祖師麻凝膠膏劑的鎮痛抗炎藥效學評價*

藺 莉，吳紅彥，石曉峰，王麗娟，范 彬

1 甘肅中醫藥大學，甘肅 蘭州 730000；2 甘肅省醫學科學研究院

祖師麻凝膠膏劑的鎮痛抗炎藥效學評價*

藺 莉1，2，吳紅彥1△，石曉峰1，2，王麗娟1，范 彬2

1 甘肅中醫藥大學，甘肅 蘭州 730000；2 甘肅省醫學科學研究院

目的：對祖師麻凝膠膏劑的鎮痛抗炎藥效學進行評價。方法：采用扭體法和熱板法觀察祖師麻凝膠膏劑的鎮痛作用，采用耳廓腫脹法觀察祖師麻凝膠膏劑的抗炎作用。結果：與基質對照組比較，祖師麻凝膠膏劑小、中、大劑量組均可提高給藥后不同時間痛閾值(P＜0.05)，祖師麻凝膠膏劑中、大劑量作用強于祖師麻膏藥組(P＜0.05)；與基質對照組比較，祖師麻凝膠膏劑小、中、大劑量可延長給藥后疼痛潛伏期并減少扭體反應次數(P＜0.05)，祖師麻凝膠膏劑大劑量組扭體反應次數少于祖師麻膏藥組(P＜0.05)；與基質對照組比較，祖師麻凝膠膏劑中、大劑量可減輕小鼠耳廓腫脹度(P＜0.05)，祖師麻凝膠膏劑大劑量腫脹抑制率高于師麻膏藥(P＜0.05)。祖師麻凝膠膏劑各劑量組與扶他林組比較，差異無統計學意義(P＞0.05)。結論：祖師麻凝膠膏劑具有顯著的鎮痛和抗炎作用。

祖師麻凝膠膏劑；鎮痛作用；抗炎作用

祖師麻(Cortex Daphnes)系民間常用中草藥，始載于《陜西中草藥》［1］，為瑞香科(Thymelaeaceae)植物黃瑞香Daphne giraldii Nitsche、甘肅瑞香(陜甘瑞香、唐古特瑞香)Daphne tangutica Maxim及凹葉瑞香Daphne retusa Hemsl的干燥根皮與莖皮［2］，主產于甘肅、陜西、云南、四川、西藏、青海等地，具有祛風除濕、活血止痛之功效，被民間廣泛用于治療疼痛、跌打損傷、風濕性關節炎和支氣管炎等癥［1，3］。目前，以祖師麻為主藥的外用上市制劑有祖師麻膏藥、祖師麻關節止痛膏、祖師麻風濕膏3個品種［4-5］，劑型均較落后。其中祖師麻膏藥由祖師麻提取精制的浸膏粉和武威膏藥組成，屬于傳統的黑膏藥，具有祛風除濕、活血止痛的功能，用于風寒濕痹、瘀血痹阻證［4］?？紤]到祖師麻膏藥保存使用不方便、透皮吸收效果差、對皮膚刺激性大、生產工藝自動化水平低等缺陷，本課題組采用現代透皮吸收新技術，應用高分子親水基質，對其進行二次開發，研制成祖師麻凝膠膏劑。為了評價其藥效，本實驗以祖師麻膏藥和扶他林為對照藥物，研究祖師麻凝膠膏劑對動物疼痛和炎癥模型的作用，以期為其開發利用提供科學依據。

1 材料與方法

1.1 試劑和藥品 祖師麻凝膠膏劑(甘肅省醫學科學研究院藥物研究所，批號：20141015)。祖師麻膏藥(甘肅泰康制藥有限責任公司，批號：20110812)；扶他林(北京諾華制藥有限公司，批號：X4392)；硫化鈉(分析純，天津市百世化工有限公司，批號：20110920)；二甲苯(北京化工廠，批號：20121010)；醋酸(天津市北聯精細化學品開發有限公司，批號：20131020)。

