Th 17/Treg、IL-17在近交系BALB/C小鼠大腸癌肝轉移模型中表達及意義

盧喜 鄭軍霞 劉曉梅 張瑾熔

Th 17/Treg、IL-17在近交系BALB/C小鼠大腸癌肝轉移模型中表達及意義

盧喜1鄭軍霞2劉曉梅1張瑾熔1

目的 研究Th 17/Treg、IL-17在近交系BALB/C小鼠大腸癌肝轉移模型中的表達及意義。方法 采用近交系BALB/C小鼠脾內種植法建立大腸癌肝轉移模型，用免疫組化方法檢測肝轉移瘤及血清中IL-17、Treg細胞和Th 17細胞的分布，比較其在肝轉移初期和晚期的差別。結果 晚期結腸癌肝轉移瘤組織中Th 17低于早期肝轉移瘤，P＜0.05，差異具有統計學意義，而IL-17、Treg細胞在晚期肝轉移瘤組織中高于早期，P＜0.05，差異具有統計學意義。結論 IL-17、Th 17/Treg細胞在大腸癌肝轉移瘤中的表達，可能對評估病情進展有一定意義。且早期肝轉移瘤中Th 17細胞增高，并具有抗腫瘤活性，這可能是大腸癌免疫治療的新策略。

Th 17；Treg；大腸癌；肝轉移

大腸癌是常見的消化道腫瘤之一，肝轉移為主要死因。IL-17、Treg細胞和Th 17細胞作為新發現的具有獨立調節機制的免疫細胞，其在轉移瘤中的表達及意義在國內未見報道。通過建立BALB/C小鼠結腸癌肝轉移模型，比較大腸癌肝轉移瘤組織中IL-17、Treg細胞和Th 17細胞的表達，為大腸癌肝轉移的發生發展提供更多的研究證據。

1 材料與方法

1.1 材料

將80只采用脾內種植法制備近交系BALB/C小鼠脾內種植小鼠結腸癌細胞株的大腸癌肝轉移模型小鼠隨機分為兩組，另取20只健康BALB/C小鼠為空白組，第1組于第16天處死，第2組及空白組于第23天處死。所有小鼠均于處死后取轉移瘤及血清標本，用免疫組化方法檢測與肝轉移癌IL-17、Treg細胞和Th 17細胞的表達。

1.2 統計學方法

2 結果

2.1 兩組小鼠外周血中Th 17、Treg及Treg/Th 17的細胞水平

出現肝轉移小鼠血清中Treg細胞、及Treg/Th 17的水平高于對照組，P＜0.05，差異具有統計學意義，Th 17細胞水平低于對照組，P＜0.05，差異具有統計學意義。Th l7 陽性細胞數在小鼠外周血中低空白組，且在23天組中的表達低于16天組。見表1。

2.2 兩組肝轉移瘤中Th 17細胞、IL-17、Treg細胞水平與對照組比較

IL-17、Treg細胞水平在小鼠大腸癌肝轉移腫瘤組織中高于空白組，P＜0.05，差異具有統計學意義，且與肝轉移瘤進展呈正相關。Th 17細胞水平在肝轉移瘤組的表達低于空白組。

