揚州地區煙粉虱生物型檢測及發生動態

劉曉娜+杜以梅+杜予州

摘要：連續2年檢測揚州地區煙粉虱生物型，并對其危害程度和發生動態進行系統調查，以期為揚州地區煙粉虱的防治提供依據。利用細胞色素氧化酶I（cytochrome axidase I，簡稱COI）分子標記檢測揚州地區煙粉虱的生物型，采用定時定點的方法調查煙粉虱的危害程度和發生動態。結果表明，2014年和2015年揚州地區發生的煙粉虱均為Q型；煙粉虱從6月初到11月初在主要蔬菜上的危害等級一直保持在4級，在其他時間的危害程度不高。2014年揚州地區大棚蔬菜上的煙粉虱始見于4月上旬，消亡期為12月下旬，在7月下旬有1個危害高峰；2015年煙粉虱始見期為4月中下旬，到11月底仍有煙粉虱危害，其間有2個危害高峰，分別在5月底至6月初和7月底至8月中旬。2014年揚州地區煙粉虱的發生危害及蟲口密度高于2015年，其發生的蟲口密度在不同年份之間有波動，而且在不同的月份之間也存在差異。

關鍵詞：煙粉虱；生物型；危害程度；發生動態；揚州市

中圖分類號： S433.39文獻標志碼： A文章編號：1002-1302（2017）23-0100-03

該蟲為多食性害蟲，寄主范圍廣，寄主適應性強，在熱帶、亞熱帶和溫帶地區一年發生11～15代，具有世代重疊的特性。煙粉虱可以在溫暖地區的野外雜草和花卉上越冬，但在寒冷地區的煙粉虱則主要在保護地作物上越冬。煙粉虱是一類快速進化的復合種，其中B型煙粉虱（也稱Middle East-Asia 1）和Q型煙粉虱（Mediterranean）在全球范圍內危害較為嚴重，入侵性也最強[1-2]。2001年在揚州地區首次發現B型煙粉虱，隨后在江蘇地區迅速擴散危害，造成嚴重的經濟損失[3]。但2005年在江蘇省發現Q型煙粉虱后，Q型煙粉虱的種群數量逐年增加，而B型煙粉虱的種群數量卻逐年遞減，到2010年Q型煙粉虱已成為優勢種[4]。孫偉等連續多年對江蘇省范圍內煙粉虱的發生危害進行調查發現，煙粉虱的發生危害不僅在不同年份之間存在波動，而且在不同地區之間也存在著顯著差異[5-6]。為進一步了解和掌握揚州地區煙粉虱生物型及全年的發生危害動態，于2014、2015年對揚州不同地區煙粉虱的生物型進行檢測，并以揚州蔣王蔬菜基地作為系統調查點，對煙粉虱在其主要嗜好寄主植物上的發生危害動態做詳細的調查，以期為揚州地區煙粉虱綜合防治提供科學依據。

1材料與方法

1.1揚州地區煙粉虱生物型檢測

1.1.1材料供試蟲源：于2014、2015年在揚州市邗江區、廣陵區、江都區、高郵市、儀征市、寶應縣的番茄（Lycopersicon esculentum）、黃瓜（Cucumis sativus）、辣椒（Capsicum annuum）、茄子（Solanum melongena）等主要蔬菜和過渡寄主葎草（Humulus scandens）上采集煙粉虱成蟲。將采集到的樣本浸泡于裝有無水乙醇的1.5 mL Eppendorf管中，于-20 ℃條件下保存。

主要試劑有蛋白酶K、rTaq DNA聚合酶、10×Buffer，購自寶生物工程（大連）有限公司；dNTPs，購自中美泰和生物技術（北京）有限公司。

1.1.2方法采用細胞色素氧化酶I（cytochrome axidase I，簡稱COI）分子標記快速檢測法，該方法引用福建省農業科學院植物保護研究所申請的專利201110413571《煙粉虱生物B型和Q型特異性引物和快速鑒定方法》。這個專利主要針對B型和Q型分別設計了2對特異性引物，構建了一套適合煙粉虱生物型快速鑒定的雙引物PCR擴增體系。該方法可以快速鑒定田間外來入侵煙粉虱的生物型。若該方法不能檢測出煙粉虱樣本的生物型，筆者采用通用引物，即上游引物 C1-J-2195（5′-TTGATTTTTTGGTCATCCAGAAGT-3′）和下游引物L2-N-3014（5′-TCCAATGCACTAATCTGCCATA

TTA-3′）對煙粉虱mtDNA COI基因進行擴增并送中美泰和生物技術有限公司測序，將測序結果進行Blast比對分析，確定其生物型。本研究共檢測揚州地區288個樣本。

