普羅托品和別隱品堿的藥代動力學研究進展

楊　迪，劉兆穎，柳亦松，曾建國

（1.湖南農業大學獸用中藥資源與中獸藥創制國家地方聯合工程研究中心，長沙　410128；2.湖南農業大學湖南省植物功能成分利用協同創新中心，長沙　410128；3.湖南農業大學動物醫學院，長沙　410128）

?

普羅托品和別隱品堿的藥代動力學研究進展

楊迪1,3，劉兆穎1,2,3，柳亦松1,2,3，曾建國1,2*

（1.湖南農業大學獸用中藥資源與中獸藥創制國家地方聯合工程研究中心，長沙410128；2.湖南農業大學湖南省植物功能成分利用協同創新中心，長沙410128；3.湖南農業大學動物醫學院，長沙410128）

摘要：原阿片堿和α-別隱品堿是普羅托品類生物堿中重要的兩種生物堿，具有抗菌、消炎等多種生物活性，因其還具有抗寄生蟲生物活性，將是一個獸藥和藥物飼料添加劑開發的新選擇。近年來，獸藥藥代動力學研究逐漸開始采用高效液相色譜法和高效液相色譜串聯質譜法。文章綜述了近十幾年來這兩種生物堿在大鼠、兔、比格犬等動物的體內藥代動力學研究進展。

關鍵詞：原阿片堿；別隱品堿；博落回；藥代動力學

近年來，由于飼用抗生素的濫用導致細菌耐藥性等問題越來越突出，尋找新的獸藥和飼料添加劑抗生素替代品成為畜牧業未來發展的必然趨勢[1-8]。我國中草藥資源豐富，中草藥基本不產生耐藥性，開發中草藥作為飼料添加劑，解決飼用抗生素耐藥性、殘留問題，具有很高的市場前景[9-13]。

芐基四氫異喹啉類生物堿因其數量多、分布廣、藥用價值大、結構類型復雜，近年來備受科學研究者的關注。芐基四氫異喹啉類生物堿主要分布于罌粟科、小檗科、木蘭科、防己科、大戟科、樟科、毛莨科、蕓香科、馬兜鈴科、馬錢科等[14]。根據其結構骨架類型可主要分為以下7類：芐基四氫異喹啉類、阿樸啡類和異阿樸啡類、雙芐基四氫異喹啉類、原小檗堿和小檗堿類、嗎啡烷類、普羅托品類、苯并菲啶類[15]。其中原阿片堿又名普羅托品、普托品（Protopine）和α-別隱品堿（α-aocryptopine）是普羅托品類生物堿中兩種代表性生物堿[16]。

研究表明，普羅托品類生物堿具有抑制血小板聚集，松弛平滑肌，抗心律失常，解痙止痛、抗肝纖維化、抗菌、消炎等藥理作用，在飼料和養殖業具有較廣闊的開發應用前景[17-19]。普羅托品類生物堿還具有抗寄生蟲等生物活性，也是新獸藥開發和利用的很好選擇。已有報道稱普羅托品類生物堿是許多植物的二次代謝產物，其中兩面針、博落回、白屈菜、延胡索、夏天無、紫金龍等植物中的普羅托品類生物堿是近年的研究熱點[20]。其中，博落回在我國分布廣泛、資源豐富，該植物不僅含有豐富的普羅托品類生物堿（主要是普羅托品和α-別隱品堿），還含有豐富的苯并菲啶類生物堿（主要是血根堿和白屈菜紅堿）。目前從博落回中提取的苯并菲啶類總堿（60％）已經被開發成為國內首個二類中獸藥藥物飼料添加劑——美佑壯[21]。此前該總堿也被制成博落回注射液用于防治仔豬白痢。

本文主要針對原阿片堿和α-別隱品堿這兩種代表性的普羅托品類生物堿，綜述了近年來這兩種生物堿在動物體內的藥代動力學研究，為普羅托品類生物堿作為獸藥成藥性評價提供良好的支持。

