臨床實驗室骨髓細胞形態學檢驗的質量要求及實踐思考

佘 鵬，魏 欣

（西安鳳城醫院檢驗科，西安 710016）

骨髓細胞形態學檢查是血液疾病以及多種臨床疑難雜癥的重要檢查項目之一，同時也是多種疾病預后、骨髓造血功能恢復效果的重要判斷指標之一[1]。在實際工作中，實驗室骨髓細胞形態學檢查結果容易受多種因素影響，導致結果出現明顯差異，加之各實驗室的結果缺乏認同性，容易導致漏診、誤診，因此，如何開展有效的質量控制管理方法，克服影響骨髓細胞形態學檢驗的不良因素，提高檢查準確率，是近年來檢驗工作者們研究的熱點。本文將通過對臨床實驗室骨髓細胞形態學檢驗質量要求進行總結，為提高檢驗質量提供參考。

1 實驗室檢驗人員基本要求

骨髓細胞形態具有多變性和復雜性的特點，給檢驗人員對其分型、判斷帶來一定的困擾，因此對從事骨髓細胞學檢查的工作人員的素質和操作能力有較高的要求，具體包括以下幾個方面：①具備扎實的理論基礎和實踐操作功底、較強綜合分析能力；②具有豐富的細胞形態學檢查工作經驗；③具有嚴謹的工作作風和嚴肅的科學態度[2]；④具有良好的醫技溝通及結果解讀能力；⑤具有中級及以上職稱，經崗前培訓、再教育或有到上級醫療機構進修的經歷。具備以上能力的檢驗人員，在積累一定的工作經驗后，經檢驗科管理者認可后，才能從事本項檢查工作，檢驗并簽發報告。

2 骨髓細胞形態學檢驗規范及技術要求

骨髓形態學檢查不同于其他檢查，不但需要患者臨床資料、血細胞分析結果和實驗室其他檢查結果作為檢查及診斷的參考依據，同時還需要通過分類計數、判斷、推理，因此對檢驗流程、相關技術都有著較為嚴格的要求。為了有效提高檢驗質量，需要從以下方面進行規范管理。

2.1 規范單據填寫，加強科室溝通 ①臨床醫生所填寫的骨髓細胞檢查申請單內容是否準確、完整，影響結果分析，如患者的脾功能亢進、淋巴結腫大、發熱、骨痛等。②特殊或疑難病例，醫生需提供其他有利于診斷的檢查結果，部分骨髓增殖性疾病、惡性組織細胞疾病、血小板減少癥、粒細胞缺乏癥、原因不明的骨痛、疑似多發性骨髓瘤等疾病，除需提供血細分析結果外，還需提供其紅細胞沉降率、生化檢查、腫瘤相關檢查等結果，疑似溶血性貧血患者，還需提供網織紅細胞檢查結果，這些數據能夠為檢驗者提供豐富有價值的信息[3]，使結果更加客觀、可靠。③積極與臨床醫生溝通，收集申請單填寫以外的有價值信息?；颊叩牟∏槌蕜討B發展、變化，抽取骨髓時病人的治療狀態、陽性體征與疾病的關系等，這些信息在診斷時具有重要的參考意義。

2.2 相關技術要求

2.2.1 患者準備：骨髓穿刺是否成功與醫生的臨床經驗有著密切的關系，也與患者的配合程度有關。相關研究顯示，醫生在骨髓穿刺前對患者安撫、健康教育均能夠在一定程度上降低患者在行骨髓穿刺前的不良心態程度，有效緩解患者在穿刺過程中的疼痛感，使患者積極、有效地配合醫生完成骨髓穿刺，提高患者的依從性和穿刺成功率。