1.2揚州地區煙粉虱危害程度及發生動態調查

于每年2月開始定期對揚州市蔣王蔬菜基地的番茄、茄子、辣椒進行系統調查，每7 d調查1次。對不同的寄主均采用“Z”字形5點采樣，每點隨機調查5株，每株分別摘取上、中、下3張葉片，將不同寄主的葉片放入不同的袋子中帶回實驗室進行鏡檢，記錄每張葉片中煙粉虱卵、若蟲和偽蛹的數量以及葉面積，然后折算成單位葉面積的蟲口密度并劃分危害等級。具體方法：（1）將煙粉虱的危害程度劃分為5級。（2）設定1個標準葉面積為10 cm2。調查時，將調查葉片的平均葉面積換算為標準葉面積。（3）以1個標準葉面積上的平均煙粉虱數量（卵、若蟲和偽蛹的總數量）為分級單位，即蟲量（頭）/標準葉面積。（4）分級標準[平均蟲量（頭）/標準葉面積（10 cm2）]：0級為無蟲，1級≤1頭/10 cm2，2級為2～3頭/10 cm2，3級為 4～6頭/10 cm2，4級≥7頭/10 cm2，分別記為“-”“+”“++”“+++”“++++”。

2結果與分析

2.1揚州地區煙粉虱生物型檢測

連續2年對揚州市邗江區、廣陵區、江都區、高郵市、儀征市、寶應縣蔬菜基地不同寄主植物上的煙粉虱進行生物型檢測。結果表明，揚州地區主要蔬菜和過渡寄主葎草上的煙粉虱均為Q型煙粉虱，沒有發現B型煙粉虱（表1）。這表明揚州地區主要蔬菜上的B型煙粉虱已被Q型所取代。

2.2揚州地區煙粉虱的發生危害程度

2014年的調查數據表明，揚州地區煙粉虱4月初開始在番茄上出現，至5月初危害較輕，危害程度一直保持在1級；5月中旬危害開始逐漸加重，危害程度上升至2級，5月下旬后危害程度升至4級，其危害在7月中旬達到高峰，與蔡力等2013年的調查結果[7]相比提前40 d左右，此間主要種植的蔬菜有番茄、茄子和黃瓜等；從5月下旬至10月底，煙粉虱在番茄、茄子、黃瓜等主要蔬菜上的危害程度一直維持在4級水平；從11月初開始，煙粉虱的危害程度開始下降，此時已開始種植下一季番茄，11月10日左右危害程度降為3級，到11月末煙粉虱的危害程度降到1級，直到12月中旬調查結束。endprint

2015年的調查數據表明，煙粉虱從4月中下旬開始在番茄上發生，較2014年發生晚，直到5月中旬，危害程度一直處在1級；5月中下旬危害程度開始上升至2級，此時寄主蔬菜主要以番茄為主；從5月下旬開始，煙粉虱的危害程度迅速上升至4級，直到10月初，此時除了種植番茄以外還有黃瓜、茄子等蔬菜；從10月中旬開始危害程度降為3級，此時大棚里主要種植的是茄子、豇豆等蔬菜；此后到12月初，煙粉虱主要轉至十字花科蔬菜危害，其危害程度較輕，危害級別為1級。

從揚州地區2014年和2015年的調查數據可以看出，煙粉虱在番茄、茄子、黃瓜等主要蔬菜上的危害程度趨勢基本一致，但2015年較2014年發生晚，發生危害程度略輕。

2.3揚州地區煙粉虱的發生動態

2014年的調查結果表明，從4月3日發現煙粉虱到5月中下旬，在葉片上的蟲口密度一直很低，為0.03～0.15頭/cm2；從5月底開始，煙粉虱的蟲口密度開始增加，為 0.83頭/cm2 左右；在6月20日至7月24日的1個月時間里，蟲口密度由4.09頭/cm2迅速增長為30.68頭/cm2，達到危害最高峰，此間田間主要種植茄子；隨后蟲口密度迅速下降，到8月9日蟲口密度降至3.64頭/cm2；此后煙粉虱的蟲口密度除了在10月27日有小幅度的增長外，一直維持在較低水平，為0～0.59頭/cm2，直到調查結束（圖1）。

