TIP30在三陰性乳腺癌中的表達及臨床病理意義*

梁忠锃，張遠起，黃勝超，李亞東，李建文

(廣東醫科大學附屬醫院，廣東 湛江 524001)

乳腺癌位居女性惡性腫瘤首位，其中三陰性乳腺癌是一種特殊的乳腺癌亞型，約占全部乳腺癌的10%～20.8%[1-2]，三陰性乳腺癌(triple-negative breast cancer，TN-BC)是指雌激素受體(ER)、孕激素受體(PR)和人表皮生長因子受體2(Her-2)均為陰性的乳腺癌，常表現為分化程度低、組織學分級高，復發率高、總存活期短。它作為一類高危乳腺癌，總體預后差，易復發和轉移，因缺乏常用分子靶點預后差于其他亞型[3]，是目前乳腺癌治療領域的難點和熱點。TIP30作為新近發現的抑癌基因,目前國內外對其與三陰性乳腺癌的研究尚未見報道。本文采用免疫組化SP法檢測三陰性乳腺癌、非三陰性乳腺癌及正常乳腺組織標本中TIP30的表達，并探討TIP30在三陰性乳腺癌中的臨床病理學意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集廣東醫科大學附屬醫院2015—2016年病理資料完整的乳腺癌手術標本93例，所有病例均經HE切片復讀確認,術前均未行放、化療及其他特殊治療。其中三陰性乳腺癌40例，非三陰性乳腺癌53例。另收集乳腺良性病變旁正常乳腺組織28例?；仡櫡治鯰NBC臨床病理學指標,包括腫瘤大小、有無淋巴結轉移等,根據美國癌癥聯合會(AJCC),進行臨床分期,患者年齡27～81歲,平均年齡47歲。

1.2 主要試劑

鼠抗人 TIP30 單克隆抗體購自廣州吉賽生物科技有限公司。

1.3 免疫組化

標本經4%甲醛溶液固定>6 h，脫水、石蠟包埋，采用免疫組化二步法檢測各標本中TIP30蛋白的表達。判斷標準：染色結果根據相關文獻[4]制定，采用IP(Intensity+Percentages)評分:(1)染色強度。細胞無染色為0分，淡黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分;(2)陽性細胞數。染色細胞數<10%為0分，染色細胞數10%～30%為1分，染色細胞數31%～60%為2分，染色細胞數>60%為3分。(1)、(2)兩項乘積，得分>2分為陽性，≤2分為陰性。因此，TIP30蛋白在乳腺癌組織中的表達強弱以積分量化表示有:0分、1分、2分、3分、4分、6分、9分。

1.4 統計學方法

采用SPSS16.0軟件進行統計分析,計數資料以例數百分比(%)表示，組間比較采用χ2檢驗，以P<0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 TIP30蛋白在乳腺組織中的表達情況

TIP30蛋白主要表達于胞膜與胞質，在TNBC組及NTNBC組中TIP30蛋白染色陽性率分別為32.5%、56.6%，而在正常乳腺組織中陽性率為89.2%。TIP30蛋白在TNBC組中陽性表達與在NTNBC組中陽性表達比較差異有顯著性，差異有統計學意義(P<0.01)；TIP30蛋白在TNBC組陽性表達與在正常乳腺組織中陽性表達比較差異有顯著性，差異有統計學意義(P<0.01)；TIP30蛋白在正常乳腺組織陽性表達與在NTNBC組中陽性表達比較差異有顯著性，差異有統計學意義(P<0.01)。表明TIP30蛋白在乳腺癌組織中低表達，而在TNBC組中尤為顯著。 見表1。

表1 TIP30蛋白在乳腺組織中的表達情況

2.2 TIP30表達與TNBC臨床病理參數的關系

TIP30蛋白在TNBC中的陽性表達與腫瘤大小、腋窩淋巴結轉移有關，差異有統計學意義(P<0.05)，腫瘤直徑大于2 cm較小于2 cm、腋窩淋巴結有轉移較無轉移TNBC組織中TIP30蛋白陽性率低；TIP30蛋白表達與絕經狀態、年齡、臨床分期無相關性，差異無統計學意義(P>0.05)。見表2。

