蒼術麩炒后茅術醇含量變化研究

劉 彬 黃占波 楚冬海/遼寧科技學院生物醫藥與化學工程學院

蒼術麩炒后茅術醇含量變化研究

劉 彬 黃占波 楚冬海/遼寧科技學院生物醫藥與化學工程學院

目的：采用氣相色譜法測定蒼術麩炒前后茅朮醇的含量，明確麩炒對蒼術中該成分含量的影響。方法：色譜柱為HP-5石英彈性毛細管柱（30 m×0.32 mm×0.25 μm），氮氣作為載氣，采用氫火焰檢測器，程序升溫方式，分流進樣（10∶1），進樣口溫度為220 ℃，檢測器溫度為250 ℃。

蒼術；麩炒；茅朮醇；氣相色譜

傳統中藥材蒼術來源于菊科植物茅蒼術Atractylodes lancea（Thunb.）DC.或北蒼術Atractylodes chinensis（DC.）Koidz.的干燥根莖，具有燥濕健脾、祛風散寒等功效[1]?，F代藥理研究發現蒼術具有抗胃潰瘍、促進肝蛋白合成、改善脾虛、利尿等作用[2]。蒼術的化學成分主要為倍半萜、聚乙烯炔類等成分組成的揮發油，以及氨基酸、倍半萜糖苷等水溶性成分和少量的糠醛[3-5]；其中蒼術揮發油是其主要的活性成分，茅術醇和β-桉葉醇含量較高。臨床上目前應用的蒼術多為麩炒蒼術，蒼術麩炒后的化學成分尤其是揮發油成分會發生明顯變化，本實驗采用氣相色譜法測定全國十個地區的生蒼術片及自行炮制的麩炒蒼術片中茅朮醇的含量，評價蒼術麩炒前后其揮發油中主要成分茅朮醇含量的差異[6]，初步闡明麩炒該成分的的影響。

1.材料

1.1 儀器 Agilent 6820氣相色譜儀及其配套設備，數據處理系統；HP-5(0.32 mm×30m)石英彈性毛細管柱；FID檢測器；AR2140電子分析天平（上海奧豪斯公司）；sartorius CP225D型電子天平( 十萬分之一，德國sartorius公司）；KH-300P型超聲波清洗器（昆山禾創超聲儀器有限公司）。

1.2 試劑和試藥 β-桉葉油醇和茅術醇對照品均為自制，并經GC用歸一化法測定，含量均大于98％。正十六醇（GC級，純度大于99％）。蒼術飲片分別購自浙江寧波，河北，內蒙古等地，經遼寧中醫藥大學李峰教授鑒定均為茅蒼術[Atractylodes lancea (Thunb.) DC.]。麩炒品按照2010版《中華人民共和國藥典》自制。色譜純甲醇（天津市科密歐化學試劑有限公司）；分析純甲醇（天津市科密歐化學試劑有限公司）。

2.方法與結果

2.1 色譜條件 HP-5(0.32 mm×30m)石英彈性毛細管柱，進樣口溫度220℃，氫火焰檢測器(FID)250℃，載氣為N2氣，進樣量1μL，分流進樣（10：1），柱流量1 mL·min-1；程序升溫：柱初始溫度為120℃（持續2min），以10℃·min-1升至166℃（持續8min），以20℃·min-1升至250℃（持續1min）。采用內標法，以正十六醇為內標物。見圖1。

圖1 氣相色譜圖圖

A 對照品 B 內標 C 供試品

1.茅術醇；2. 正十六醇

2.2 對照品儲備液的制備

稱取茅術醇適量，加甲醇定容，制成1 mL含茅術醇10 mg的溶液。

2.3 內標溶液的制備

稱取正十六醇適量，精密稱定，制成每1 ml含15 mg正十六醇的甲醇溶液，作為內標溶液。

2.4 對照品溶液的制備

精密量取對照品儲備液2 ml，內標1 mL，置于5mL容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。

2.5 供試品溶液的制備

取蒼術粉末（過60目篩），精密稱取0.2g，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇，稱重，放置12小時，超聲處理（功率250 W，頻率50kHz）30min，稱重，加甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，置10mL量瓶中，加甲醇定容至刻度，作為供試品溶液。

