雅培i2000梅毒螺旋體特異性抗體檢測閾值及假陽性結果分析

宋燕，肖君

（航天中心醫院檢驗科，北京100049）

雅培i2000梅毒螺旋體特異性抗體檢測閾值及假陽性結果分析

宋燕，肖君

（航天中心醫院檢驗科，北京100049）

目的探討雅培i2000化學發光微粒子免疫分析法（CMIA）篩查梅毒螺旋體特異性抗體的測量閾值，并對CMIA檢測出的假陽性樣本進行分析。方法對航天中心醫院2014年7月到2016年11月間49 720例樣本進行CMIA法檢測梅毒螺旋體特異性抗體，篩查出的陽性樣本進行TPPA確證實驗，運用SPSS13.0對結果進行統計分析。結果49 720例樣本中CMIA法篩查出919例陽性樣本。919例陽性樣本進行TPPA確證，檢測出真陽性樣本650例，假陽性樣本269例。CMIA法S/CO值＞10的樣本，真陽性率為100.0%。年齡小于20歲的患者和婦產科就診的患者假陽性率較高，分別高達88.9%和50.0%，與其他組比較差異均具有統計學意義(P＜0.05)。結論CMIA法檢測梅毒特異性抗體的敏感性高，可作為篩查實驗。CMIA法檢測梅毒特異性抗體的S/CO值在1～10之間的樣本需要進行TPPA確證，而S/CO＞10的樣本無需TPPA驗證，可直接發陽性報告。年齡小于20歲的患者及婦產科就診患者假陽性率較高，檢測報告需慎重發出。

梅毒螺旋體；化學發光微粒子免疫分析；梅毒螺旋體抗體明膠凝集試驗法

梅毒是由蒼白密螺旋體引起的一種慢性全身性傳染性疾病，病程長，臨床表現多樣，可累及多個器官組織，近年來梅毒的發病率有快速上升的趨勢，使得梅毒成為一個十分嚴重的社會公共衛生問題[1]。血清學檢測是梅毒診斷的主要依據。美國雅培公司的Architect-i2000 SR全自動免疫分析儀采用化學發光微粒子免疫檢測法(CMIA)檢測梅毒螺旋體特異性抗體，具有敏感性高等優點，尤其是操作簡便快速，成為實驗室常用的篩查方法，但是該方法檢測梅毒存在一定的假陽性率，假陽性結果可對患者造成潛在的家庭矛盾，激化醫患關系。梅毒螺旋體抗體明膠凝集試驗法(TPPA）檢測梅毒螺旋體特異性抗體具有較高的敏感性和特異性，如果呈現陽性反應，基本可確診為感染梅毒，故常被用來作為梅毒檢測的確證實驗，但是該方法操作繁瑣、費時，不適宜大批標本的篩查[2-3]。

綜合考慮兩種梅毒特異性抗體的檢測方法及本醫院的實際情況，本實驗室的梅毒檢測流程是采用敏感度更高的CMIA法進行篩查，篩查出來的所有陽性樣本免費進行TPPA確證，但由于TPPA經濟成本高，且操作繁瑣，給實驗室人員增加了很多工作量?；诖?，我們對本實驗室近兩年來的i2000檢測的樣本數據進行分析，探索化學發光微粒子免疫檢測法檢測梅毒螺旋體特異性抗體的測量閾值，希望在保證檢測質量的前提下，節省成本并減輕實驗室人員的工作量，同時對假陽性數據進行進一步分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料收集航天中心醫院2015年1月到2016年11月的患者49 720例血清標本，使用雅培i2000進行梅毒特異性抗體檢測，篩查出的陽性樣本進行TPPA確證。

1.2 儀器和試劑美國雅培Architect-i2000 SR全自動免疫分析儀和相應Syphilis TP配套試劑，包括校準品和質控品；梅毒螺旋體抗體明膠顆粒凝集試驗法(TPPA）試劑盒賽樂迪亞，由日本富士瑞必歐株式會社提供。所有操作均參照試劑盒和儀器說明書進行。

1.3 檢測流程CMIA法篩查出的梅毒檢測結果S/CO小于1的樣本無需進行TPPA進行驗證，只對S/CO大于1的疑似陽性樣本進行TPPA確證。對篩查結果進行統計分析，計算出假陽性率和陽性預測值，并分析雅培i2000檢測梅毒螺旋體特異性抗體的測量閾值，要求當測量結果大于閾值時，TPPA確證結果真陽性率為100%。

1.4 統計學方法采用SPSS13.0軟件進行統計分析，計數資料以率表示，不同組之間率的比較采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩種方法檢測梅毒特異性抗體比較49 720例血清樣本檢測梅毒特異性抗體，當以廠家給定的參考值即S/CO的臨界值是1時，篩查陽性樣本共919例，陽性率為1.8%(919/49 720）。通過TPPA法對上述919例樣本進行確證，得到真陽性樣本650例，陰性樣本269例，真陽性率為70.7%(650/919），CIMA法篩查梅毒螺旋體特異性抗體假陽性率為0.5%(269/49 720）。CMIA法檢測梅毒螺旋體抗體敏感性是100%(650/ 650)。采用SPSS13.0對兩種方法的檢測結果進行χ2檢驗，差異具有統計學意義(χ2=0.826，P=0.000）。然后根據陽性樣本的S/CO值劃分為1～3、3～5、5～7、7～10及＞10五段，結果顯示，隨著S/CO值的增加，梅毒特異性抗體的真陽性率逐漸增高，當S/CO＞10時，真陽性率可達100%，不同值段的真陽性率見表1。

