及其配套試劑（美國強生）。配套標準品為 KIT1（0107）、KIT2（0218）、KIT3（0317）、KIT4（0456）、KIT6（0677）和質控品高濃度 Performance VerifierⅠ N7377、低濃度Performance VerifierⅡP7379。

1.3 驗證方法 按CLSI C28－A2推薦的方法進行驗證。分析檢測結果落在《全國臨床檢驗操作規程》第3版或《VITROS實驗方法學手冊》提供的參考區間內的數量，并計算比值（R）＝檢測值在引用參考區間的參考個體數／總的參考個體數×100%。判斷參考區間適宜引用的標準為：R≥90%，表示可以接受。驗證的20個項目為丙氨酸氨基轉移酶（ALT）、天門冬氨酸氨基轉移酶（AST）、肌酐（Cr）、膽堿酯酶（Che）、無機磷（Phos）、乳 酸 脫氫 酶 （LDH）、堿 性 磷 酸 酶 （ALP）、清 蛋 白（ALB）、鈣離子（Ca2＋）、肌酸激酶（CK）、氯離子（Cl－）、γ－谷氨酰轉肽酶 （GGT）、葡萄糖（GLU）、鉀離子 （K＋）、鎂離子（Mg2＋）、鈉離子（Na＋）、總膽紅素（TBiL）、總蛋白（TP）、尿素（Urea）、尿酸（UA）。

2 結 果

經過驗證發現所有項目的90%（18例）及以上檢測結果均在《VITROS實驗方法學手冊》或《全國臨床檢驗操作規程》第3版提供的參考值范圍內。ALT、AST、Crea、LDH、Phos、Che引用的是《VITROS實驗方法學手冊》提供的生物參考區間，其他均引用《全國臨床檢驗操作規程》第3版給定的參考區間，結果見表1、2。

表1 健康參考個體檢測結果與VITROS實驗方法學手冊比較

表2 健康參考個體檢測結果與臨床檢驗全國操作規程（第3版）比較

3 討 論

醫學實驗室的生物參考區間驗證是非常重要的工作，是實驗室規范化的基本要求，生物參考區間對疾病的預防、診斷、療效及預后都有重要的指導意義［7－9］，應依據檢測項目要求、檢測方法和檢測人群制定適合各實驗室的生物參考區間。實驗室應為臨床醫生提供檢驗項目可靠的參考區間，使臨床醫生對健康普查者的檢驗結果作出正確的判斷，有效的發揮檢驗報告在疾病的診斷和鑒別診斷上的可靠作用。CLSI C28－A2文件認為每個實驗室、不同檢測系統檢測同一檢測項目都建立各自的生物參考區間不現實，同時闡明可以使用試劑說明書和權威書刊推薦的生物參考區間，或轉移其他實驗室的生物參考區間，并推薦一個簡便的驗證方法，可以簡便地確定引用的生物參考區間是否合適。本實驗室使用的生物參考區間確立方法是引用儀器廠家提供《VITROS實驗方法學手冊》或《全國臨床檢驗操作規程》第3版的權威數據，然后通過CLSI C28－A2文件推薦的方法進行驗證。

目前，許多實驗室采用《全國檢驗操作規程》第3版提供的參考值［10］，或引用試劑說明書、儀器廠家提供的生物參考區間，并未對所用參考區間進行科學、規范的驗證。然而由于年齡、性別、民族、居住地等原因引起的差異，以及檢測方法的差異，同一項目采用不同的檢測系統／方法也會導致結果不一致；或同一檢測方法，儀器試劑來源不同，檢測結果也會產生系統誤差［11］。因此，有必要對本實驗室使用的生物參考區間進行驗證，對確定有性別差異的指標也應分性別進行驗證［12］。

按規定要求檢測結果90%以上落在《VITROS實驗方法學手冊》或《全國臨床檢驗操作規程》第3版提供的范圍內，其參考區間就可引用，即認為驗證有效。否則應對檢測系統性能、檢測程序做進一步調查，重新選擇合適的生物參考區間。從本實驗室20項生化檢測項目數據來看，各項目驗證的結果均在權威書籍的參考范圍內，可分別采用其作為本實驗室相應項目的參考區間。

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