表2 TIP30表達與TNBC臨床病理參數的關系

3 討論

乳腺癌屬于高度異質性腫瘤,無論在分子生物學、組織形態、免疫表型，還是對治療的反應上均存在極大的個體差異，TNBC且好發于40歲以下女性，具有特殊的生物學行為和臨床病理特征,臨床表現為侵襲性病程,易發生局部復發和遠處轉移，惡性度高預后較其他類型的乳腺癌差，生存率低。 目前TNBC術后主要依靠化療，內分泌治療和抗HER-2靶向治療均無效,因此，尋找新的治療靶點，對TNBC的治療起到非常積極的作用。

TIP30最早是1997年Shtivelman在用RNA差異顯示技術比較高轉移性小細胞肺癌細胞株及低轉移性小細胞肺癌細胞株時發現的一種新的抑癌基因，一開始命名為CC3。研究結果顯示，TIP30在人體的各種正常組織中如心、肝、腎、肺、腦，肌肉、骨骼等廣泛表達[5]。然而在腫瘤組織中，其存在表達降低或缺失的情況，說明TIP30低表達在這些腫瘤的發生過程中發揮作用。Ito等的研究結果顯示，TIP30蛋白的表達降低或缺失與大腸癌的發生有關，張霞等[6]的研究證明在TIP30在肝癌組織中也呈低表達狀態。

本研究運用免疫組織化學的方法，對40例三陰性乳腺癌及53例非三陰性乳腺癌組織的檢測發現，與正常乳腺組織比較，TIP30在乳腺癌組織中的表達均較正常組織降低，差異有統計學意義。而TIP30在三陰性乳腺癌組織中的表達則較非三陰性乳腺癌降低，差異有統計學意義。這也與TIP30在其他癌組織中的表達情況相符。從而提示TIP30作為一種抑癌基因，其表達降低參與了乳腺癌的發生過程，增強其表達可以起到遏制腫瘤的作用。另外，三陰性乳腺癌易發生復發和遠處轉移，惡性度高預后較其他類型的乳腺癌差，這其中一方面原因可能與TIP30在三陰性乳腺癌組織中的低表達有關。

本研究結果顯示，TIP30的表達與乳腺癌年齡、絕經狀態、TNM分期無相關性，而與腫瘤大小及腋窩有無淋巴結轉移相關。說明在腫物較大或者有腋窩淋巴結有轉移的三陰乳腺癌中，TIP30的表達更低，甚至是缺失的，這提示TIP30的低表達有利于乳腺癌的生長及淋巴結轉移。

然而，TIP30的低表達通過何種途徑影響乳腺癌的發生發展和淋巴結轉移，先前的研究結果顯示，TIP30基因是一個有潛在抗血管形成的腫瘤轉移抑制基因，而新血管生成對于腫瘤生長、侵襲和轉移的關系已被肯定[7]，這提示TIP30能夠抑制腫瘤血管生成。TIP30在三陰性乳腺癌中的低表達甚至缺失，有可能促進了腫瘤的血管生成，進而導致其惡性程度高及易侵襲性，提示TIP30有可能成為TNBC靶向治療的新靶點，但對其發揮作用的具體分子通路及表達調控點的有待進一步研究。

[1] CLEATOR S,HELLER W,COOMBES R C.Triple-negative breast cancer:therapeutic options[J].Lancet Oncol,2007,8(3):235-244.

[2] RAKHA E A,EL-SAYED M E,GREEN A R,etal.Prognostic markers in triple-negative breast cancer[J].Cancer,2007,109(1):25-32.

[3] HUDIS C A,GINANNI L.Triple-negative breast cancer:anunmet medical need[J].Oncologist,2011,1:1 -11.

[4] XIAO H,TAO Y,GREENBLATT J,etal.A cofactor,TIP30,specifically enhances HIV-1 Tat2 activated transcription[J].Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America,1998,95(5):2146-2151.

[5] LTO M,JIANG C，KRUMM K，etal．TIP30 deficiency increases susceptibilityto tumorigenesis[J].Cancer Research,2003,63(24):8763-8767．

[6] 張霞,趙健,王皓,等．TIP30基因在肝癌組織中的表達及意義[J].中華肝膽外雜志,2004,10(10):678-714．

[7] 郁寶銘.胃腸道腫瘤分子生物學研究的發展方向[J].中華實驗外科雜志,2005,22(10):1162-1163．