表1 650例陽性樣本在不同S/CO值段的TPPA結果分布(例)

2.2 不同年齡組患者梅毒假陽性率的分布將CMIA法篩查出來的919例陽性樣本數據進一步分析，根據年齡將患者劃分為不同的年齡組，結果發現不同年齡組的患者假陽性率存在一定的差異，在小于20歲年齡組里，患者假陽性率高達88.9%，見表2。采用χ2檢驗進一步檢測不同年齡組間的假陽性率是否存在差異，結果顯示CMIA法檢測梅毒螺旋體特異性抗體在三組患者間的假陽性率均存在差異，P值均小于0.05，差異具有統計學意義，見表3。

表2 不同年齡組患者梅毒假陽性率的分布(例)

表3 不同年齡組間假陽性率的χ2檢驗結果

2.3 不同就診科室患者梅毒特異性抗體假陽性率919例CMIA法篩查陽性患者包括男性508例，假陽性例數136例，假陽性率為26.8%(136/508），女性411例，假陽性例數133例，假陽性率為32.4%(133/ 411），采用SPSS13.0 χ2檢驗檢測不同性別患者組間梅毒螺旋體特異性抗體假陽性情況，χ2=3.427，P=0.064，差異無統計學意義。919例梅毒特異性抗體初篩陽性患者，根據就診科室不同分為內科組、外科組、婦產科組和皮膚性病科組，不同組間患者的假陽性率不同，其中婦產科組的假陽性率最高，皮膚性病科組患者的假陽性率最低，見表4。采用SPSS13.0 χ2檢驗進一步檢測不同就診科室間的假陽性率是否存在差異，結果顯示，除了內科組和外科組間的假陽性率之間比較，χ2=3.414，P=0.065，差異無統計學意義外，其他各組間χ2檢驗的P值均小于0.05，差異有統計學意義，見表5。

表4 不同就診科室患者梅毒特異性抗體假陽性率的分布情況（例）

表5 不同就診科室組間假陽性率的χ2檢驗結果

3 討論

《中華人民共和國傳染病防治法》將梅毒列為乙類傳染病，近年來，該傳染病發病率快速上升，2009年梅毒報告例數已經上升到甲乙類傳染病的第三位[4]。梅毒的臨床癥狀不典型、多樣，可累及多個器官，給人體造成嚴重傷害，這都提示我們梅毒的防治工作非常嚴峻。目前梅毒患者是梅毒的唯一傳染源，因此及早準確的篩查可讓患者得到及時有效的治療，并能降低感染率。

人感染梅毒后產生的梅毒螺旋體特異性抗體，主要是IgG類抗體，可終生穩定存在于體內，因此，檢測梅毒螺旋體特異性抗體多用來作為該病的篩查方法。多篇文獻報道證實，美國雅培公司的Architect-i2000 SR全自動免疫分析儀采用CMIA的檢測方法篩查梅毒，具有很高的靈敏性，其靈敏度甚至高達100%[5-8]，使其成為很多實驗室首選篩查手段，本實驗室的研究也證實了這一結論。但該檢測方法特異性相對較差，會存在假陽性結果，假陽性結果會給患者及其家庭帶來精神傷害，甚至導致醫療糾紛。TPPA法檢測梅毒特異性抗體具有特異性高的優點，甚至高達99.9%[9]，彌補了CMIA法的不足，兩者結合可以避免上述糾紛及矛盾。

本實驗室采取的梅毒檢測策略是用美國雅培公司的i2000CMIA法篩查，篩查陽性樣本均免費加做TPPA確證實驗，這樣就能保證給臨床提供一個準確的結果，由于TPPA操作繁瑣，這在一定程度上增加了工作人員負擔。本文通過對過去近3年的數據分析結論顯示，CMIA法篩查梅毒特異性抗體的敏感性為100%，是理想的篩查實驗。以儀器廠家提供的S/CO= 1為臨界值時，樣本真陽性率為70.7%，但如果將S/ CO=10設為閾值時，檢測真陽性率可達100%，故以后對于S/CO＞10的樣本，無需進一步加做TPPA，可直接發陽性報告，這在一定程度上可以減輕工作負擔。

文獻報道CMIA法檢測標本出現假陽性的原因有很多種[10]，針對本實驗室假陽性樣本數據我們做了分析，結論顯示對于年齡小于20歲的患者組，假陽性率最高，可達88.9%，與其他年齡組比較，差異具有統計學意義(P＜0.05）。分析原因可能是這部分患者年齡較小，相對性生活少，感染概率低。根據科室給患者分組，數據顯示婦產科組患者假陽性率最高為50.0%，而皮膚性病科組患者假陽性率僅為9.5%，分析原因可能是婦產科患者由于生理狀態發生變化，機體可能產生了一些異常物質可與試劑中的抗體發生非特異結合，故假陽性率較高，而皮膚性病科就診的患者多有高危生活史，就診目的明確，故假陽性率較低。