1　獸藥藥代動力學和一般生物堿的藥代動力學特點

獸藥藥物代謝動力學是借助于動力學原理，研究藥物活性成分、組分、單方和復方在體內吸收、分布、代謝和排泄（ADME）的動態變化規律及其體內時量——時效關系，并用高等數學加以定量描述的一門學科[22]。與人藥藥代動力學相比，獸醫藥代動力學雖起步較晚，但發展迅猛。液相色譜和質譜聯用技術（HPLC-MS）是以高效液相色譜為分離手段，以質譜為鑒定工具的一種分離分析技術，具有高度的專屬性。隨著色譜和質譜技術的發展，液質聯用儀等先進儀器已經成為藥物藥代動力學研究中最常用的分離檢測手段[23]。藥代動力學的研究方法有血藥濃度法、藥理效應法、藥物累積法和微生物指標法等[24]。血藥濃度法和生物效應法目前占據了復方藥動力學研究的主導地位[25]。

研究藥物代謝的方法從實施對象可分為兩類：即體內法和離體法。體內法以整體動物為試驗對象，收集血液、尿液、膽汁、糞便等，采用物理、化學等方法和分析儀器，對藥物和代謝產物進行定性定量研究。而離體法則將部分組織離體后進行灌注（如肝臟灌注實驗）或者組織切片、勻漿后加入藥物，進行后續檢測。藥物代謝研究中，藥物代謝酶是參與機體內各種外源物及內源物代謝轉化的重要物質。藥物及外源物的代謝轉化反應絕大多數在肝臟進行，肝細胞線粒體與微粒體可溶性組分的酶系催化主要代謝反應。

生物利用度是指制劑中藥物被吸收進入體循環的速度和程度[26]。生物堿類藥物是許多中成藥的有效成分，研究此類藥物的生物利用度對于提高藥物療效和安全性，指導合理的劑型設計，科學地制定藥品質量標準具有很重要的意義。

通常生物堿的藥代動力學除部分季銨類外大部分易與酸生成鹽類，堿基親脂性強，易以親脂擴散方式被吸收。因其結構多樣導致代謝途徑復雜，產物多樣，目前這方面的研究報道還不多[27]。盡管生物堿類藥物早已經被證實具有很多重要的藥理活性，但是目前相關研究還剛起步。

2　普羅托品類生物堿的藥代動力學

2.1大鼠藥代動力學

楊丹莉等對雄性Wistar大鼠尾靜脈注射原阿片堿后，得到結果T1 /2α，T1 /2β，Vd，CL，Ke，K21，V1，K12和AUC分別為0.05 h，1.85 h，17.28 L，6.46 L·h-1，1.52 h，3.39 h，4.24 L，9.24 h和1.55 μg·h-1·mL-1[28]。楊丹莉等在原阿片堿在大鼠體內的分布和排泄研究試驗結果表明，靜脈給藥原阿片堿后，3 h后藥物的濃度就下降，原阿片堿在大鼠體內廣泛分布，部分經尿排泄，血漿蛋白結合率低[29]。王萍等采用一室模型研究了延胡索提取物中的原阿片堿在大鼠體內的藥代動力學規律[30]。發現醋制后的延胡索提取物中，原阿片堿在大鼠體內吸收影響不大；酒制延胡索提取物后，原阿片堿會延長代謝時間。Dou等通過對比酒制和醋制的延胡索提取物在Wistar大鼠的體內組織分布，發現酒制和醋制不影響延胡索提取物中原阿片堿的Cmax和AUC，酒制和醋制延胡索提取物會延長原阿片堿在大腦的Tmax[31]。Ma等采用液質聯用技術對雄性Wi?star大鼠灌胃夏天無提取物（2 g·kg-1，含有原阿片堿15.44 mg·kg-1），通過軟件分析結果表明，夏天無提取物中原阿片堿的T1/2、Tmax、Cmax分別為4.98± 1.64 h、3.50±0.55 h、347.9±51.51 ng·mL-1[32]。郭常川采用LC-MS/MS儀器，給SD大鼠灌胃紫金龍提取物126.6 mg·kg-1（含原阿片堿8.18mg·kg-1）和靜脈注射12.66 mg·kg-1（含原阿片堿0.818 mg·kg-1），獲得了紫金龍提取物中原阿片堿在SD大鼠的體內藥代動力學各項參數，5～480 min時間段內4個點原阿片堿的大鼠心、肝、脾、肺、腎、腦等各組織的分布數據，比較了大鼠腦部腦干、小腦、海馬等各個組織的分布數據以及0～24 h內不同時間段尿液、糞便、膽汁的排泄情況[33]。Wu等通過給Wistar大鼠灌胃夏天無提取物（80.6 mg·kg-1，含原阿片堿14.9 mg·kg-1），對比了夏天無提取物中原阿片堿、夏天無堿、延胡索乙素和荷包牡丹堿4種生物堿的在大鼠體內藥代動力學差異[34]。Liao等利用HPLC-MS/MS測定夏天無中包括原阿片堿在內的6種生物堿的前處理方法，并測定了其在SD大鼠的夏天無提取物藥代動力學參數[35]。Liu等考察了正常大鼠和痛經癥狀的大鼠在口服香附四物湯后藥代動力學的差異，結果發現，原阿片堿在肝臟、脾臟和子宮的含量正常大鼠更高，表現為顯著性差異（P<0.05）[36]。研究表明，使用RPLC-Q/TOF測定了口服元胡止痛方后的SD大鼠的血漿中的生物活性成分和代謝產物，檢測并定量了原阿片堿和α-別隱品堿等6種生物堿的血藥濃度，結果表明，該藥中21種活性成分有17種被入腦吸收，6種分析物都在3.5～5 h達到峰值[37]。張笑愷以延胡索總生物堿提取物200 mg·kg-1的劑量對SD大鼠進行灌胃給藥，0.5 h后肝門靜脈取血進行了定性檢測，探索了大鼠血漿延胡索總生物堿定性分析的血清藥物化學方法，并首次對大鼠灌胃延胡索總生物堿進行了研究[38]。

