血清Hcy和Cys-C聯合尿β2-MG檢測對2型糖尿病患者腎損害早期的診斷價值

安 勇

(巨鹿縣人民醫院 檢驗科，河北 邢臺055250)

血清Hcy和Cys-C聯合尿β2-MG檢測對2型糖尿病患者腎損害早期的診斷價值

安 勇

(巨鹿縣人民醫院 檢驗科，河北 邢臺055250)

糖尿病(DM)易引起腎臟損害，早期具有可逆性，嚴重者可導致腎功能衰竭，是導致DM患者死亡主要誘因。臨床研究表明，早期診治可以有效逆轉或降低其腎功能損傷的發生率，延緩疾病的進程，降低病死率、改善患者生活質量等[1]。本文旨在探討血清Hcy和Cys-C聯合檢測尿β2-MG對DM腎損害早期的診斷價值，為糖尿病腎病(DN)的早期診斷提供實驗室依據。

1 資料與方法

1.1一般資料選取2015年3月-2016年9月間在本院腎內科診治144例2型糖尿病(T2DM)患者，根據患者的24 h尿微量白蛋白排泄率(UAER)水平，75例為單純糖尿病患者(單純DM組)，其中男51例，女23例，平均年齡(57.9±10.1)歲，病程(1-20年)。UAER≤30 mg/24 h，排除腦卒中、合并有腎炎、尿路感染、原發性高血壓等其他疾病以及使用腎毒性藥物引起腎損傷的患者。69例為DN早期(早期DN組)，其中男49例，女20例，平均年齡(55.2±11.2)歲，病程(2-18年)。UAER為30-300 mg/24 h，排除1型DM、中晚期DN、惡性腫瘤、心力衰竭等疾病和其他急慢性腎臟疾病以及嚴重肝臟、原發性和藥物性引起腎損傷的患者。以上T2DM患者的病情符合美國糖尿病協會《2010年ADA糖尿病診療指南》的診斷標準[2]。同期選擇在本院進行健康體檢者72例(對照組),其中男50例、女22例,平均年齡(57.1±10.8)歲。經體格和實驗室檢查，健康體檢者的重要器官(心、肝、腎等)功能、生化指標(血糖、尿蛋白、尿糖)以及UAER水平正常，且無DM、高血壓病、腎臟疾病以及其它內分泌疾病。以上研究對象均自愿參加并簽知情同意書，本研究獲得本院醫學倫理委員會批準。三組的年齡分布、性別構成等方面經統計學分析(P>0.05),具有可比性。

1.2方法次日清晨空腹(禁食12 h以上)抽取肘靜脈血3 ml。同時收集24 h尿液并測量總量，量取5 ml。靜脈血和24 h尿按常規方法以3 500 r/min，離心10 min。儀器為日立7600-020全自動生化分析儀。采用循環酶法檢測Hcy水平，采用膠乳免疫比濁法檢測Cys-C水平及尿液上清液β2-MG、mALB水平，計算UAER,公式UAER=mALB[mg/ml×24 h尿量(ml)]。Hcy檢測試劑由四川新健康成生物股份有限公司提供，Cys-C、Uβ2-MG和mALB檢測試劑由北京百奧泰康生物技術有限公司提供。

1.3判斷標準所用正常參考區間為本實驗室近年來對200例正常健康人群檢測資料分析結果。Hcy<25 μmol/L為正常；Cys-C≤1.11 mg/L為正常；Uβ2-MG為0.03-0.14 mg/L為正常。單項檢測時，結果超過參考區間的上限值即判定陽性。聯合檢測時，檢測項目中只要其中二項或二項以上指標超過參考區間的上限值，即判定樣本為陽性，反之則樣本為陰性。

2 結果

2.13組血清Hcy、Cys-C、Uβ2-MG和UAER結果比較單純DM組Hcy、Cys-C和Uβ2-MG檢測水平高于對照組(P<0.05)，UAER略高于正常組(P>0.05)，早期DN組Hcy、Cys-C、Uβ2-MG和UAER檢測水平均顯著高于對照組和單純DM組(P<0.01或P<0.05)。見表1。

2.2血清Hcy、Cys-C、Uβ2-MG與UAER相關性分析多因素線性相關分析顯示 Hcy、Cys-C、Uβ2-MG與UAER均呈正相關(r=0.912，P<0.05，r=0.871，P<0.01，r=0.882，P<0.05)。Hcy與Cys-C、Uβ2-MG變量間呈顯著正相關(r=0.753，0.631，P<0.05)，Cys-C與Uβ2-MG變量間呈正相關(r=0.832，P<0.01)。

