杜小華
視黃醇結合蛋白作為血漿中的小分子蛋白,具有能從肝細胞轉運視黃醇的功能,在維生素代謝中具有重要作用。近年來,視黃醇結合蛋白檢測及應用備受關注,不但能準確診斷機體營養、腎臟等疾病,還能提高治療結果。
比濁法是于1959年提出的,所形成的濁度,能從某種程度上減少光線量,光線吸收量、復合物形成量呈現正相關,根據吸收光度來推算抗原量。使用該方法檢測視黃醇結合蛋白,具有操作簡便、結果準確的優勢,在腎臟疾病的診斷中具有重要作用。但是,該方法對抗體特異性、純度有著較高要求。
該檢測方法是以未標記反應體系中的抗原競爭抗體、放射性核素標記抗原為原理,對樣品抗原進行測定的方法。使用該方法測定視黃醇結合蛋白,不但有著較高的靈敏度,還有著良好的特異性、精密度。但是,由于放射危害和污染,核素半衰期短,自動化分析差等因素影響,近年逐漸被其他方法取代[1]。
該方法的基本原理是:在不破壞免疫活性的情況下,將抗體、抗原結合到某載體表面。實際測定中,通常將檢測樣品和抗原、抗體在某種程序下進行結合,從而形成復合物。反應終止期間,載體上的抗體、抗原多被量化成一定的比例,經由針對性洗滌后,將反應液中的其他物質去除,待反應底物加入后,底物會被催化成有色物,通過定量、定性分析有色物,最終明確樣品物質量。從臨床實踐看,該方法具有靈敏度高、重復性好、操作簡便的優勢,故而,被臨床廣泛使用。
所謂的免疫電泳是免疫雙擴散、區帶電泳相結合的方法,具有操作簡便、無需濃縮尿液、結果直觀的優勢。但是,該方法也有時間長、無法自動分析的缺點。
由于視黃醇結合蛋白是由肝細胞內質網合成的,因此,在腎功能正常時,血清中的視黃醇結合蛋白水平和肝細胞功能呈現正相關。報告顯示[2],通過對急性病毒性肝炎患者進行視黃醇結合蛋白水平、谷草轉氨酶進行分析發現,視黃醇結合蛋白和谷草轉氨酶呈現負相關,說明:患者視黃醇結合蛋白水平能真實的反映肝功能。
視黃醇結合蛋白參與著視黃醇的轉運活動,故而,該指標在體內的變化和其密切相關。一般情況下,視黃醇結合蛋白含量是不會變化的。但是,在視黃醇結合蛋白缺乏時,極易改變機體循環中的視黃醇結合蛋白水平。通過對正常人、消化系統疾病患者的視黃醇結合蛋白水平進行分析發現,除極少數患者腹瀉外,其余患者的視黃醇結合蛋白水平均少于正常人。另外,通過對視黃醇結合蛋白、維生素A適應關系進行分析發現,視黃醇結合蛋白、維生素A系數為0.875,當體內視黃醇結合蛋白低于正常水平的一半后,患者才會出現適應力降低的現象,由此可見,視黃醇結合蛋白含量能更好反映維生素A水平[3-4]。
視黃醇結合蛋白的分子量過低,通常為21 000,能自由經腎小球過濾,且多數能被腎小管細胞吸收[5]。故而,在正常情況下,視黃醇結合蛋白水平會維持在穩定范圍,而尿中的含量則比較少。調查報告顯示[4],通過對溫度、pH值對病理及正常狀況下的視黃醇結合蛋白、微球蛋白進行分析發現,在室溫處于4℃時,正?;虍惓D蛞褐械囊朁S醇結合蛋白水平比較穩定,該現象說明:和微球蛋白相比,視黃醇結合蛋白能真實的反映腎功能指標。
在胃癌患者中,視黃醇結合蛋白水平比較高,其中,視黃醇結合蛋白陽性率在胃癌、腸腺化生患者中分別為67.5%、40.5%。并且,高度分化胃癌陽性率為86.5%,低度分化胃癌陽性率為48.0%,說明:視黃醇結合蛋白陽性率在胃腸疾病診斷中具有重要作用[6-8]。
慢阻肺患者的視黃醇結合蛋白水平不但和疾病類型關系密切,還和疾病發展呈現正相關。在呼吸衰竭患者其他指標均正常的情況下,視黃醇結合蛋白水平降低,而尿中水平升高,特別是伴發心力衰竭時,視黃醇結合蛋白水平變化更為明顯。
綜上,視黃醇結合蛋白是臨床檢測指標之一,近年被廣泛用于各疾病診斷中,特別是肝腎功能疾病。當前,臨床已有各種方法用于視黃醇結合蛋白的檢測中,其中,放射免疫法、酶聯免疫吸附法具有實用性強、靈敏度高的優勢。但是,放射免疫法價格高,且存在各種防護問題,國內多不使用;比濁法價格低廉,能使用自動分析儀定量測定,但該方法對抗體有著較高要求。針對視黃醇結合蛋白的臨床應用,尚存在諸多不明確地方,需臨床進一步研究。
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