仙客來種子的無菌培養試驗

李方華

（酒泉職業技術學院生物工程系，甘肅酒泉 735000）

仙客來種子的無菌培養試驗

李方華

（酒泉職業技術學院生物工程系，甘肅酒泉 735000）

本文以仙客來種子為外植體進行無菌培養，研究了硫酸處理、不同溫度的水處理、赤霉素處理對仙客來種子無菌萌發的影響。試驗結果表明，用1moL/L硫酸處理仙客來種子40min和用40℃溫水浸種處理，仙客來種子無菌萌發效果相對較好。

仙客來；種子；組織培養

仙客來（Cyclamen persicum）為報春花科仙客來屬半耐寒多年生球莖類草本植物，花色艷麗，花期約6個月，深受人們喜愛，具有較高的觀賞價值和經濟價值。采用植物組織培養的方法對仙客來進行繁殖能夠保持其優良性狀并具有較高繁殖率［1］，但在組培過程中，種子無菌培養階段存在種子萌發率低的問題，嚴重制約組培快繁。本試驗通過研究不同處理方法對仙客來種子無菌培養的效果，以期尋找較好的解決方法。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

仙客來種子由蘭州昶榮園林有限公司提供。

1.2 試驗方法

A組：用1moL/L硫酸溶液分別浸泡仙客來種子10min、20min、30min、40min、50min、60min，然后撈出種子，用蒸餾水浸種24h；B組：分別用30℃、40℃、50℃、60℃蒸餾水浸種5h，待水溫自然降至室溫后再浸種24h；C組：分別用20mg/kg、50mg/kg、100mg/kg、200mg/kg、300mg/kg、400mg/kg赤霉素溶液浸種24h，然后用蒸餾水清洗數次，再用蒸餾水浸種24h。將各組處理的種子分別用70%酒精浸泡1min，用無菌水沖洗3次，然后用0.1%升汞溶液浸泡并震蕩8min，用無菌水沖洗6次。將處理過的種子用無菌濾紙吸干水分，無菌接種于MS培養基（3%蔗糖、0.5%瓊脂，pH值5.6～5.8）上。每瓶培養基接種3粒種子，培養溫度15～20℃，觀察種子萌發情況。

2 結果與分析

2.1 1moL/L硫酸溶液浸種不同時間對仙客來種子萌發的影響（A組）

由表1可知，用1moL/L硫酸溶液浸泡仙客來種子，處理時間不同，種子的發芽率有所不同，處理40min，仙客來種子發芽率較高，這可能是硫酸處理后仙客來種子增強了透性。

表1 1moL/L硫酸溶液浸種不同時間仙客來種子的發芽率

2.2 不同溫度浸種對仙客來種子萌發的影響（B組）

由表2可知，不同溫度浸種對仙客來種子的萌發影響不同，用40℃溫水浸種效果最好，萌發率達70%，隨著溫度的升高，種子萌發率下降，可能是溫度過高損傷了種胚。

表2 不同溫度浸種仙客來種子的發芽率

2.3 不同濃度赤霉素溶液對仙客來種子萌發的影響（C組）

由表3可知，不同濃度的赤霉素溶液處理對仙客來種子萌發的影響不同，濃度為100mg/kg時，種子萌發效果相對較好，為23%，隨著濃度的升高，種子的萌發率并沒有提高。

表3 不同濃度赤霉素溶液浸種仙客來種子的發芽率

3 小結

仙客來種子種皮較厚，胚根不易突破種皮，在發芽過程中會產生休眠［2］。試驗結果表明，采用一定濃度的硫酸溶液處理和溫水浸種可提高仙客來種子的萌發率，原因可能是處理后消減了種皮對萌發的阻礙；用100mg/kg赤霉素溶液處理也可提高仙客來種子的萌發率，但是效果不夠理想。仙客來種子無菌萌發率不高可能是多方面綜合影響的結果，還需要進一步開展相關試驗進行分析和研究。

［1］余會寧.仙客來的離體無性試管繁殖研究［J］.氨基酸和生物資源，2001，23（3）：21～23。

［2］王娟.仙客來種子萌發的研究［J］.山東農業科技，2007（3）：21.