1.2 動物 昆明種小鼠，SPF級，體質量(20±2)g，由甘肅中醫學院動物實驗中心提供，動物實驗許可證號：SCXK(甘)2011-0001。動物飼養于標準環境：溫度(22±1)℃；相對濕度(60±5)%；人工光照；12小時明暗周期；標準顆粒飼料喂養。

1.3 儀器 FA2004型電子天平(上海上天精密儀器有限公司)；RB-200智能熱板儀(成都泰盟科技有限公司)。

1.4 實驗方法

1.4.1 熱板實驗［6］將雌性健康昆明種小鼠放置于預熱至(55±0.5)℃的熱板上，自小鼠后足接觸熱板開始計時，至小鼠初次舔后足的時間為基礎痛閾值。挑選基礎痛閾在5～30秒的小鼠60只用于實驗。按上法測定2次，間隔30分鐘，取平均值為給藥前痛閾值。按給藥前痛閾值分層將小鼠隨機分為6組：空白對照組(不含祖師麻的相同基質貼劑)，扶他林組(1 g/kg)，祖師麻膏藥組(3.4 g/kg)，祖師麻凝膠膏劑高(7.2 g/kg)、中(3.6 g/kg)、低(1.8 g/kg)3個劑量組，每組10只。于實驗前24小時用8%硫化鈉將小鼠背部脫毛，脫毛面積約4 cm2。在脫毛部位分別給予受試藥物和對照藥物，基質對照組敷貼面積為1.5 cm2，扶他林組給藥0.2 g/次，祖師麻膏藥組敷貼面積為1.5 cm2，祖師麻凝膠膏劑小、中、大3個劑量組分別敷貼面積為1、1.5、2 cm2，剪取相應大小的藥片敷貼于動物背部脫毛區進行給藥，然后再用膠布將藥物固定，保持藥物和動物皮膚直接接觸6小時，1次/d，連續3天。于末次給藥后按前法測定60、90、120分鐘痛閾值。比較給藥前后痛閾值的變化，計算痛閾提高百分率。

1.4.2 醋酸扭體實驗［7］選取健康昆明種小鼠60只，雌雄各半。分組及給藥方法同前。于末次給藥后l小時，各組均腹腔注射0.6%醋酸溶液10 mL/kg，并立即觀察記錄小鼠扭體反應出現時間及15分鐘內扭體反應次數，然后觀察每只小鼠的疼痛反應。以腹部內凹，軀干與后腿伸張，臀部高抬為指標，觀察記錄15分鐘內扭體出現時間(潛伏期)與扭體次數。

1.4.3 二甲苯致小鼠耳廓腫脹實驗［7］選取健康昆明種小鼠60只，雌雄各半。分組及給藥方法同前。末次給藥2小時后，各實驗組每只小鼠的右耳前后兩面涂100%二甲苯(0.02 mL/只)致耳廓腫脹，左耳廓不作處理。60分鐘后脫頸椎處死小鼠，用直徑9 mm的打孔器將雙耳同部位等面積切下，用電子天平稱重。以左右兩耳質量差為腫脹度，計算腫脹抑制率。

1.5 統計學方法 采用SPSS 13.0統計軟件分析，計量資料以表示，采用單因素方差分析，P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 祖師麻凝膠膏劑對小鼠熱板法致痛的影響 與空白對照組比較，祖師麻凝膠膏劑低、中、高劑量可提高給藥后小鼠不同時間段痛閾值(P＜0.05)；祖師麻凝膠膏劑中、高劑量的痛閾提高率均高于祖師麻膏藥組，部分時間段差異有統計學意義(P＜0.05)；祖師麻凝膠膏劑痛閾提高率與扶他林組比較，差異無統計學意義(P＞0.05)。見表1。

