少弱精子癥患者精液常規參數與精子形態特點的分析研究

蔣丹丹， 張盼盼， 西爾艾力·買買提， 毛吾蘭·買買提依明， 白生賓， 阿地力江·伊明

(新疆醫科大學基礎醫學院， 烏魯木齊 830011)

少精子癥是指禁欲2～7 d，精子濃度小于15×106個/mL，弱精子癥是指禁欲2～7 d，前向運動精子率<32%或前向運動+非前向運動精子率<40%，當兩者同時發生稱為少弱精子癥[1]。資料顯示，約20%的育齡夫婦受到不育不孕的困擾，其中男性因素占50%[2]。精液異常導致的男性不育約占70%～80%[3]，其中少精子癥(oligozoospermia)、弱精子癥(asthenozoospermia)、少弱精子癥(oligoasthenozoospermia)分別占男性不育的10%、30%和40%[4-6]，由于精液異常導致男性不育的患者數量呈逐年上升趨勢。精液質量分析是評估男性生殖功能的一項重要指標，為少、弱及少弱精子癥的臨床診斷和治療提供了重要依據[7]。本研究采用計算機輔助精液質量分析系統(computer assisted sperm analysis，CASA)對411例男性精液進行常規檢查，對檢查結果進行整理分析，以探究少、弱和少弱精子癥患者精液常規參數與精子形態改變特征以及精液質量的情況，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料選擇2017年7月-2018年4月在新疆醫科大學第一附屬醫院產前診斷中心就診的411例男性為研究對象，年齡21～50歲，平均年齡(32.44±5.50)歲。

1.2 儀器與試藥WLJY-9000型彩色精子質量檢測系統(北京偉力儀器公司)，HH-W420型恒溫水浴鍋(金壇市白塔新寶儀器廠)，MACRO型計數板(南京凱爾儀器有限公司)，精子活體染色液(索萊寶公司)。

1.3 測定方法

1.3.1 精液樣本外觀、體積、pH值等指標的測定方法 研究對象禁欲2～7 d，采用手淫法收集精液，肉眼觀察精液顏色，記錄標本接收時間及精液體積。標本置于37℃恒溫水浴箱中，液化后觀察液化狀態，同時記錄液化時間，觀察精液黏稠度情況，采用精密pH試紙測定各組精液pH值。

1.3.2 精子活力、密度及存活率的測定方法 取“1.3.1”項下液化后的精液樣本5 μL，使用WLJY-9000型彩色精子質量分析系統配合載物臺溫控儀以及MACRO 計數板對所有標本進行前向運動的精子個數及比例、非前向運動的精子個數及比例、不活動的精子個數及比例、精子總數、精子密度的檢測。精子存活率的測量采用伊紅-苯胺黑染色法，取50 μL精液與等體積的伊紅-苯胺黑懸液混合，制成涂片后油鏡下觀察并計數染色和非染色的精子，計算非染色精子所占的百分率。

1.3.3 精子形態的測定方法 采用CASA系統檢測并計算各組精子平均大小、平均周長、正常個數、畸形個數、頭部畸形、體部畸形、尾部畸形、混合畸形個數及比例等。

1.4 分組方法根據《WHO 人類精液檢查與處理實驗室手冊》[1](第5版)判斷標準分為正常組：前向運動精子率≥32% 或前向運動+非前向運動精子率≥40%，精子密度≥15×106個/mL；少精子癥組：精子密度<15×106個/mL；弱精子癥組：前向運動精子率<32%或前向運動+非前向運動精子率<40%；少弱精子癥組：前向運動精子率<32%或前向運動+非前向運動精子率<40%，并且精子密度<15×106個/mL。

