血漿sLOX-1水平與冠狀動脈慢血流的相關性

任引剛， 劉　軍， 任一然， 張　昕， 韓　偉， 楚　軼， 李宏增*

(1第四軍醫大學唐都醫院老年病科，西安　710038; 2第四軍醫大學唐都醫院心內科；*通訊作者，E-mail: tangduzhaoly@126.com)

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血漿sLOX-1水平與冠狀動脈慢血流的相關性

任引剛1， 劉軍1， 任一然1， 張昕1， 韓偉2， 楚軼2， 李宏增1*

(1第四軍醫大學唐都醫院老年病科，西安710038;2第四軍醫大學唐都醫院心內科；*通訊作者，E-mail: tangduzhaoly@126.com)

摘要：目的探討血漿可溶性凝集素樣氧化型低密度脂蛋白受體-1 (sLOX-1)水平與冠狀動脈慢血流的相關性。 方法該研究共納入82名冠脈慢血流患者(慢血流組，n=82)及184名冠脈血流正常者(對照組，n=184)，采用酶聯免疫吸附(ELISA)法測定兩組的血漿sLOX-1水平并比較，采用參照心肌梗死溶栓治療后(thrombolysis in myocardial infarction，TIMI)血流幀數(TFC)評價冠脈血流速度。通過多元Logistic 回歸分析評價血漿sLOX-1水平與合并冠心病的獨立相關性，采用Spearman相關分析評價血漿sLOX-1水平與平均TMI-TFC的相關性。結果慢血流組患者血清sLOX-1水平顯著高于對照組[0.94(0.48-1.30)vs 0.47(0.39-0.86) ng/ml，P﹤0.001]。多元Logistic回歸分析顯示血漿sLOX-1水平是預測冠脈慢血流獨立危險因子(優勢比2.044, 95% 可信區間1.274-3.279;P=0.003)。Spearman相關分析結果顯示，血漿sLOX-1水平與TIMI-TFC呈顯著正相關(rs=0.315，P=0.004)。結論血漿sLOX-1水平與冠脈慢血流的發生及嚴重程度存在獨立正相關，sLOX-1有望成為預測冠脈慢血流風險并對其進行危險分層的重要生物標記物。

關鍵詞：心血管疾病;冠狀動脈慢血流;可溶性凝集素樣氧化型低密度脂蛋白受體-1;生物學標記物

冠狀動脈慢血流現象(coronary slow flow phenomenon，CSFP)是一種冠脈造影時的血流現象，主要指在冠狀動脈不存在顯著狹窄(狹窄程度﹤40%)的情況下，遠端冠脈血管發生血流灌注延遲的現象[1，2]。據報道，在疑診冠心病進行冠脈造影的人群中，大約有7%的患者會出現CSFP[3]。研究表明，CSFP與心絞痛發作、心肌梗死、惡性心律失常甚至心源性猝死等不良心血管事件有一定關聯[4，5]，因此越來越受到重視。

CSFP的病理生理機制仍未完全明確，前期研究表明，炎癥反應、氧化應激、冠脈內皮功能不全等都可能在CSFP的發生發展中起一定作用[5,6]。凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體-1(LOX-1)是一種主要表達于內皮細胞、血管平滑肌細胞(VSMC)及巨噬細胞的Ⅱ型糖蛋白，其主要功能是結合、內吞并降解氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)[7]。LOX-1與其配體的結合，可激活下游的信號轉導通路，廣泛參與炎癥反應、氧化應激、內皮功能不全等病理生理過程[8,9]?；诖?，LOX-1的高表達可能與CSFP的發生發展存在一定關聯。LOX-1跨膜的結構域可以被水解為可溶性的sLOX-1，sLOX-1能夠反映LOX-1的表達水平[10]。因此，本研究檢測CSFP患者的血漿sLOX-1水平，并評價其與CSFP發生發展的關系。

1材料與方法

1.1研究對象

本研究設計為前瞻性的橫斷面研究，研究對象為2013-05～2015-05在我院住院行冠脈造影的患者，共納入CSFP患者82例(慢血流組，n=82)，另外納入冠脈造影正常者184例作為對照(對照組，n=184)。CSPF定義為任一冠脈主支血管心肌梗死溶栓治療(thrombolysis in myocardial infarction，TIMI)血流幀數(TIMI frame count，TFC)>27[11]。主要排除標準：①急性冠脈綜合征；②心臟節律異常如心房顫動及病態竇房結綜合征；③其他器質性心臟病,如心肌病、嚴重的心瓣膜病、先天性心臟病或嚴重的心功能不全；④2型糖尿??；⑤嚴重的肝腎功能障礙；⑥惡性腫瘤。所有入選者(包括慢血流組及對照組)在行冠脈造影之前均按照臨床常規給予雙聯抗血小板、他汀穩定斑塊等治療。

1.2研究方法

1.2.1冠脈造影按照常規方法行冠脈造影術，按照Gibson等[12]提供的方法計算主支冠脈血管的TIMI-TFC，將前降支血管的TFC除以1.7以校正其長度[9]，將前降支(校正后)、回旋支、右冠的TFC加起來除以3取均值，即得到平均TFC。