表1 祖師麻凝膠膏劑對小鼠熱板法致痛的影響

表1 祖師麻凝膠膏劑對小鼠熱板法致痛的影響

注：與空白對照組比較，*表示P＜0.05，#表示P＜0.01；與祖師麻膏藥組比較，△表示P＜0.05(下同)。

組別 只數 劑量/(g·kg-1) 給藥后不同時間的痛閾提高率/% 60 min 90 min 120 min空白對照組 10 0 20.50±5.23 27.10±4.86 26.19±5.87扶他林組 10 1.0 36.40±4.11*39.20±5.11#38.50±5.76*祖師麻膏藥組 10 3.4 33.40±3.30*37.31±2.75*36.35±3.06*10 1.8 32.61±5.37*39.10±4.48*33.00±4.55祖師麻凝膠膏劑組 10 3.6 35.55±6.27*44.49±3.21#△39.50±5.16#10 7.2 39.71±6.73#46.90±7.64#△42.52±5.07*△

2.2 祖師麻凝膠膏劑對醋酸致小鼠扭體反應的影響 與空白對照組比較，祖師麻凝膠膏劑低、中、高3個劑量均可延長給藥后疼痛潛伏期并減少扭體反應次數(P＜0.05)；祖師麻凝膠膏劑高劑量組扭體反應次數少于祖師麻膏藥組(P＜0.05)；雖然祖師麻凝膠膏劑中、高劑量組較扶他林組疼痛潛伏期延長，高劑量組扭體次數較少，但差異無統計學意義(P＞0.05)。見表2。

2.3 祖師麻凝膠膏劑對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響 與空白對照組比較，祖師麻凝膠膏劑中、高劑量可明顯減輕小鼠耳廓腫脹度(P＜0.05)；腫脹抑制率祖師麻凝膠膏劑中劑量組與祖師麻膏藥組比較，差異無統計學意義(P＞0.05)，祖師麻凝膠膏劑高劑量高于祖師麻膏藥，差異有統計學意義(P＜0.05)；祖師麻凝膠膏劑高劑量組與扶他林組比較，差異無統計學意義(P＞0.05)。見表3。

表2 祖師麻凝膠膏劑對醋酸致小鼠扭體反應的影響

表2 祖師麻凝膠膏劑對醋酸致小鼠扭體反應的影響

組別 只數 劑量/(g·kg-1) 疼痛潛伏期/min 扭體反應/次空白對照組 10 0 4.64±0.72 25.40±5.79扶他林組 10 1.0 7.83±1.07*12.10±3.59#祖師麻膏藥組 10 3.4 5.03±1.02 17.90±1.28*10 1.8 6.97±0.47*15.30±3.86*祖師麻凝膠膏劑組 10 3.6 9.62±1.23#14.00±4.22*10 7.2 9.03±1.63#10.50±2.27#△

表3 祖師麻凝膠膏劑對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響

表3 祖師麻凝膠膏劑對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響

組別 只數 劑量/(g·kg-1) 腫脹度/mg 腫脹抑制率/%空白對照組 10 0 9.93±1.79 -扶他林組 10 1.0 4.67±1.13#41.23±6.31祖師麻膏藥組 10 3.4 6.03±1.38*34.23±2.72 10 1.8 7.02±2.41 26.34±4.29祖師麻凝膠膏劑組 10 3.6 5.43±1.14*38.21±4.61 10 7.2 4.12±0.46#44.89±3.64△

3 討論

以祖師麻為主藥的外用制劑主要涉及膏藥、凝膠膏劑、噴霧劑、醑劑［4-5］。祖師麻凝膠膏劑［8-9］是由祖師麻、當歸、香附、赤芍、冰片等24味中藥經提取加工制成的外用貼劑。

凝膠膏劑是一種新型水凝膠型透皮給藥載體，具有對于藥物分子適用范圍廣即水溶性與脂溶性藥物均適用、載藥量大、膏體柔軟、無刺激無過敏、藥物透皮效率高等獨特優勢［10］；將祖師麻膏藥實施二次開發研制成祖師麻凝膠膏劑，既克服了傳統膏藥的缺陷，又容易實現工業化生產，有利于產業升級。

本研究通過對祖師麻凝膠膏劑與祖師麻膏藥和扶他林的鎮痛抗炎作用的比對研究發現，祖師麻凝膠膏劑有顯著的鎮痛和抗炎作用，具有良好的開發前景，值得進一步研究。

［1］ 國家中醫藥管理局.中華本草：第5卷［M］.上海：上?？茖W技術出版社，1999：407.