2.2兔和比格犬的藥代動力學

謝彩娟使用HPLC研究了原阿片堿在雄性新西蘭白兔灌胃延胡索后的藥代動力學參數[39]。發現兔血漿中原阿片堿在4.5 h達到最高值，消除半衰期為1.98 h。原阿片堿具有血液中消除較快，從血漿中迅速向組織轉移，并在體內不易蓄積，分布容積較小等藥物動力學特征。Huang等用UPLC-MS/ MS檢測了灌胃Shao-Fu-Zhu-Yu Decoction后的比格犬的藥代動力學參數，此法測定了包括原阿片堿在內的7種生物堿[40]。

3　小結

近年來，原阿片堿和別隱品堿因具有多種生物活性而備受關注，已經有相關報道。從時間進度縱向比較，原阿片堿的藥代動力學目前的研究手段已經從HPLC逐漸擴展到UPLC-MS/MS或者HPLC-Q/TOF等高端精密儀器，其藥代研究越來越向著更加準確定性和定量的方向延伸。從藥物、動物的種類橫向比較，目前已經開展了原阿片堿單體、多種中草藥復方、植物提取物多種藥物形式和大鼠、兔、比格犬等幾個種類動物的藥代動力學研究。α-別隱品堿的藥代動力學研究目前被報道的還比較少，僅報道了元胡止痛方和延胡索提取物的大鼠藥代動力學實驗。

研究表明，原阿片堿的藥代動力學具有以下特點：達峰濃度快，約2～4 h，在血液中達峰值后濃度迅速下降，迅速分布到全身多個組織且在大部分組織滯留較長時間。原阿片堿可以透過血腦屏障到達腦部，且保持較高濃度。少部分在以原型經尿液等形式排出，大部分以其他代謝物的形式排出體外。研究這兩種生物堿的藥代對于其后續成藥性、飼料添加劑的殘留等問題都具有重要意義。

雖然目前相關生物堿的藥代動力學研究尚處于起步階段，但是相信隨著獸藥藥代動力學相關儀器的更新換代，體內藥物分析技術的飛速發展及對于畜禽食品安全、藥物殘留等問題的更加重視，未來普羅托品類生物堿的藥代動力學的研究將會有很大的進步。

[參考文獻]

[1]李凱年.發達國畜牧業正在遠離飼用抗生素[N].中國畜牧獸醫報,2005-8-7（012）.

[2]張建東,許梓榮,詹勇.抗生素類飼料添加劑替代品研究進展[J].上海畜牧獸醫通訊,2001（3）:6-9.