表1 3組血清Hcy、Cys-C、Uβ2-MG和UAER結果比較

注：與對照組比較，aP<0.05。與單純DM組比較，cP<0.01或dP<0.05。

2.3血清Hcy、Cys-C、Uβ2-MG單檢或聯檢對DM患者腎損害早期診斷效率比較三項聯合檢測的特異性(61.3%)低于三項單項指標檢測(69.3%,81.3%,76.0%)，比較差異無統計學意義(χ2分別為0.490，2.805,1.574，P均>0.05)；敏感性(94.2%)明顯高于三項單項指標檢測(62.3%,68.1%,65.2%)，比較差異有統計學意義(χ2分別為6.502,4.197,5.276,P均<0.05)，見表2。

表2 3項指標單項及聯合檢測患者腎損害早期診斷效率比較 (%)

注：與單項比較，aP<0.05，bP>0.05。

3 討論

DM發病率呈逐年上升趨勢,與人們飲食結構變化以及DM的治療方法改善密切相關。DN是DM治療過程中最為普遍的和常見的嚴重微血管慢性并發癥之一，腎損害可阻礙體內代謝物從腎臟排出[3]。腎損害早期可減少腎小球基底膜上帶負電荷的成分，降低腎小球濾過膜電荷選擇性，致腎小球基底膜濾過屏障障礙，使mALb濾過率增加，當超過腎小管重吸收閾值時，患者的腎功能呈進行性下降，使mAlb可明顯升高，持續性mAlb是目前臨床DM引起腎小球損傷的重要標志[4]。即標志腎功能已開始惡化，預示患者的腎損害已無法逆轉，已引起臨床醫務工作者的高度重視。DM患者腎損害的早期診斷，對于DM腎損害的治療非常關鍵，可阻止DM進一步發展，亦是改善DM患者預后及提高生活質量的關鍵。因此，篩選腎損害早期評估指標對DM患者腎功能損害的早期治療和預防具有重要意義。

Hcy是蛋氨酸和半胱氨酸代謝過程中的一個重要中間產物(含硫的非必需氨基酸)，并不參與蛋白質的合成，但其水平的高低與心腦血管疾病的發生發展有著極其密切的聯系。亦是DM和DN的一個獨立危險因素[5]，其易氧化成過氧化氫和超氧化物，進入血液循環可降低血管內皮細胞自由基清除系統，引起大量的自由基產生致腎臟微血管內皮細胞損傷，使細胞膜的完整性遭到破壞而導致腎小球功能受損，導致腎功能減退。腎臟是Hcy合成代謝的主要場所，無論是腎小球濾過功能下降，還是腎小管上皮細胞代謝功能異常均可直接影響Hcy在血液中水平[6]。Cys-C是一種低分子堿性非糖化的蛋白，由機體內有核細胞以恒定速率產生釋放人血，參與調節細胞內肽和蛋白質的代謝。血液中的Cys-C通過腎小球濾膜濾過后絕大部分在近曲小管被重吸收，尿液排出量極少。腎前因素幾乎影響血清Cys-C水平，但與腎小球濾過率呈明顯的負相關[7]。當腎小球有輕微損傷時，血中Cys-C水平迅速升高，并隨病情加重而逐漸增高，是臨床目前公認反映腎小球濾過功能受損的早期敏感內源性標志物[8]。β2-MG是一種小分子球蛋白，由淋巴細胞、血小板等細胞產生。能自由經腎小球濾過，99.9%被腎近曲小管重吸收，最后由腎小管內皮細胞降解為氨基酸。正常情況下，經腎臟排出極為微量，當腎小球濾過功能受損或濾過負荷增加時，致β2-MG血清水平升高。尿液中β2-MG排出增加，說明濾過負荷增加或腎小管功能損害，是目前臨床反映腎小球的濾過功能、腎小球病變早期診斷的敏感重要實驗室指標之一[9]。

本研究結果顯示，單純DM組Hcy、Cys-C和Uβ2-MG檢測水平高于對照組(P<0.05)，UAER高于正常組(P>0.05)，早期DN組Hcy、Cys-C、Uβ2-MG和UAER檢測水平均顯著高于對照組和單純DM組(P<0.01或P<0.05)。說明Hcy、Cys-C和Uβ2-MG與DM病變進程密切相關，且隨著腎損傷加重而逐步升高，可作為DM進程中重要檢測指標。DM患者進行Hcy、Cys-C和Uβ2-MG和UAER檢測，可及時發現DM患者腎損傷情況，為動態監測DM腎損害的發生發展、早期診斷提供實驗室依據。