3 討論

免疫微環境與腫瘤的關系密切，機體依賴體內T細胞對抗腫瘤細胞。Th l7細胞是一種新發現的輔助性T細胞亞群，分化發育機制獨特，可分泌相關細胞因子IL-17、IL-21等。在腫瘤的發生發展中發揮重要的作用。Kryczek 等[1]發現Th l7細胞具有抗腫瘤效應，而與腫瘤浸潤的Treg細胞負相關。Chen等[2]發現IL-17存在于肺癌組織中，在晚期患者組織中的表達更高。研究發現[3]IL-17主要起到促進腫瘤生長作用。本次研究結果表明，Th l7細胞在結腸癌肝轉移微環境中的聚集發生在腫瘤的早期階段，隨著病程進展，Th l7細胞的聚集程度逐步降低；IL-17的細胞水平與肝轉移瘤進展呈正相關。Treg細胞在人類腫瘤微環境中數量增多，發揮著一定的促進腫瘤生長的作用。小鼠實驗模型中發現Treg細胞可抑制腫瘤浸潤的淋巴結及外周血效應T細胞群的免疫應答。通過抗體抑制Treg細胞的表面分子來抑制Treg的功能或數目能夠增強機體抗腫瘤活性,進一步證明了Treg在腫瘤免疫系統中的負向調節作用?？煽紤]從免疫治療的角度控制腫瘤的進展，負向調節Treg細胞是非常重要的治療靶點。

表1 第1組及第2組小鼠外周血中Th 17、Treg及Treg/Th 17的細胞水平

表2 第1、2組肝轉移瘤中Th 17細胞、IL-17、Treg細胞水平與對照組比較

總之，本研究通過免疫組織化學方法證實了Treg細胞、IL-17在大腸癌肝轉移瘤中表達增加，且與肝轉移瘤進展呈正相關，這可能對評估病情進展有一定意義。且早期肝轉移瘤中Th 17細胞增高，并具有抗腫瘤活性，這可能是大腸癌免疫治療的新策略。

[1]Kryczek I，Banerjee M，Cheng P，et al.Phenotype distribution，generation and functional and clinical relevance of Thl7cells in the human tumor environments[J].Blood，2009，114（6）：1141-1149.

[2]Chen X，Wan J，Liu J，et al.Increased IL-17-producing cells correlate with poor survival and lymphangiogenesis in NSCLC patients[J].Lung Cancer，2010，69（3）：348-354.

[3]魏文，李娟娟，孫圣榮，等.乳腺癌小鼠動物模型中白細胞介素-17的表達及其意義[J].中華實驗外科雜志，2011，28（5）：673-675.

The Expression and Significance of Th 17/Treg and IL-17 in Model of Liver Metastasis of Colorectal Cancer in BALB/C Mice

LU Xi1ZHENG Junxia2LIU Xiaomei1ZHANG Jinrong11 The Affiliated Tumor Hospital Department of Radiotherapy of Xinjiang Medical University，Urumqi 830054，China.2 The Affiliated Tumor Hospital The First District of Palliative Treatment Department of Xinjiang Medical University，Urumqi 830054，China

Objective To study the Th 17/Tregm and IL-17 expression and significance in inbred BALB/C mice with colorectal cancer liver metastasis model.Methods The method of planting inbred strains of cancer cells within the BALB/C mouse spleen established colorectal liver metastases model using immunohistochemical method to detect the distribution of IL-17，Treg cell and Th 17 cells in colorectal liver metastases and normal liver tissue，compared the difference in the early and late liver metastasis.Results Th 17 in advanced colorectal cancer liver metastases tissue was significantly lower than early liver metastases，P＜0.05，had difference statistically significance.IL-17 and Treg in advanced colorectal cancer liver metastases tissue was significantly higher than liver metastases，P＜0.05，had difference statistically significance.Conclusion The expression of IL-17 and Th 17/Treg cells in the liver metastasis of colorectal carcinoma may have some significance meaning.Th 17 was increased in the early stage of liver metastasis，and it has anti-tumor activity，which may be a new strategy for the treatment of colorectal cancer.

Th 17，Treg，Colorectal Cancer，Liver metastasis

R735.3+4

B

1674-9308（2015）29-0030-02

10.3969/j.issn.1674-9308.2015.29.021

1830054烏魯木齊，新疆醫科大學附屬腫瘤醫院胸腹放療科；2830054烏魯木齊，新疆醫科大學附屬腫瘤醫院姑息治療一病區

新疆醫科大學科研創新基金項目（項目編號：XJC2013101）

張瑾熔，E-mail：16428614@qq.com