[3]萬伶俐,于振斌,張爾剛,等.抗生素添加劑替代產品的研究進展[J].吉林農業科學,2003,28（3）:39-42.

[4]石現瑞,高峰.抗生素添加劑的負面效應及其替代品的研究[J].飼料博覽,2000（3）:24-26.

[5]潘康成,張鈞利.抗生素添加劑替代品的開發及研究[J].飼料與養殖,2006（1）:4-5.

[6]曾書琴.抗生素添加劑的負面效應及其替代品的研究動態[J].黑龍江畜牧獸醫,2004（2）:61-63.

[7]王海英,祁克宗,彭開松.禽防御素代替抗生素作為飼料添加劑的研究現狀[J].獸藥與飼料添加劑,2008,13（5）:27-28.

[8]張慶茹,王春光,張鐵,等.替代抗生素的綠色飼料添加劑研究進展[J].吉林畜牧獸醫,2002（1）:7-9.

[9]張啟萍.中草藥添加劑對斷奶仔豬的防腹瀉促生長的效果試驗[J].上海畜牧獸醫通訊,2009（1）:46.

[10]李洪龍,胡闖.中草藥添加劑應用于斷奶仔豬的研究進展[J].吉林畜牧獸醫,2007,28（6）:14-16.

[11]張顯花,周圻,胡麗華,等.中草藥添加劑對斷奶仔豬生長性能的影響[J].飼料研究,2005（4）:9-11.

[12]李志強,葛長榮,田允波,等.中草藥添加劑對哺乳仔豬生長性能的影響[J].云南農業大學學報,2002,17（1）:59-62.

[13]于磊,嘎爾迪,尹福泉,等.中草藥飼料添加劑在動物生產中的應用[J].畜牧與飼料科學,2007（4）:46-49.

[14]吳立君.天然藥物化學[M].北京:人民衛生出版社,2007.

[15]趙娜,高峰,劉彬,等.芐基四氫異喹啉類生物堿的藥理作用及其研究進展[J].藥學實踐雜志,2015,33（4）:313-315.

[16]王欣.博落回中生物堿成分的研究Ⅱ[D].楊凌:西北農林科技大學,2005.

[17]鄧敏,宋秀媛,王家富.普洛托品的藥理作用研究進展[J].中草藥,2001,32（3）:275-277.

[18]肖俐,曾建國,劉林,等.別隱品堿抗肝纖維化作用[J].中草藥,2011,42（6）:1 158-1 163.

[19]王朝元,童勝蘭,胡鑫.博落回生物堿成分及其抗菌活性的研究[J].中南民族大學學報（自然科學版）,2015,34（1）:39-42.

[20]崔文博,錢金栿.普羅托品的研究進展[J].醫學綜述,2012,18 （14）:2 260-2 262.

[21]卿志星,程辟,曾建國.博落回中生物堿質譜裂解規律研究進展[J].中草藥,2013,44（20）:2 929-2 939.

[22]張福華.獸醫藥物代謝動力學研究通訊[J].中國獸醫雜志,1982（4）:33.

[23]吳恒,陳禮明,張善堂.高效液相色譜在中藥研究中的應用[J].安徽醫藥,2009,13（8）:863-865.

[24]徐會平,馮素香,屈凌波,等.中藥藥代動力學研究的應用及進展[C].第十屆全國中藥和天然藥物學術研討會論文集,2009.

[25]高姍,徐康康.中藥藥代動力學研究進展[J].中國實用醫藥,2010,5（21）:249-251.

[26]陳毅文,劉華鋼.生物堿類的藥代動力學研究近況[J].醫學綜述,2009,15（22）:3 489-3 491.

[27]張雪輝,陳建民.中藥中生物堿的藥代動力學研究近況[J].中醫藥信息,2002,19（2）:15-18.

[28]楊丹莉,黃燮南,孫安盛,等.RP-HPLC法測定大鼠血漿的普魯托品濃度及其藥代動力學研究[J].藥學學報,2001,36（10）:790-792.

[29]楊丹莉,黃燮南,孫安盛,等.RP-HPLC法測普魯托品在大鼠體內分布和排泄[J].中國藥理學通報,2003,19（4）:444-447.

