王旭 馮星 紀軍 王華峰 左北瑤
摘要:本文結合工作實踐,對在試驗條件簡陋條件下制作羊的細管凍精進行歸納,形成一個簡易的制作羊細管凍精的方法,以期對羊的品種資源保護、高繁殖力種公羊利用等方面發揮積極作用。
關鍵詞:羊;細管凍精;方法
中圖分類號:S858.26 文獻標識碼:B 文章編號:2096-3637(2017)07-0043-01
20世紀50年代,國外開始研究羊的冷凍精液,80年代以后,隨著輸精方法的改進和輸精器械的改良,羊冷凍精液的受胎率有了較大的提高。目前,國外關于羊冷凍精液的研究已有了較大的進展,并在畜牧業較為發達的國家得到廣泛應用。國內羊冷凍精液的研究始于20世紀70年代,但在實際應用和推廣實踐中,由于受諸多因素的影響,受胎率一直不太理想[1]。本文結合基層工作實踐和同行做法,形成一個羊細管凍精制作的簡易方法,希望在羊品種資源保護、提高高繁殖力種公羊利用率、推廣人工授精技術等方面上發揮積極作用。
1 材料選擇
1.1 采精公羊
選擇生長發育良好、健康無疾病、性欲較強、品種特征明顯的種公羊作為采精公羊。種公羊需提前1個月加強補飼,每只種公羊每天補充精料量為:玉米0.5~1kg,豆粕0.25~0.5kg,胡蘿卜0.5~1kg,雞蛋1~4枚。采精期間增加精料補給量,非采精期間酌情減少,早晚各補飼1次,自由飲水,每天運動不少于2h [2]。
1.2 稀釋液和冷凍液配制[3]
基礎液:葡萄糖3g+檸檬酸鈉3g+雙蒸水100ml,充分搖勻溶解。
稀釋液:取80ml基礎液+20ml卵黃,同時加入青霉素鈉和鏈霉素各10萬單位,搖半個小時,使其充分溶解混合。
冷凍液:取88ml稀釋液+12ml甘油,搖0.5h,使其充分混合。
2 制作流程
2.1 精液采集
使用假陰道采精法采集精液,所有器械在使用前均要高溫消毒或75%酒精消毒。采精時,半蹲在臺畜右側,右手橫握假陰道,閥門靠手掌心,前低后高,待公羊爬跨陰莖頭露出包皮時,左手托住陰莖包皮,順勢將陰莖導入假陰道,再把假陰道傾斜,使集精杯朝下,待公羊向前猛沖射精時,射出的精液就直接進入集精杯中,而不是沿著內胎再流入集精杯,減少了精液的污染。
2.2 精液稀釋和平衡
精液采集后,首先檢測精液品密度、活力,只有密度不低于20億/ml,活力不低于0.7才能制作細管凍精。精液的稀釋采用了二次稀釋法,根據精液密度可先用稀釋液(提前放到37℃水浴鍋中加熱)稀釋1~2倍,然后4℃冰箱中平衡2h。待平衡后,再加入與稀釋液等量的冷凍液(4℃),這樣就對原精液稀釋了2~4倍,然后再在4℃冰箱中平衡2h。
2.3 細管凍精制作
2.3.1封裝
在一個不高于5℃的操作環境里進行操作,平衡后的精液從4℃冰箱中拿出后,輕微混合,然后將精液吸入0.25ml細管中,并用封口粉封好。
2.3.2平衡
細管精液封裝好后,均勻擺放在細管架上,平衡5min左右。
2.3.3熏蒸
提前準備好的一個大的容器內倒入液氮,待分裝好的細管平衡后,迅速將細管架放入容器內,確保細管與液氮面保持0.8~1cm的距離,蓋上容器蓋子,熏蒸5min左右。
2.3.4冷凍
細管精液在液氮面上熏蒸完后,將細管全部浸入液氮中,放置10~30min左右,便完成了細管凍精制作。
2.4凍精解凍和保存
將制作好的細管凍精隨機抽取1~3只,在38~40℃的溫水中解凍13~15s,然后再顯微鏡下觀察解凍后的活力,活力檢測在0.3以上便可收集保存,否則棄去不用。將制作好的細管凍精裝入凍精袋,標注公羊的品種、凍精數量,精液活力以及生產日期等信息后便可裝入液氮罐長期保存。
3 小結
在條件簡易的情況下,如果制作細管凍精的環境溫度較高,可以準備一個大的泡沫箱,在里面放上冰塊,制造一個低溫的小環境,便可以完成細管封裝。
封裝細管時,如果沒有專用的設備,可以采取以下簡易做法:將細管海綿端對齊,放入口中,另一端放入精液中,先吸少量精液,然后再吸入一小段空氣,最后將細管吸滿,用封口粉封住即可。
細管架放入液氮容器時一定要放平,同時確保液氮面與細管的距離適當,如果液氮面與細管太近,細管內的精液會立即冷凍,距離太遠,冷凍的速度變慢,都會對結果造成影響。
參考文獻
[1]周芬娜,賀曉珺,智利紅等.羊冷凍精液人工授精技術研究進展[J].獸醫導刊,2015(14):66.
[2]紀軍,王旭,艾爾肯江等. 巴音布魯克種公羊馴化采精探析[J].安徽農業科學,2003,41(7):2971-2972.
[3]郭志明,馬濤. 綿羊凍精的生產及其影響因素[J].青海畜牧獸醫雜志, 2003,33(3):46.