2015年的調查數據表明，4月18日開始發現煙粉虱危害番茄，直到5月22日，葉片上的蟲口密度一直不高，在 0.02～0.36頭/cm2之間；到5月下旬至6月初，發生危害形成1個小高峰，其蟲口密度在6月6日達到4.11頭/cm2，此時田間主要種植番茄；6月中旬番茄收獲，主要寄主更換為黃瓜，蟲口密度有所下降，6月12日的蟲口密度為 1.08頭/cm2。隨后20 d左右的時間，蟲口密度沒有大幅變化，在2.35～2.77頭/cm2；7月10日蟲口密度達到1個月之內的最小值為0.75頭/cm2；7月中旬以后，煙粉虱的危害加重，蟲口密度快速上升，8月7日達到最高峰，蟲口密度為1472頭/cm2；隨后，蟲口密度迅速下降，到8月28日蟲口密度降到2.77頭/cm2，之后的蟲口密度逐漸下降，此間煙粉虱的寄主蔬菜主要是茄子；在10月30日茄子收獲后，大多數煙粉虱轉到在十字花科蔬菜上危害，但數量很少（圖2）。

從調查的數據可以看出，2014年揚州地區煙粉虱危害高峰期的蟲口密度明顯高于2015年的，是2015年的2倍多；2014年煙粉虱只出現了1個明顯的危害高峰，而2015年則出現了2個危害高峰，1個危害高峰期在5月底至6月初，另1個危害高峰期在7月底至8月中旬， 出現的時間和2014年

基本一致。

3討論

2001年，在揚州儀征花卉生產基地的一品紅上首次發現B型煙粉虱，這也是江蘇省的首例[3]，隨后其不斷的擴散，給農業生產造成了嚴重的損失。2005年江蘇省檢測到Q型煙粉虱，此后Q型煙粉虱的種群數量逐年遞增，而B型煙粉虱卻逐年遞減[4]。2008—2013年揚州地區都未檢測到B型煙粉虱[7]，2014—2015年的檢測結果也同樣如此。短短幾年的時間，揚州地區B型煙粉虱完全被Q型煙粉虱所取代，可能的原因有：（1）Q型煙粉虱有更強的寄主適應性，雜草是Q型煙粉虱的主要寄主，這一點在調查中也有體現[8-9]；（2）有研究報道，Q型煙粉虱對新煙堿類農藥有更強的抗性[10]；（3）可能與揚州地區蔬菜種植布局及品種有關。由于目前揚州地區煙粉虱都為Q型，它對新煙堿類農藥更有抗性，所以在對其進行化學防治時，應注意不同藥劑之間合理的混用輪用，以延緩抗性產生。

調查結果表明，2014、2015年揚州地區煙粉虱的危害動態大體一致，5月中旬之前危害程度一直為1級，從6月初到11月初一直保持4級的危害程度，這與孫偉等的調查結果[5，11]一致。通過2年的種群動態調查可以看出，2014年揚州地區煙粉虱危害高峰期的蟲口密度明顯高于2015年，是2015年的2倍多；2014年在揚州蔣王蔬菜基地的煙粉虱只出現了1個危害高峰，而2015年則出現了2個危害高峰，這可能與揚州地區這2年的天氣（溫度、濕度、降水和風等）和寄主蔬菜的生長狀況等因素有關。因為溫度、濕度可以影響煙粉虱的生長發育、存活和繁殖[12-13]，也可以影響寄主蔬菜的生長狀況，從而影響煙粉虱的發生動態。而2014年揚州地區早春的平均氣溫高于2015年，有利于煙粉虱的發生危害。揚州地區2015年的降水量明顯高于2014年，且在4月中旬、5月中旬至7月中旬以及8月上旬出現多個持續降水天氣，這一天氣條件不利于煙粉虱發生危害。此外，由于揚州蔣王蔬菜基地溫室設施老舊，防雨、保溫、保濕的效果較差，而2015年雨水較多，寄主蔬菜受澇害較重，長勢較差。這些因素導致2014年煙粉虱的發生危害和蟲口密度明顯高于2015年。

值得注意的是，煙粉虱在-2 ℃以下時開始出現死亡，隨著溫度的下降和處理時間的延長，煙粉虱的死亡率迅速上升，-6 ℃時煙粉虱處理7 h以上全部死亡[12]。而在揚州地區，最低氣溫是要低于煙粉虱致死溫度的，且持續時間較長，故在揚州地區煙粉虱只能在溫室中越冬，不能在野外越冬。因此，在防治溫室大棚內的煙粉虱時，要注意保持棚內空氣流通，適當掀開大棚的薄膜以降低棚內溫度，有效地抑制煙粉虱的生長繁殖。通過調查發現，在寄主輪換時煙粉虱數量驟減，而在蔣王地區作物的種植是沒有間隔期的，這就導致煙粉虱種群數量驟減后又迅速增長。因此，在煙粉虱的防治工作中，要注意徹底清理殘枝落葉，減少危害下一茬作物的蟲源基數，適當調整作物種植間隔期。

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