抗苗勒氏管激素和性激素評價卵巢儲備功能的臨床應用*

何彩華，曾祥興△，劉偉國

(河源市婦幼保健院：1.檢驗科；2.婦科，廣東河源 517000)

卵巢儲備功能是生育期女性能否正常生育的重要影響因素，特別是在當前優生優育的大背景下，準確評價卵巢儲備功能有利于更好地指導和安排孕育計劃?？箍娎帐瞎芗に?AMH)和性激素是目前臨床上評價卵巢儲備功能常用的指標。AMH是由兩個相同的亞基通過二硫鍵連接成的二聚糖蛋白，是轉化生長因子β(TGF-β)超家族成員之一。在女性中，AMH僅在卵巢顆粒細胞中表達[1]。性激素6項主要包括卵泡生成激素(FSH)、黃體生成素(LH)、雌二醇(E2)、孕酮(PROG)、泌乳素(PRL)及睪酮(TEST)。本研究通過對806例同時接受AMH和性激素6項檢測的孕前保健女性進行研究，探討AMH和性激素6項在評價卵巢儲備功能中的臨床應用價值。

1 資料與方法

1.1一般資料 2016年10月至2017年12月在本院婦科門診、女性保健科門診、生殖內分泌?？崎T診進行孕前檢查的育齡期女性806例，年齡19～47歲。所選取病例應同時進行血清AMH水平和性激素水平檢測，月經周期規則(周期為21～35 d)，并且無甲狀腺功能減低等影響月經的內分泌疾病，近3個月均無任何激素類藥物治療史，既往無子宮附件手術史。將納入研究的806例孕前檢查的育齡女性按年齡階段分為5組(<25、25～<30、30～<35、35～<40、≥40歲)；根據FSH/LH再將納入研究的806例育齡女性分為4組(FSH/LH≤1為A組；13為D組)。所有研究對象均自愿參與本研究，并簽署知情同意書，本研究獲得本院倫理委員會批準。

1.2方法 患者均在月經周期第2～3天靜脈采集血液標本6 mL(干燥管兩支，一支進行性激素檢測，一支進行AMH檢測)，室溫靜置60 min后，3 500 r/min速度離心10 min，分離血清后4 ℃保存，24 h內完成性激素6項檢測，1周內完成AMH檢測。血清AMH檢測采用酶聯免疫吸附試驗(ELISA法)，試劑盒購于廣州市康潤生物科技有限公司，試劑檢測線性范圍為0.06～18.00 ng/mL，相關系數(r)≥0.99，批內變異系數(CV)≤10%，批間CV≤15%。采用深圳雷杜生命科學股份有限公司RT-6000酶標儀檢測。實驗步驟均嚴格按試劑盒及儀器說明書操作。

性激素6項檢測包括FSH、LH、E2、PROG、TEST及PRL，采用化學發光法檢測，UniCel DxI 800免疫分析系統和配套試劑盒均購于美國Beckman Coulter公司，其中FSH檢測線性范圍為1.18～187.12 mIU/mL，r≥0.98，批內CV≤5%，批間CV≤6%；LH檢測線性范圍為0.70～85.97 mIU/mL，r≥0.97，批內CV≤6%，批間CV≤7%；E2檢測線性范圍為23.4～4 542.3 pg/mL，r≥0.98，批內CV≤5%，批間CV≤6%；PROG檢測線性范圍為0.39～30.41 ng/mL，r≥0.978，批內CV≤10%，批間CV≤10%；PRL檢測范圍為0.62～75.74 ng/mL，r≥0.99，批內CV≤3%，批間CV≤7%；TEST檢測線性范圍為0.11～14.81 ng/mL，r≥0.98，批內CV≤5%，批間CV≤6%；實驗步驟均嚴格按照試劑盒及儀器說明書操作。

2 結 果

2.1各年齡組女性血清AMH和性激素水平比較 AMH血清水平隨年齡的增長呈現下降趨勢，各年齡組間女性血清AMH水平比較，差異有統計學意義(P<0.05)。各年齡組間女性性激素血清水平，除E2和PROG外，其他4項差異均有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 各年齡組女性血清AMH和性激素水平