2.6 線性范圍考察

精密吸取對照品儲備液0.3 mL，0.6 mL，0.9 mL，1.2 mL，1.5 mL，1.8 mL至5 mL量瓶中，加入內標溶液1mL，加甲醇定容至刻度，搖勻，備用。精密吸取1 μL，注入氣相色譜儀中，按照“2.1”項下色譜條件，測定峰。以進樣量為橫坐標，以對照品與內標物的色譜峰面積之比為縱坐標，繪制標準曲線，回歸方程為：Y=1.2134X+0.1879，r=0.9995。表明茅術醇進樣量在0.6μg-3.6μg范圍內線性關系良好。

2.7 校正因子的測定

吸取含正十六醇的對照品1 μL，按“2.1”項下的色譜條件進樣6次，計算校正因子，結果平均校正因子為0.912，RSD為1.12％。

2.8 穩定性試驗考察

取同一供試品溶液（浙江寧波）5μL，按“2.1”項下色譜條件，分別在0、4、8、12、24、48h時間，進樣，測定色譜峰面積，計算，RSD為0.87％，結果表明，供試品溶液在48h內色譜峰面積比無明顯變化。

2.9 精密度試驗考察

精密吸取供試品溶液5μL（浙江寧波），按“2.1”項下色譜條件，連續進樣6次，測定色譜峰面積，并將茅術醇峰面積與內標物色譜峰面積作比，RSD為0.98％，結果表明，本試驗精密度試驗符合規定。

2.10 重復性試驗考察

精密稱取本品0.2g（浙江寧波），按“2.1”項下色譜條件，測定，茅術醇的平均含量為21.2mg/g，RSD為2.87％，結果表明，本試驗測定方法的重復性良好。

2.11 回收率試驗考察

取已知含量的蒼術（浙江寧波，茅術醇含量為21.2 mg/g）6份，每份0.1 g，精密稱定，置錐形瓶中，加入茅術醇濃度為1.02 mg/mL的對照品溶液2 mL，測定，計算，結果茅術醇平均回收率為98.7％，RSD為2.3％，表明符合有關規定。

2.12 含量測定

按“2.1”項下色譜條件，測定10批來源于不同地區的的蒼術片和相應的麩炒蒼術片中茅術醇的含量，結果見表1 。

表1 不同來源生蒼術和麩炒蒼術中茅術醇的含量 (n=3)

根據表2-12測定結果顯示，蒼術麩炒后茅術醇和β-桉葉油醇的含量均呈現下降的趨勢。

3.討論

3.1 在確定供試品溶液的制備方法時，本實驗先后考察了超聲、回流和索氏提取等不同的提取方法，考察了甲醇、石油醚、環己烷等不同的提取溶劑，還考察了不同的提取時間和提取溶劑的容量，最終確定了本文的最佳提取方法。

3.2 由不同來源的蒼術飲片的測定結果可知，來源于不同地區的蒼術，茅術醇的含量相差較大，最高和最低含量相差達到20倍，說明蒼術來源不同，質量不同。

3.3 通過比較生蒼術和相對應的麩炒蒼術中茅術醇的含量可知，蒼術麩炒后該成分的含量明顯降低，分析原因可能是在炮制過程中茅術醇作為揮發性成分受加熱的影響，導致含量的降低。

[1] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典：一部[S]. 2010 年版.北京：中國醫藥科技出版社，2010：150.

[2] 劉國生，孫備，明亮，等.蒼術揮發油與水溶性成分的主要藥理作用比較[J]. 安徽醫科大學學報，2003，38（2）：124.

[3] 關穎麗: 蒼術化學成分的現代研究進展[J]. 人參研究，2007，（1）28-33.

[4] 歐陽臻，江濤濤，繆亞東， 等. 蒼術的化學成分、道地性和藥理活性研究進展[J]. 時珍國醫國藥，2006，10（17）：1936-1938.

[5] 李霞，王金輝，李銑，等: 北蒼術化學成分的研究[J]. 沈陽藥科大學學報，2002，9（3）：178.

[6] 姚佳，劉玉強，才謙. GC 法測定不同來源蒼術飲片中茅術醇和β-桉葉醇的含量[J]. 中國藥房，2014，25（3）：246-248.

劉彬(1978-)，女（漢族），新疆人，本科，研究方向：制藥工程。

楚冬海(1982-)，男（漢族），山東人，研究生，研究方向：天然藥物化學。

結果：測定了10個不同地區市售蒼術片及自制的麩炒蒼術片中茅朮醇的含量，發現麩炒蒼術中該成分的含量低于生蒼術。結論：麩炒導致蒼術揮發性成分茅朮醇的含量下降。

遼寧省教育廳一般項目，編號：L2014502。