由于DM患者機體長期受多重代謝紊亂以及持續高血糖的影響，全身組織器官特別是腎、心血管及神經系統的損害及其功能障礙和衰竭，引起組織器官的嚴重損傷以及各種急慢性并發癥已成為DM患者致殘、致死的主要原因[10]。隨著臨床檢驗技術的不斷發展，血清與尿液指標聯合檢測已逐步成為DM腎病早期發現的重要手段，通過多樣化的多項指標聯檢綜合評價DM的發生和進展，可提高DM腎損害早期診斷的準確性[11]。本研究通過對血液和尿液中的多項指標檢測，綜合分析DM早期腎損害。研究結果顯示，Hcy、Cys-C、Uβ2-MG與UAER均呈正相關(r=0.912，P<0.05，r=0.871，P<0.01，r=0.882，P<0.05)。Hcy與Cys-C、Uβ2-MG變量間呈顯著正相關(r=0.753，0.631，P<0.05)，Cys-C與Uβ2-MG變量間呈正相關(r=0.832，P<0.01)，與文獻報道一致。說明Hcy、Cys-C和尿β2-MG指標與UAER的相關較好，3指標檢測水平變化可反映DM患者的腎小球和腎小管已發生不同程度損傷。對DM患者腎損害早期診斷效率， 三項聯合檢測的特異性(61.3%)低于三項單項指標檢測(69.3%,81.3%,76.0%)，比較差異無統計學意義(χ2分別為0.490，2.805,1.574，P均>0.05)；敏感性(94.2%)明顯高于三項單項指標檢測(62.3%,68.1%,65.2%)，比較差異有統計學意義(χ2分別為6.502,4.197,5.276,P均<0.05)，提示對DM患者來講，在臨床未出現大量蛋白尿之前，檢測Hcy、Cys-C和Uβ2-MG水平可更準確、更客觀地評估DM腎損害發生發展情況，提高臨床腎損害早期診斷的敏感性，幫助基層醫生制定合理的治療及干預措施，促進腎臟功能的恢復有較高的臨床應用價值。

綜上所述，在DM腎損害早期Hcy、Cys-C和Uβ2-MG水平均會升高，是輔助診斷DM患者腎損害早期較為敏感的指標，聯合檢測可提高DM患者腎損害早期診斷的敏感性，減少誤診，為糖尿病腎病早期診治、病情監測提供可靠的實驗室依據。

[1]劉國勝,武軍駐.尿β2-MG、α1-MG、IgG和Cys-C聯合檢測對糖尿病患者早期腎損害的診斷價值[J].湖北民族學院學報·醫學版,2016,33(2)：40.

[2]美國糖尿病協會.2010年ADA糖尿病診療指南[M].糖尿病天地·臨床刊,2010,4(2)：56.

[3]張 弘.尿mALB、α1-MG、NAG及血清hs-CRP聯合檢測對糖尿病腎病早期診斷的意義[J].檢驗與轉化醫學,2016,3(2):54.

[4]高建萍,侯 玲,劉 韌,等.血清Lp(a)、Hcy聯合Cys-C檢測在糖尿病腎病輔助診斷中的價值探討[J].醫藥前沿,2015,5(18):374.

[5]王寒嘯.血漿同型半胱氨酸與糖尿病腎病發生發展過程相關性研究[J].廣西中醫 藥大學學報,2014,17(1):51.

[6]Li J, Shi M, Zhang H, et al. Relation of homocysteine to early nephropathy in patients with type 2 diabetes[J].Clin Nephrol, 2012, 77(4):305.

[7]段紅艷,譚鳳姣.血清Cys-C和Hcy聯合檢測對2型糖尿病腎病早期診斷的價值及其與氧化應激的關系[J].海南醫學院學報,2015,21(5):657.

[8]Jeon YL, Kin MH, Lee WI, et al. Cystain C as an early marker of diabetic nephropathy in patients with type 2 diabetes[J].Clin Lab, 2013, 59(11-12):1221.

[9]吳鳳麗,馬曉光.聯合檢測血清CysC、血清hsCRP和尿β2-MG在2型糖尿病早期腎病中的診斷價值[J].中國實驗診斷學，2014, 18(5):778.

[10]代 廣,王東海,陳 強.CysC和β2-MG在2型糖尿病腎病早期中診斷的診斷價值[J].中國醫藥科學,2016, 6(16):173.

[11]李蔚勃,劉 亞,李喆穎.同型半胱氨酸和轉鐵蛋白及N-乙酸-β-D-葡萄糖苷酶聯合檢測對糖尿病腎病的診斷價值[J].中國慢性病預防與控制,2016,24(10):781.

1007-4287(2017)12-2162-03

安勇(1983-), 男, 主管檢驗師, 主要從事臨床檢驗、生化和免疫工作。

2017-02-15)