1.2.2血生化檢測所有研究對象均采集清晨靜脈血10 ml，各常規血生化指標如空腹血糖(FBG)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)由Hitachi 7600全自動生化分析儀檢測。使用Abbott ci8200全自動分析儀測量超敏C反應蛋白(Hs-CRP)。采用酶聯免疫吸附法(ELISA)法檢測各組的sLOX-1水平，試劑盒購自美國Cloud-Clone公司，各組血清標本的吸光光度值由BIO-RAD680酶標儀檢測。

1.3統計分析

采用Kolmogorov-Smirnov檢驗檢測數據分布的正態性。正態分布的數據采用均數±標準差表示，兩組比較采用t檢驗；非正態分布的數據采用中位數(四分位差)表示，兩兩比較采用Mann-WhitneyU檢驗；計數資料用百分率表示，兩兩比較采用秩和檢驗。采用多因素Logistic逐步回歸法評價其與存在CSFP的獨立相關性。采用Spearman相關分析評價血漿sLOX-1水平與平均TFC的相關性。所有統計分析均采用SPSS17.0軟件進行。雙側檢驗P﹤0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1基本臨床資料

除慢血流組的Hs-CRP 水平及TIMI-TFC均較對照組顯著升高外，其余各基線臨床資料兩組間差異無統計學意義(見表1)。

表1兩組患者的基本臨床特征及冠脈造影結果

Table 1Baseline characteristics and angiographic findings

組別n年齡(歲)男性[例(%)]吸煙[例(%)]BMI(kg/m2)收縮壓(mmHg)舒張壓(mmHg)FBG(mmol/L)TC(mmol/L)對照組18456(50-63)112(60.87)79(42.93)25.27(23.98-26.25)131.65±16.6981.85±10.615.49±0.734.48±1.07慢血流組8255(50-65)53(64.63)41(50.00)25.30(24.37-26.42)133.10±17.2383.18±11.045.50±0.884.47±1.07檢驗統計量-0.1300.3411.143-0.543-0.648-0.936-0.0900.054 P 0.8970.5590.285 0.587 0.517 0.350 0.9280.957

組別nTG(mmol/L)LDL-C(mmol/L)HDL-C(mmol/L)Hs-CRP(mg/L)TIMI-TFC前降支(校正后)回旋支右冠平均TFC對照組1841.80(1.29-2.65)2.77±0.851.05±0.220.61(0.43-0.87)22.26±3.5920.57±2.6621.83±3.0321.76±2.55慢血流組821.91(1.55-2.57)2.93±0.981.01±0.230.80(0.47-1.29)30.89±7.9228.62±8.0531.33±8.4330.28±5.84檢驗統計量-1.279-1.2721.520-2.402-16.628-17.425-18.604-17.536 P0.2010.2040.1300.016﹤0.001﹤0.001﹤0.001﹤0.001

BMI：體質量指數；FBG：空腹血糖；TC：總膽固醇；TG：甘油三酯；LDL-C：低密度脂蛋白膽固醇；HDL-C：高密度脂蛋白膽固醇;Hs-CRP：超敏C-反應蛋白;TIMI-TFC：血管心肌梗死溶治療血流幀數；與對照組相比，*P﹤0.05

2.2血漿sLOX-1水平

慢血流組患者血漿sLOX-1水平較對照組顯著升高，差異有統計學意義[0.94(0.48-1.30)ng/mlvs0.47(0.39-0.86)ng/ml，P﹤0.001]。

2.3各變量與合并慢血流的獨立相關性

將各變量納入多因素Logistic逐步回歸分析，結果顯示，血漿sLOX-1水平是存在CSFP的獨立危險因子(優勢比2.044,95% CI 1.274-3.279;P=0.003,見表2)。

表2多元Logistic回歸分析評價CSFP的獨立危險因子

Table 2Multiple Logistic regression analysis for the independent predictor of CSFP

變量BSEWalsOR95%CIP年齡0.0030.0150.0511.0030.974-1.0340.822男性0.0460.3160.0211.0470.563-1.9460.884吸煙-0.3020.3040.9870.7390.407-1.3420.321BMI0.0340.0640.2871.0350.913-1.11720.592收縮壓0.0050.0110.2041.0050.983-1.0270.652舒張壓0.0070.0170.1701.0070.973-1.0420.680FBG0.0480.1840.0691.0490.732-1.5050.793TC-0.0510.1390.1320.9510.723-1.2490.716TG0.1310.1620.6591.1410.830-1.5670.417LDL-c0.2040.1621.5831.2260.893-1.6830.208HDL-c-0.9360.6452.1080.3920.111-1.3880.147Hs-CRP0.0700.0591.4121.0720.956-1.2030.235sLOX-10.7150.2418.7802.0441.274-3.2790.003

2.4血漿sLOX-1水平與平均TFC的相關性

在CSFP患者中，我們進一步評價了血漿sLOX-1水平與平均TFC的關系，Spearman相關分析結果顯示，血漿sLOX-1水平與平均TFC的關系呈顯著正相關(rs=0.315，P=0.004，見圖1)。