根據本次研究可得出以下結論：①雅培i2000檢測梅毒螺旋體特異性抗體敏感性高，可繼續作為我們實驗室的篩查方法；②CMIA法檢測梅毒螺旋體特異性抗體如果S/CO＞10，可不用做TPPA法驗證，直接發陽性報告；③CMIA法檢測梅毒螺旋體特異性抗體如果S/CO值在1～10之間，需要加做TPPA確證實驗；④婦產科患者及年齡小于20歲的患者CMIA法篩查梅毒假陽性率較高，這部分患者檢測結果需要額外注意，報告發出時需更加慎重。

綜上所述，本實驗室梅毒螺旋體特異性抗體檢測流程在保證檢測結果的同時優化了檢測流程，并減少了實驗室人員的工作量，大大提高檢測效率。同時對于婦產科患者或年齡較小的患者在檢測報告發出時更加慎重，爭取為臨床提供準確及時的報告。

[1]徐峰,張洪為.梅毒感染及其流行特征的回顧性研究[J].國際檢驗醫學雜志,2014,35(10):1295-1296.

[2]朱曉華.梅毒的實驗室檢測技術[J].中華實驗和臨床感染病雜志(電子版),2013,7(1):110-111.

[3]薄春敏,張靜,俞瓊炎,等.梅毒的檢測方法及臨床應用[J].檢驗醫學與臨床,2011,8(19):2363-2364.

[4]中華人民共和國衛生部.中國預防與控制梅毒規劃(2010年～2020年)[S].北京:衛生部,2010.

[5]鄭炘,劉紋,劉曉敏.ARCHITECT i2000 SR全自動化學發光免疫分析儀檢測梅毒螺旋體特異性抗體臨床應用評價[J].國際檢驗醫學雜志,2012,33(18):2246-2247.

[6]趙娟,譚延國.化學發光法檢測梅毒抗體的實驗評價[J].中國皮膚性病學雜志,2008,22(10):626-627.

[7]譚延國,張巖,李畸.微粒子化學發光法檢測梅毒抗體的臨床應用[J].中華檢驗醫學雜志,2009,32(l):90-91.

[8]Marangoni A,Moroni A,Accardo S,et al.Laboratory diagnosis of syphilis with automated immunoassays[J].Journal of Clinical LaboratoryAnalysis,2009,23(l):l-6.

[9]李志艷,劉平,高健,等.梅毒螺旋體抗體篩查方法的比較性研究[J].中華檢驗醫學雜志,2012,35(12):1176-1179.

[10]張保平,劉珊,韓艷秋.使用化學發光法檢測26707例血清抗梅毒螺旋體特異性抗體以及結果假陽性率分析[J].現代檢驗醫學雜志, 2015,30(2):70-73.

Measurement threshold of specific antibody of Treponema pallidum and the false positive results by Abbott ARCHITECT i2000SR Immunoassay Analyzer.

SONG Yan,XIAO Jun.
Department of Clinical Laboratory,Aerospace Center Hospital,Beijing 100049,CHINA

ObjectiveTo study the measurement threshold of specific antibody of Treponema pallidum(TP) with chemiluminescent magnetic microparticle immunoassay(CMIA)by Abbott ARCHITECT i2000SR Immunoassay Analyzer,and to analyze the samples with false positive results in CMIA.MethodsA total of 49 720 samples were screened for specific antibody of Treponema pallidum with CMIA by Abbott ARCHITECT i2000SR Immunoassay Analyzer inAerospace Center Hospital from July 2014 to November 2016,and Treponema pallidum particle agglutination assay(TPPA)was used as confirmation method.Results were analyzed with SPSS13.0.ResultsA total of 919 positive samples were screened by CMIA in 49 720 samples,among of which,650 cases of true positive samples and 269 cases of false positive samples were confirmed by TPPA method.True positive rate was 100.0%for patients whose S/CO value of CMIA method was more than 10.The false positive rates were 88.9%and 50.0%in patients less than 20 years old and patients in Department of Obstetrics and Dynecology,respectively,and significant differences were found when compared with other groups.ConclusionCMIA has high sensitivity in the detection of specific antibody of Treponema pallidum,so it can be used as screening method for TP.After CMIA,TPPA is not necessary for patients whose S/CO value is higher than 10,but is necessary for those with S/CO value of 1 to 10.False positive rate is higher in patients from Department of Obstetrics and Gynecology and patients with age less than 20 years old,so more attention should be paid to the test report

Treponema pallidum(TP);Chemiluminescent microparticle immunoassay(CMIA);Treponema pallidum particle agglutination assay(TPPA)

R759.1

A

1003—6350（2017）12—1962—03

2017-01-05)

10.3969/j.issn.1003-6350.2017.12.023

宋燕。E-mail：songyan07@126.com