腫瘤異常蛋白與乳腺癌分子標志物關系及其在乳腺癌新輔助化療中的應用

沈國棟 陸羽玲 張黎

乳腺癌作為城市女性第一位惡性腫瘤, 其病死率在現代診療技術不斷進步下有所下降, 患者總生存時間延長, 但乳腺癌復發、轉移風險仍較大。目前關于TAP與ER、PR等生物學因子的相關性研究尚少。因此, 本研究主要分析TAP與乳腺癌分子標志物的關系, 以及TAP在新輔助化療中的應用, 現報告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選擇本院2014年9月～2017年9月收治的乳腺癌患者78例。納入標準：①經影像學檢查、穿刺活檢病理確診為乳腺癌；②年齡40～65歲, 均為女性, 臨床分期Ⅱ～ⅢA期；③術前均未遠處轉移, 術前接受新輔助化療；④預期生存時間＞6個月。排除標準：①合并糖尿病、風濕病等影響TAP檢測結果的疾??；②合并其他腫瘤；③妊娠期或哺乳期婦女；④相關資料不全者。

1. 2 方法

1. 2. 1 TAP測定 采集患者指端末梢血, 置于載玻片上, 將其推成均勻血片3張, 平放, 自然晾干；之后將血片放到凈化操作臺上, 每張血片間隔均勻滴入TAP試劑(搖晃均勻)3滴, 共9個液斑, 靜置120 min左右, 若血片上有3個斑點形成判斷為完成。血片放到TAP圖像分析儀上, 找尋形態特異的凝聚物：凝聚物面積＜121 μm2判斷為TAP正常/無明顯凝聚物；凝聚物面積121～225 μm2判斷為TAP異常/凝聚物較??；凝聚物面積＞225 μm2判斷為TAP異常/凝聚物較大。

1. 2. 2 研究方法 收集并整理78例乳腺癌患者臨床病例資料, 包括年齡(＜50歲與≥50歲)、月經情況(絕經前與絕經后)、腫瘤直徑(≤3 cm與＞3 cm)、ER狀態(陽性與陰性, 免疫組化染色ER陽性細胞1%及以上判斷為陽性)、PR狀態(陽性與陰性, 免疫組化染色PR陽性細胞1%及以上判斷為陽性)、HER-2狀態［陽性與陰性, 免疫組化染色HER-2(+++)判斷為陽性, (++)者需通過熒光原位雜交(FISH)驗證, FISH陽性判斷為陽性］、Ki-67表達(≥14%與＜14%)、淋巴結轉移(是與否)等。

1. 2. 3 新輔助化療方法 接受新輔助化療4個療程, 1個療程21 d, 方案為：多西他賽(75 mg/m2)+表柔比星(75 mg/m2)+環磷酰胺(600 mg/m2)。

1. 3 近期療效判定標準 新輔助化療4周后依據實體瘤療效評價標準(RECIST)評價近期療效, 包括CR、PR、SD、PD, 有效率=(CR+PR)/總例數×100%。

1. 4 統計學方法 采用SPSS20.0統計學軟件對數據進行處理。計量資料以均數±標準差(±s)表示, 采用t檢驗, 多組比較采用F檢驗；計數資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗；影響因素分析采用多因素Logistic回歸分析。P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2. 1 化療前TAP表達 78例患者新輔助化療前TAP正常17例(21.79%), TAP異常/凝聚物較小38例(48.72%), TAP異常/凝聚物較大23例(29.49%), TAP異常率為78.21%。

2. 2 化療前TAP表達與預后因素的關系 化療前, 不同年齡、月經情況患者TAP表達比較差異無統計學意義(P＞0.05)；不同腫瘤直徑、ER狀態、PR狀態、HER-2狀態、Ki-67表達、淋巴結轉移患者TAP表達比較差異有統計學意義(P＜0.05)。見表1。

表1 不同病理特征患者化療前TAP表達比較［n(%)］

2. 3 近期療效 新輔助化療4個療程后, CR 12例(15.38%),PR 44例(56.41%), SD 15例(19.23%), PD 7例(8.97%), 有效率為71.79%。

2. 4 TAP表達與近期療效的關系 新輔助化療前后, 不同療效患者的TAP凝聚物面積比較差異均具有統計學意義(P＜0.05)；化療前后, CR、PR患者TAP凝聚物面積均低于PD、SD患者, SD患者TAP凝聚物面積均低于PD患者, 差異均具有統計學意義(P＜0.05)。見表2。

表2 不同療效患者化療前后TAP凝聚物面積比較 ( ±s, μm2)

表2 不同療效患者化療前后TAP凝聚物面積比較 ( ±s, μm2)

注：與化療前比較, aP＜0.05；與PD比較, bP＜0.05；與SD比較,cP＜0.05

近期療效 例數 化療前 化療后CR 12 125.28±11.45bc 104.67±10.29abc PR 44 140.36±10.32bc 119.25±9.64abc SD 15 152.84±11.70b 150.98±12.37b PD 7 170.31±14.53 238.94±19.85a F 20.67 54.18 P＜0.01 ＜0.01

2. 5 多因素Logistic回歸分析 多因素Logistic回歸分析發現, ER陰性、PR陰性、Ki-67＞14%、Her-2陽性是TAP異常表達的影響因素(P＜0.05)。見表3。

表3 多因素Logistic回歸分析

3 討論

新輔助化療可直接觀察化療前后腫瘤的大小、病理學及生物學指標的變化, 直觀地了解化療藥物及方案對具體腫瘤是否有效, 是最為可靠的體內藥敏試驗, 可及時調整、更換有效化療藥物, 為制定高效化療方案提供可信依據, 最大可能地提高化療效果, 但當下尚無評價化療敏感性、預測化療效果的有效指標［1-3］。相比影像學、分子生物技術, TAP檢測通過末梢血變化可提前發現病變, 且TAP檢測價格不高, 操作簡單, 準確度高, 對癌前病變、腫瘤臨床診斷有重要評估作用［4,5］。近年來大量研究［6,7］證實 , TAP 在食管、胃、大腸癌的早期篩查中有較高的靈敏度并可用于療效評估。Nilsson MI等［3］認為惡性腫瘤治療有效性不僅表現在腫瘤體積縮小方面, 單純的影像學檢查難以明確腫瘤活性變化,可能導致延遲或過度治療, 不利于其預后。TAP檢測可彌補判斷結果僅為陰性、陽性的限制。本研究結果顯示, 化療前CR、PR患者TAP凝聚物面積比SD、PD者顯著小, 且CR、PR患者化療后TAP凝聚物面積比化療前明顯縮小, 而PD明顯增大。

綜上所述, 乳腺癌中TAP異常表達率較高, TAP的異常表達程度與ER陰性、PR陰性、Ki-67高表達、Her-2陽性有關, 在新輔助化療前行TAP檢測, 一定程度上可預測患者的療效。