［2］ 張薇，蘇娟，扈曉佳，等.中藥祖師麻的三種基源植物的化學及藥理活性［J］.中國醫藥工業雜志，2007，38(3)：233-238.

［3］ 于明，張元君，王明時.祖師麻化學成分的研究［J］.中草藥通訊，1976，7(10)：13-17.

［4］ 國家藥典委員會.中華人民共和國衛生部藥品標準［M］.北京：人民衛生出版社，1998：231-233.

［5］ 國家藥品監督管理局.國家中成藥標準匯編(中成藥地方標準上升國家標準部分)：骨科分冊［M］.北京：人民衛生出版社，2002：415-418.

［6］ 李儀奎.中藥藥理實驗方法［M］.上海：上?？茖W技術出版社，2006：241-242.

［7］ 徐叔云，卞如濂，陳修.藥理實驗方法學［M］.3版.北京：人民衛生出版社，2002：882-913.

［8］ 謝雪虎，趙正保.祖師麻巴布劑的質量標準研究［J］.中國藥物與臨床，2011，11(1)：20-22.

［9］ 謝雪虎，申永政，趙正保.正交設計法優選祖師麻巴布劑的基質處方［J］.中國醫藥導報，2010，7(34)：52-53.

［10］李偉澤，張光偉，趙寧，等.中藥水凝膠巴布劑產業化工藝技術攻關研究［J］.中草藥，2012，43(10)：1928-1933.

Pharmacodynamics Assessment on Analgesic Function and Anti-inflammatary Effects of ZuShiMa Cataplasm

LIN Li1,2,WU Hongyan1△,SHI Xiaofeng1,2,WANG Lijuan1,FAN Bin2
1 Gansu University of Traditional Chinese Medicine,Lanzhou 730000,China; 2 Gansu Provincial Academy of Medical Science

Objective: To evaluate the analgesic function and anti-inflammation effects of ZuShiMa cataplasm. Methods: Analgesic function of ZuShiMa cataplasm was observed by adopting writhing test and hot-plate test, anti-inflammation of ZuShiMa cataplasm was observed by using ear swelling. Results: Compared with the matrix control group, low, moderate and high doses of ZuShiMa cataplasm can increase pain thresholds at different times after medication(P＜0.05), the function of moderate and high doses of ZuShiMa cataplasm were higher than ZuShiMa plaster(P＜0.05); compared with the matrix control group, low, moderate and high doses of ZuShiMa cataplasm can prolong pain latent period after medication and reduce the number of writhing response(P＜0.05), the number of writhing response in high doses of ZuShiMa cataplasm group was lower than that ZuShiMa plaster(P＜0.05); compared with the matrix control group, moderate and high doses of ZuShiMa cataplasm can relieve ear swelling of mice(P＜0.05), the swelling inhibiting rate of high doses of ZuShiMa cataplasm was higher than that ZuShiMa plaster(P＜0.05). ZuShiMa cataplasm of different doses groups compared with Voltaren group, there were no statistical differences(P＞0.05). Conclusion: ZuShiMa cataplasm shows significant analgesic and anti-inflammation function.

ZuShiMa cataplasm; analgesic function; anti-inflammation function

R285.5

A

1004-6852(2016)12-0020-03

2016-07-25

2014年甘肅省中醫藥管理局科研立項課題(編號GZK-2014-19)；2013年蘭州市第三批科技計劃項目(編號2013-3-39)。

藺莉(1980—)，女，碩士學位，主治醫師。研究方向：方劑作用機理及藥效物質基礎研究。

△通訊作者：吳紅彥(1963—)，男，博士研究生導師，教授。研究方向：方劑作用機理及藥效物質基礎研究。