調經養顏分散片中藥材鑒別方法的建立過程研究

何翔

【摘 要】調經養顏分散片是從調經養顏膠囊改劑型而得，具有補血益氣，調經養顏的功效。本研究在調經養顏膠囊國家藥品質量標準的基礎上，建立分散片中三七和黃芪的薄層色譜鑒別方法，以完善對組方中有效成分的鑒別研究。

【關鍵詞】調經養顏分散片；中藥材鑒別

調經養顏分散片是從調經養顏膠囊改劑型而得，具有補血益氣，調經養顏的功效。用于婦女月經不調及其所引起的痛經、面色淡暗或有暗斑[1]。制成分散片有利于有效成分的快速釋放，減少人體代謝對藥效的影響。本品組方是根據祖國彝族名醫多年流傳使用的特效調經養顏秘方制作而成的，由三七、黃芪、女貞子、地板藤、玉帶草、小紅參等藥材組成，是純天然藥制劑，對人體無毒副作用。

本研究在調經養顏膠囊國家藥品質量標準的基礎上，建立分散片中三七和黃芪的薄層色譜鑒別方法，以完善對組方中有效成分的鑒別研究。

1.材料準備

實驗儀器：5μl、10μl微量進樣器

展開缸（100×200符合中國藥典2010年版）

藥品與試劑：硅膠G板（青島海洋化工廠），其它試劑均為分析純

展開劑：氯仿—甲醇—水（13：7：2）

對照品：三七皂苷R1（ 編號：110745-201318）、人參皂苷Rg1（編號：110703-201128）、人參皂苷Rb1（編號：110704-201223）、黃芪甲苷對照品（編號：110781-201314）來源于中國食品藥品檢定研究院。

自制研究樣品：20140425、20140426、20140427。

2.三七鑒別方法研究

參照調經養顏膠囊國家藥品質量標準[1]中三七的鑒別方法進行試驗。

2.1供試品溶液的制備

取本品3片，加乙醇30ml超聲處理15分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水10ml使溶解并移至分液漏斗中，用0.4%氫氧化鈉溶液飽和的正丁醇20ml，振搖提取，分取正丁醇液，蒸干，殘渣加乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液。

2.2對照品溶液的制備

取人參皂苷Rg1、Rbl及三七皂苷R1對照品，加乙醇制成每lml各含1mg的混合溶液作為對照品溶液。

2.3陰性對照溶液的制備

取相當于3片的不含三七的陰性樣品，同法制備陰性對照溶液。

2.4試驗方法

照薄層色譜法（中國藥典2010年版一部[2]附錄ⅥB）試驗，吸取上述三種溶液各10μ1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-水（13：7：2）的下層溶液為展開劑展開，取出、晾干、噴以10%硫酸乙醇液，在105℃加熱至斑點清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。而陰性對照未顯斑點。薄層圖如下：

三七薄層色譜圖

1-缺三七陰性空白；2-三七皂苷R1、人參皂苷Rg1和人參皂苷Rb1對照品；3-20140425批次供試品；4-20140426批次供試品；5-20140427批次供試品

試驗結果表明其他藥材不影響三七的鑒別。因此可以選用本方法作為調經養顏分散片中三七的鑒別方法。

3.黃芪鑒別方法研究

參照調經養顏膠囊國家藥品質量標準[1]中黃芪的鑒別方法進行試驗。

3.1供試品溶液的制備

取本品6片，加甲醇40ml浸漬過夜，加熱回流1小時濾過。濾液蒸干，殘渣加水10ml使溶解，通過D101大孔樹脂柱（大孔樹脂5g，內徑1.5cm），用水100ml洗脫，棄去洗脫液，繼用40%乙醇50ml洗脫，棄去洗脫液，再用70%乙醇50ml，洗脫，收集70%乙醇洗脫液，蒸干，殘渣加水10ml使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次20m1，合并正丁醇液，用氨試液洗滌3次（20m1.15ml、15m1），棄去氨液.正丁醇液蒸干，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試品溶液。

3.2對照品溶液的制備

另取黃芪甲苷對照品，加甲醇制成每lml含1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.3陰性對照溶液的制備

取相當于6片的不含黃芪的陰性樣品，同法制備陰性對照溶液。

3.4試驗方法

照薄層色譜法（中國藥典2010年版一部[2]附錄ⅥB）試驗，吸取上述供試品溶液10-15μl、對照品溶液5μl.分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿一甲醇一水（13：7：2）的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇液，在105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。而陰性對照未顯斑點。薄層圖如下：

黃芪甲苷薄層色譜圖

1-缺黃芪陰性空白；2-黃芪甲苷對照品；3-供試品（批號：20140425）；4-供試品（批號：20140426）；5-供試品（批號：20140427）

試驗結果表明其他藥材不影響黃芪的鑒別。因此可以選用本方法作為調經養顏分散片中黃芪的鑒別方法。

4.結論

依據研究結果，三七和黃芪薄層色譜鑒別方法可定為：

（1）取本品3片，加乙醇30ml超聲處理15分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水10ml使溶解并移至分液漏斗中，用0.4%氫氧化鈉溶液飽和的正丁醇20ml，振搖提?。ㄝp搖防止乳化），分取正丁醇液，蒸干，殘渣加乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取人參皂苷Rg1，Rbl及三七皂苷R1對照品，加乙醇制成每lml各含1mg的混合溶液.作為對照品溶液。照薄層色譜法（中國藥典2010年版一部[2]附錄ⅥB）試驗，吸取上述兩種溶液各10μ1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿—甲醇—水（13：7：2）的下層溶液為展開劑展開，取出、晾干、噴以10%硫酸乙醇液，在105℃加熱至斑點清晰。供試品色譜中，在與對（下轉第176頁）（上接第25頁）照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。

（2）取本品6片，加甲醇40ml浸漬過夜，加熱回流1小時濾過。濾液蒸干，殘渣加水10ml使溶解，通過D101大孔樹脂柱（大孔樹脂5g，內徑1.5cm），用水100ml洗脫，棄去洗脫液，繼用40%乙醇50ml洗脫，棄去洗脫液，再用70%乙醇50ml，洗脫，收集70%乙醇洗脫液，蒸干，殘渣加水10ml使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次20m1，合并正丁醇液，用氨試液洗滌3次（20m1.15ml、15m1），棄去氨液，正丁醇液蒸干，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試品溶液。另取黃芪甲苷對照品，加甲醇制成每lml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法（中國藥典2010年版一部[2]附錄ⅥB）試驗，吸取上述供試品溶液10-15μl、對照品溶液5μl.分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿一甲醇一水（13：7：2）的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇液，在105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。 [科]

【參考文獻】

[1]調經養顏膠囊國家藥品標準WS-10418（ZD-0418）-2002.國家中成藥標準匯編外科婦科分冊[S].414.

[2]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典[S].2010年版.一部.中國醫藥科技出版社，2010.01.