2.2.2 取材要求：樣本采集和制片、染色等工作是細胞學檢驗成功的前題，實際工作當中，樣本采集差異和細胞本身變化等因素對細胞的認知帶來較大的困擾，這就需要依靠時間的積累來不斷地提高，因此在骨髓取材時應做到以下幾個方面：①穿刺時機選擇：穿刺需要在給予患者藥物干預前進行，部分疾病在給藥治療后，其數小時內骨髓細胞會發生形態學方面的變化，掩蓋了原有的病情，極易造成診斷假象。如在給予患者腎上腺素注射后，機體內白細胞會在給藥30min左右呈現出倍增狀況，紅細胞水平也會升高20%左右，所以在臨床中部分醫生在骨髓檢查前給予患者實驗性治療的方法是不可取的，應避免。②滿意的骨髓液樣本是抽取順利，其內部應有較多的骨髓小粒、油滴等物質，用顯微鏡能夠觀察到骨髓所特有的細胞組織，且中性桿狀核和分葉核粒細胞的比值要明顯高于外周血。抽取骨髓樣本量應控制在0.2～0.5ml之間，避免過多或者過少。最佳的穿刺取材部位為髂后上棘，其次為髂前上棘，如操作不當或者定位存在偏差將直接對檢查結果造成影響[4]。③穿刺應由具有豐富臨床經驗的醫生執行操作。

2.2.3 涂片要求：制片時選擇1.0～1.2mm×25.4mm×76.2mm的磨砂載玻片，并使用專用推片，將樣本平攤在載玻片長度2/3左右。每個樣本需要在20s內完成6～10張骨髓涂片，用來存檔和做細胞化學和免疫化學染色用。效果良好的骨髓涂片，要求厚薄適當，頭、體、尾分明、邊緣整齊，分布均勻。每份骨髓涂片標本都必須認真注明患者姓名、性別、年齡、床號、住院號等，以便骨髓涂片編號登記及保存。

2.2.4 染色要求：在實施瑞-姬氏染色或者其他組化染色時，應嚴格按照臨床檢驗相關操作流程配置染色試劑，或使用商家提供的試劑盒。應合理控制染色時間和染色pH值的范圍。在進行大批量標本染色時，可采用染色架進行垂直染色。用高倍鏡觀察骨髓細胞染色效果，達到染色評判的基本標準后，用清水沖洗。染色時間易受涂片厚度及室內溫度影響，可根據染色效果適當調整或延長。

2.2.5 讀片要求：髓細胞形態學檢查時，細胞分類和形態觀察的區域應集中在細胞不重疊、不固縮、結構清晰可見區域，多為片尾與體尾交界部位，重點強調巡視和觀察尾部和兩邊界的這一異常細胞集中區域。低倍鏡是發現異常細胞的工具，油鏡則是鑒別細胞歸屬的重要工具，靈活運用低倍鏡調換油鏡，使骨髓細胞由點到面、由內到外、由表象到內涵全部展現出來。在閱片過程中辨認細胞時應注意觀察涂片細胞和染色的背景，仔細觀察涂片并尋找細胞之間的關系，結合臨床體征和血象資料，總結、推理、印證或者排除某一類細胞[5]。采集的圖像需要具有代表性，能夠清晰、真實地反映出細胞形態，不能夠隨意擴大或者縮小細胞的大小。骨髓細胞進行分類時，嚴格按照骨髓細胞的名稱和形態學特征進行分類，要求相關工作人員能夠正確掌握血液病實驗室相關診斷標準。目前我國臨床中所應用的細胞形態學標準主要有：《同意血細胞名稱的規定》和《臨床血液學及細胞學圖譜、導論和圖譜說明》、《血液病診斷及治療標準》和《全國臨床檢驗操作規程》。這些標準根據臨床表現和實驗室檢查以及前沿研究的新成果制定而來，對臨床檢驗工作者有著重要的指導作用。實際工作中，還應該充分考慮疾病的臨床特點結合其他實驗室檢查結果進行結果判定。