圖1　患者血漿sLOX-1水平與平均TFC的相關性Figure 1　Correlation between plasma sLOX-1 levels and mean-TFC

3討論

隨著冠脈介入技術的普及，臨床上觀察到的CSFP越來越多，因為CSFP與患者的預后存在一定的關聯[4,5]，其受到的重視程度也越來越高，早期預測CSFP發生的風險對于降低與其相關的各種臨床不良事件的發生率具有重要意義。而無創、簡便快捷的生物學標記物檢測在疾病的風險評估和危險分層方面發揮著越來越重要的作用。

LOX-1是由ox-LDL受體1(OLR1)基因編碼的Ⅱ型糖蛋白，與大多數糖蛋白一樣，LOX-1可以通過其特有的結構域特異性地結合下游的活性分子，廣泛參與機體的病理生理過程。LOX-1的主要配體有AGEs、CRP等，LOX-1與其配體結合后，通過激活多條信號轉導通路，會加重冠脈內皮細胞損傷，并促進平滑肌細胞和巨噬細胞吞噬脂質，并轉化為泡沫細胞[13-15]。另外，LOX-1能誘導各種黏附分子和炎癥因子的表達，促進單核細胞和淋巴細胞的黏附聚集[16-18]。上述病理生理過程與CSFP的發生密切相關。

LOX-1位于細胞外的結構域可以被水解成sLOX-1并釋放入血，使其具備了成為血生物標記物的基本條件。本研究首先發現，CSFP的血漿sLOX-1水平較對照者顯著升高，這初步表明血漿sLOX-1水平越高者在冠脈造影過程中出現CSFP的可能性就越大。在進一步的多元Logistic回歸分析中發現，在排除了混雜因素干擾后，血清sLOX-1水平與CSPF存在具有獨立正相關的趨勢，這一結果表明高血漿sLOX-1水平是CSFP發生的獨立危險因子。因兩組患者在基線臨床資料方面的不一致性，我們進一步進行了多項二元Logistic回歸分析，結果表明，在排除了各種混雜因素干擾后，高血清sLOX-1水平是CSFP發生的獨立危險因子。因臨床實踐中常用平均TFC來評價CSFP的嚴重程度，我們進一步在CSFP患者中評價了血漿sLOX-1水平與平均TFC的相關性，研究結果顯示，血漿sLOX-1水平與CSFP患者的冠脈平均TFC呈正相關，這一研究結果表明，血漿sLOX-1水平也能反映CSFP的嚴重程度。

總之，我們發現血漿sLOX-1水平與CSFP的發生及嚴重程度存在獨立正相關，sLOX-1有望成為預測CSFP風險并對其進行危險分層的重要的生物標記物。然而，本研究是一個小樣本量的橫斷面研究，在將本研究結論應用于臨床實踐之前，研究結論尚需要大樣本的前瞻性研究來證實。

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作者簡介：任引剛，男，1978-03生，本科，主治醫師，E-mail:sxrenyingang@163.com

收稿日期：2016-03-16

中圖分類號：R541.4

文獻標志碼：A

文章編號：1007-6611(2016)07-0589-04

DOI：10.13753/j.issn.1007-6611.2016.07.002

Correlation between plasma sLOX-1 levels and coronary slow flow phenomenon

REN Yingang1, LIU Jun1, REN Yiran1, ZHANG Xin1, HAN Wei2, CHU Yi2, LI Hongzeng1*

(1DepartmentofGeriatrics,TangduHospital,FourthMilitaryMedicalUniversity,Xi’an710038,China;2DepartmentofCardiology,TangduHospital,FourthMilitaryMedicalUniversity;*Correspondingauthor，E-mail:tangduzhaoly@126.com)

Abstract：ObjectiveTo explore the correlation between plasma sLOX-1 levels and coronary slow flow phenomenon(CSFP).MethodsEighty-two patients with CSFP and 184 controls with normal coronary flow were enrolled. Plasma sLOX-1 levels were determined by enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) and compared between the two groups. Coronary flow rate was assessed by thrombolysis in myocardial infarction(TIMI) frame count (TFC). Multivariate Logistic regression was used to analyze the independent association between plasma sLOX-1 levels and CSFP. Spearman correlation coefficient was performed to assess the correlation between plasma sLOX-1 levels and mean-TFC.ResultsPlasma sLOX-1 levels in CSFP group were significantly higher than those in control group[0.94(0.48-1.30) ng/ml vs 0.47 (0.39-0.86)ng/ml, P﹤0.001]. Multivariate Logistic regression analysis demonstrated that sLOX-1 was the independent predictor of CSFP(odds ratio 2.044, 95% CI 1.274-3.279; P=0.003). Spearman correlation analysis revealed that plasma sLOX-1 level was positively correlated with mean-TFC (r=0.311,P=0.004). ConclusionThe plasma sLOX-1 levels is independently associated with the presence and severity of CSFP, suggesting that sLOX-1 might be a potential biomarker for CSFP prediction and risk stratification.

Key words:cardiovascular disease;coronary slow flow phenomenon;sLOX-1;biomarker