表2 各年齡組女性AMH≤1.1 ng/mL和AMH≥7.0 ng/mL的分布情況

表3 不同FSH/LH女性的AMH及性激素水平比較

2.2各年齡組女性AMH≤1.1 ng/mL和AMH≥7.0 ng/mL的分布情況 所有受檢者中AMH≤1.1 ng/mL的病例占18.11%，隨年齡增長，所占構成比逐漸增加，組間比較差異有統計學意義(P<0.05)。所有受檢者中 AMH≥7.0 ng/mL的病例占24.07%，隨年齡增長，所占構成比逐漸減少，其中≥40 歲年齡組中未見AMH≥7.0 ng/mL的病例，各年齡組間比較差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。

2.3不同FSH/LH女性的AMH及性激素水平比較 隨著FSH/LH的升高，FSH血清水平升高，AMH、LH、E2、PROG、PRL、TEST水平均降低，不同FSH/LH組間比較，差異均有統計學意義(P<0.05)。見表3。

3 討 論

育齡期是卵巢功能成熟的時期，也是生殖、內分泌疾病高發，以及輔助生殖技術高需求的階段，準確評估育齡期女性的卵巢功能對臨床醫師的診療有重要價值。如何更早、更準確地評價育齡期女性卵巢功能是臨床工作中非常重要的任務。目前，主要從影像學、內分泌學和年齡等方面去評價卵巢功能。但是，由于方法學上的局限性各種方法預測效果仍不理想[1-2]。

研究證實，AMH在次級卵泡、竇卵泡和直徑<4 mm 的竇狀卵泡的顆粒細胞中表達量最高，在直徑 4 mm及以上的卵泡中表達量逐漸降低，直至不表達[3]。本研究顯示<25歲育齡期女性AMH水平維持在一個比較高的水平，25～<30、30～<35歲有一個較大的下降幅度，但是在25～<30歲時的下降幅度則較小，≥40歲育齡女性的AMH血清水平則極低，可見，各年齡組女性血清AMH水平隨年齡的增長呈現下降趨勢(P<0.05)。近年來研究顯示，AMH在評估卵巢早衰和多囊卵巢綜合征(PCOS)方面具有較為明顯的優勢[1]。有研究顯示，AMH>5 ng/mL對于PCOS具有較高的診斷價值[4]。另有研究顯示AMH>7.0 ng/mL診斷PCOS更加敏感[5]。本研究顯示所有受檢者中AMH≥7.0 ng/mL的病例構成比隨年齡增長而逐漸減少。據此推測，本地區中低年齡段育齡女性中PCOS發病率則更高，但仍然需要擴大標本量進一步研究加以明確。關于AMH診斷PCOS的閾值尚未達成一致，因此仍需要排除各種混雜因素進行深入研究。PCOS是育齡女性常見的疾病之一，PCOS在臨床上表現出較明顯的異質性，給該疾病的診治帶來了一定的困難。有研究顯示AMH水平≤1.1 ng/mL是評價卵巢儲備功能降低的重要指標之一[6]。本研究顯示所有受檢者中AMH≤1.1 ng/mL的病例占18.11%，隨年齡增長所占構成比逐漸增加，各年齡組間比較，差異有統計學意義(P<0.05)。據此推測，本地區中高年齡段女性中卵巢儲備功能降低發病率則更高。提示女性應該根據自身情況評價自身卵巢功能。

FSH/LH也是臨床上較常用的指標之一。在卵泡發育過程中，FSH和LH發揮著協同作用[7-8]。本研究顯示隨著FSH/LH的升高，FSH血清水平升高，AMH、LH、E2、PROG、PRL、TEST水平均降低，不同FSH/LH組間比較，差異均有統計學意義(P<0.05)?？梢奆SH/LH和AMH血清水平具有類似的提示效應。卵巢在正常生理狀態下能分泌抑制素，從而能抑制FSH的分泌。當卵巢功能出現衰減時，抑制素分泌相應減少，導致對FSH的抑制作用相應減弱，致使FSH水平會明顯升高，引起FSH/LH也隨之升高[8-10]。因此，本研究并未獲得FSH/LH評價卵巢功能的閾值。卵巢功能異常對育齡女性生育功能的影響直接而明顯，目前對卵巢功能下降尚無有效的治療方法。因此，對于育齡女性卵巢功能的準確預測對于制訂合理的妊娠計劃非常必要。本研究通過分析AMH和性激素水平在各年齡段中的差異，以及FSH/LH在評價卵巢功能方面的臨床應用，提示25歲及以上育齡女性進行卵巢功能評估具有重要意義。