[30]王萍,竇志英,曹柳.延胡索炮制品在大鼠血漿中的藥動學研究[J].中國藥學雜志,2009,44（13）:1 013-1 018.

[31]Dou Z,Li K,Wang P,et al.Effect of wine and vinegar processing of rhizoma corydalis on the tissue distribution of tetrahydropalma?tine,protopine and dehydrocorydaline in rats[J].Molecules,2012,17:951-970.

[32]Ma H,Wang Y,Guo T,et al.Simultaneous determination of tetra?hydropalmatine,protopine,and palmatine in rat plasma by LCESI-MS and its application to a pharmacokinetic study[J].Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis,2009,49（2）:440-446.

[33]郭常川.中藥紫金龍中異紫堇定堿和原阿片堿的藥物代謝及動力學研究[D].杭州:浙江大學,2013.

[34]Wu C,Yan R,Zhang R,et al.Comparative pharmacokinetics and bioavailability of four alkaloids in different formulations from Co?rydalis decumbens[J].Journal of Ethnopharmacology,2013,149 （1）:55-61.

[35]Liao C,Chang S,Yin S,et al.A HPLC-MS/MS method for the si?multaneous quantitation of six alkaloids of Rhizoma Corydalis De?cumbentis in rat plasma and its application to a pharmacokinetic study[J].Journal of Chromatography B,2014,944:101-106.

[36]Liu P,Li W,Li Z,et al.Comparisons of pharmacokinetic and tis?sue distribution profile of four major bioactive components after oral administration of Xiang-Fu-Si-Wu Decoction effective frac?tion in normal and dysmenorrheal symptom rats[J].Journal of Eth?nopharmacology,2014,154（3）:696-703.

[37]Tao Y,Xu H,Wang S,et al.Identification of the absorbed constit?uents after oral administration of Yuanhu Zhitong prescription ex?tract and its pharmacokinetic study by rapid resolution liquid chromatography/quadrupole time-of-flight[J].Journal of Chroma?tography B,2013,935:1-9.

[38]張笑愷.元胡止痛方主活性成分分析及其藥代動力學研究[D].西安:第四軍醫大學,2012.

[39]謝彩娟.HPLC法研究中藥延胡索的質量及藥代動力學[D].西安:陜西師范大學,2005.

[40]Huang X,Su S,Cui W,et al.Simultaneous determination of pae?oniflorin,albiflorin,ferulic acid,tetrahydropalmatine,protopine,typhaneoside,senkyunolide I in Beagle dogs plasma by UPLCMS/MS and its application to a pharmacokinetic study after Oral Administration of Shaofu Zhuyu Decoction[J].Journal of Chroma?tography B,2014,962:75-81.

Research Progresses on Pharmacokinetics Studies of Protopine and Allocryptopine

YANG Di1,3,LIU Zhaoying1,2,3,LIU Yisong1,2,3,ZENG Jianguo1,2*
（1.National and Local Union Engineering Research Center for the Veterinary Herbal Medicine Resources and Initiative,Hunan Agricultural University,Changsha 410128,China; 2.Hunan Co-Innovation Center for Utilization of Botanicals Functional Ingredients,Hunan Agricultural University,Changsha 410128,China; 3.College of Veterinary Medicine,Hunan Agricultural University,Changsha 410128,China）

Abstract:Protopine and α-allocryptopine are two of important protopine alkaloids which have a variety of bio?logical activity such as anti-bacterial,anti-inflammatory and so on.It would be a good choice for new feed additives and veterinary drugs because of anti-parasitic biological activity.In recent years,study on veterinary drugs,pharma?cokinetics used UPLC method and UPLC-MS/MS method.This paper reviewed the two alkaloids,pharmacokinetics study on rats,rabbits,Beagle dogs in the last decade.

Key words:Protopine; allocryptopine; Macleaya cordata; pharmacokinetics

*通訊作者：教授，博士生導師，E-mail:ginkgo@world-way.net。

作者簡介：楊迪（1991-），男，湖南岳陽人，碩士研究生，研究方向為中獸藥藥代動力學。

基金項目：長沙市科技計劃重點項目（K1308182-21）

收稿日期：2016-01-29

中圖分類號：S859.79；S816.7

文獻標志碼：A

文章編號：1001-0084（2016）03-0011-04