2.2.6 數據分析要求：嚴格按照臨床檢驗操作規程閱片，按相關標準識別細胞并分類，獲取數據及閱片過程中有意義的線索。骨髓細胞學檢查數據分析時需要全面、仔細地查找對疾病診斷有意義的線索，工作人員要善于從患者的病史、一般檢查結果、體征等檢查中發現診斷線索，再在這些檢查結果的基礎上開展有目的、有機會的深入檢查，然后進行客觀、細致的分析，合理推斷，完成疾病的診斷工作。發報告時，必須結合多項檢查結果，綜合判斷，充分了解疾病可能導致的血液細胞、骨髓細胞數量和質量的變化情況，盡可能降低漏診、誤診等情況的發生[6]。尤其是要分析陽性體征與病情的關系。如三系減少但是卻無幼稚細胞的患者如伴有脾臟腫大，需要先考慮其是否為脾功能亢進，如無脾臟腫大才應該考慮是否為再生障礙性貧血或者是難治性貧血。當患者出現原因不明的脾臟腫大同時白細胞數量明顯升高，則需要先考慮其是否為慢性髓細胞白血病或者是慢性淋巴細胞白血病等。

2.2.7 報告方法要求：通常情況下骨髓報告是由一名具有豐富經驗的檢驗工作者閱片后出示報告，每位患者的報告一式兩份，一份交由患者，另一份連同申請單一起建檔保存[7]。一般常見病的骨髓片多在8 h以內發出，在發出報告前需要由專人進行復核簽字，以確保骨髓報告質量。對于特殊病例或者疑難片，則需要由兩名具有豐富經驗的檢驗工作者共同閱片，將病情用電話或者當面溝通等形式告知臨床醫生，進行相應的溝通，必要時進行科間會診或院外閱片會診，結合病情進行分析，并在48 h以內出具正式的報告。如發現報告存在可疑、欠缺、遺漏等情況時，與臨床醫生溝通進行補充或者修正。

3 實驗室質量管理要求

骨髓細胞形態學檢查作為一項綜合、系統、重要的工作，應引起醫院檢驗科足夠的重視，從多方面入手，加強實驗室的質量管理：①建立完整的骨髓細胞檢驗SOP文件，加強培訓與學習。②建立健全檢驗科骨髓讀片制度，以便于能夠有效地提高骨髓細胞形態學檢驗水平[8]。③參加省臨床檢驗中心骨髓涂片室間質評。室間質量評價是評估實驗室質量高低的一項重要手段，應引起管理者高度重視，通過室間質評找差距，促學習，提高檢驗人員骨髓細胞檢查技術，通過室間質評還可以收集到各種疾病類型的骨髓涂片，尤其是一些較為罕見的疾病涂片，以供工作人員日常培訓、教學所用。④運用PDCA管理工具對日常骨髓細胞檢查工作中及室間質評存在的問題進行梳理，依據相關規范標準制定工作計劃，學習、培訓、持續改進，提高工作人員骨髓細胞檢查質量，確保檢查結果的科學性、準確性。⑤需要將骨髓檢驗申請單和標本進行妥善的保存管理，登記結論中完整地記錄好患者的一般資料和相關檢查結果，做好保存備案工作[9]。

4 骨髓形態學檢驗質量提高的實踐思考

骨髓細胞形態學的檢查環節多，步驟復雜，難度較大，目前都是以人工檢查為主，在檢查過程中，采集部位選擇、制片、染色、讀片、保存、檢驗人員素質等多種因素都會影響骨髓細胞形態學檢查的最終結果[10-11]。因此，在骨髓細胞形態學的檢查中，針對性地提出一些質控方法是有必要的。隨著近年來對于血細胞的超微結構、細胞免疫學、遺傳學、分子生物學、造血干細胞以及細胞因子等方面的研究日益深入，推動了臨床血液和實驗室新知識的快速發展[12]。因此實驗室工作人員應多參加學術活動，補充其他學科知識和技術，同時與當地教學醫院或血液研究所建立良好的教學關系，互幫互學，提高自身的業務能力，滿足臨床診治需求。

綜上所述，注重對檢驗工作者基本素質的培養，規范申請單填寫，注重樣本采集過程和讀片的方法與規范，加強檢驗科與臨床科室的溝通與交流，重視科室自身的質量管理工作，這些措施可以有效地提高骨髓檢查的質量。同時，質控方法是一個不斷發展的過程，在工作中還需要不斷地查找存在的問題，運用PDCA管理工具，制定相應質量控制對策，不斷提高檢查質量，為臨床的診治提供可靠的依據。