2 結果

2.1 各組精液前向運動精子率、前向+非前向運動精子率、精子總數、精子密度的比較根據測定結果將411例研究對象分為正常組(106例)、少精子癥組(105例)、弱精子癥組(150例)及少弱精子癥組(50例)。與正常組比較，少精子癥組、弱精子癥組和少弱精子癥組前向運動精子率、前向+非前向運動精子率、精子密度降低，少精子癥組、少弱精子癥組精子總數降低，弱精子癥組精子總數升高，差異有統計學意義(P<0.05)。與少精子癥組比較，弱精子癥組和少弱精子癥組前向運動精子率、前向+非前向運動精子率降低，弱精子癥組的精子總數、精子密度升高，差異有統計學意義(P<0.05)。與弱精子癥組比較，少弱精子癥組前向+非前向運動精子率、精子總數、精子密度均降低，差異有統計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 各組精液前向運動精子率、前向+非前向運動精子率、精子總數、精子密度比較

注：與正常組比較，*P<0.05； 與少精子癥組比較，#P<0.05； 與弱精子癥組比較，△P<0.05。

2.2 各組精液相關指標的比較正常組與少精子癥組的精液外觀以灰白色為主，弱精子癥組、少弱精子癥組的精液外觀以乳白色為主。與正常組比較，弱精子癥組和少弱精子癥組的精液外觀有差異，少精子癥組、弱精子癥組和少弱精子癥組的精液體積、精液不液化出現率增加，精子存活率降低，差異均有統計學意義(P<0.05)。各組間精液黏稠度、pH值比較，差異無統計學意義(P>0.05)。與少精子癥組比較，弱精子癥組和少弱精子癥組精子存活率降低，差異有統計學意義(P<0.05)。與弱精子癥組比較，少弱精子癥組精子存活率降低，差異有統計學意義(P<0.05)，見表2、3。

表2 各組精液外觀、液化狀態、黏稠度的比較/例(%)

表3 各組精液標本體積、pH值、存活率的比較

注： 與正常組比較，*P<0.05； 與少精子癥組比較，#P<0.05； 與弱精子癥組比較，△P<0.05。

2.3 各組精子形態的比較與正常組相比，少精子癥組、弱精子癥組和少弱精子癥組的精子平均大小、平均周長、正常個數、尾部畸形個數減小，精子畸形個數、精子頭部畸形個數、體部畸形個數和混合畸形個數增加，差異有統計學意義(P<0.05)。與少精子癥組相比，少弱精子癥組的正常個數、尾部畸形個數減少，頭部畸形、體部畸形個數增加，差異有統計學意義(P<0.05)，見表4。

表4 各組精子形態的比較

注：*與正常組比較，*P<0.05； 與少精子癥組比較，#P<0.05。

3 討論

少、弱及少弱精子癥是男性生殖系統的常見疾病，是男性不育癥的主要病因，精液質量是診斷、治療和評估男性生育能力的重要依據。精液質量除精子密度和活力外，還包括精液體積、液化狀態、pH值等內容，是臨床對少、弱及少弱精子癥和男性不育癥的首要檢測項目[8]。目前CASA是比較普遍的檢測男性精液質量的方法，具有客觀、操作簡便、重復性好，減少人工誤差等優點[9]。

健康男性液化精液多呈灰白色，隨著禁欲時間、精子濃度的改變，顏色也有不同，弱精及少弱精子癥患者精液外觀與健康人群存在一定差異。正常男性一次排精量在2～5 mL，過多或過少都是疾病的表現，本研究結果提示少、弱及少弱精子癥患者精液體積增多的原因與附屬腺出現炎癥或炎性滲出相關。由于精液不液化導致射精后精子不能通過宮頸到達輸卵管與卵子結合，是導致男性不育的重要原因[10]。精子存活率作為評估精液質量的一個重要參數[11]，可以反映精子的生存能力和質量優劣，精子存活率降低可以降低受精能力[12]，本研究結果表明少、弱及少弱精子癥對存活率的影響程度存在差異。精子具有異質性，即使精液正常的男性也存在異常形態的精子，且精子形態與精子活力、精子密度之間也存在密切的關系[13]。精子形態異?？蓪е戮幽て茐?、精子代謝異常、活力減弱，導致精子質量下降，因此精子形態檢測可作為評價精液質量及男性生育力高低的指標[14-15]。

綜上所述，本研究通過對精液常規和形態學改變的檢測與分析，發現精液常規檢測與精子形態學改變特征可有效評價精液質量，為臨床診治和療效提供重要參考。