唐 蕙,唐志晗,任 重,彭 娟,危當恒,任曉晴,肖衛晉,劉錄山,姜志勝(南華大學心血管疾病研究所,動脈硬化學湖南省重點實驗室,湖南衡陽421001)
硫化氫在低剪切應力導致內皮細胞自噬障礙中的作用
唐蕙,唐志晗,任重,彭娟,危當恒,任曉晴,肖衛晉,劉錄山,姜志勝△
(南華大學心血管疾病研究所,動脈硬化學湖南省重點實驗室,湖南衡陽421001)
目的:探討硫化氫在低剪切應力誘導的人臍靜脈內皮細胞(HUVECs)自噬障礙中的作用。方法: HUVECs經培養傳代分為3組:對照組、低剪切應力組(5 dyn/cm2)和正常剪切應力組(15 dyn/cm2)。在平板流動腔上對內皮細胞進行剪切應力處理,Western blot檢測CSE蛋白水平,RT-PCR檢測CSE的mRNA含量,熒光顯微鏡MDC染色觀察自噬表泡,免疫熒光檢測LC3表達,Western blot檢測Beclin1LC3p62蛋白水平,以評估不同剪切應力下,誘導HUVECs自噬障礙過程中內源性H2S生成的變化。接下來用CSE干擾siRNA及CSE過表達質粒分別轉染HUVECs后,再分別用5/15 dyne/cm2處理1 h,測自噬表達情況。結果: WB結果顯示,與正常剪切應力組相比,低剪切應力組CSE表達明顯減少。Beclin1及LC3表達減少,p62表達增高,免疫熒光結果顯示低剪切應力組LC3表達減少。提示低剪切應力組自噬障礙。結論:低剪切應力誘導的人臍靜脈內皮細胞存在自噬障礙,其與CSE表達降低相關。
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