GC-MS分析來自不同藥性寄主的桑寄生揮發性成分

黃蜚穎，劉人源，柴子舒，蘇本偉，朱開昕，陸海琳*，李永華

(1.廣西中醫藥大學，廣西 南寧 530200；2.欽州市中醫藥研究所，廣西 欽州 535000)

桑寄生為桑寄生科鈍果寄生屬植物廣寄生Taxilluschinensis(DC.)Danser的干燥帶葉莖枝，為2015版《中國藥典》收錄的常用藥材，具有祛風濕、補肝腎、強筋骨、安胎元等功效[1]，主要分布于海南、福建、廣東、廣西[2]等地，古文獻記載的“桑寄生”寄主應為桑[3-4]，藥性“平”，指的應是寄主為桑的桑寄生的藥性；《本草經集注》[3]提到桑寄生“根津所因處為異”，《本草綱目》[5]載“世俗多以雜樹上者充之，氣性不同”，指出，非桑樹寄主的桑寄生藥性(藥效)不同；現代研究表明來自不同寄主的桑寄生其揮發油成分存在一定差異[6-7]。在民間，人們用來自不同寄主的寄生治療不同疾病[8]。龔祝南等[9]在對桑寄生進行本草考證時提出寄主會影響寄生的藥性，不同寄主的桑寄生可治療不同的疾病，可見，古代本草對不同寄主來源的桑寄生存在藥性差異是持認可態度的，但受研究條件的限制，古人雖然意識到了寄主會影響桑寄生的性味、療效，但未能從物質基礎層面探討寄主對寄生產生影響的原因。辛寧等[10]對藥性不同的藥材的8大類化學成分進行統計分析，發現溫性藥比寒性藥含揮發油類成分的比例相對較高。本課題組采集寄生于柳樹和肉桂的桑寄生及其寄主藥材柳枝、桂枝，擬對來自出產寒、熱不同藥性藥材寄主的桑寄生的揮發油進行定性研究，尋找寄主與桑寄生的關系，以期為桑寄生的藥性研究奠定物質基礎。

1 材料

1.1 藥品與試劑

柳樹桑寄生及柳枝采于廣西南寧，肉桂桑寄生及桂枝采于廣西梧州，所有藥材皆于12月份采集。經廣西中醫藥大學藥用植物教研室李永華研究員鑒定，桑寄生基原植物為桑寄生科鈍果寄生屬廣寄生Taxilluschinensis(DC.)Danser，桂枝基原植物為樟科樟屬肉桂CinnamomumcassiaPresl，柳枝基原植物為楊柳科柳屬柳樹SalixbabylonicaL。乙酸乙酯(太倉滬試試劑有限公司，批號：20160513)，無水硫酸鈉(天津博迪化工股份有限公司，批號：20160126)。

1.2 儀器設備

美國Agilent 7890B-5977A氣相色譜-質譜聯用儀。98-1-B型電熱套(天津市泰斯特儀器有限公司)，XMTD-8222電熱恒溫鼓風干燥箱(上海精宏實驗設備有限公司)，16 K臺式離心機(珠海黑馬醫學儀器有限公司)。

2 方法

2.1 樣品制備

將采集到的桑寄生及寄主藥材鮮品枝、葉分開，枝剪成約2 cm的小段，陰干，然后45 ℃烘3 h。稱取一定量的藥材(桑寄生按1∶2的枝葉比稱取)，以1∶10的料液比，用水蒸氣蒸餾法提取8 h，靜置冷卻后加入乙酸乙酯溶解、稀釋，從提取器下端收集乙酸乙酯層，加適量無水硫酸鈉除水，離心后取上清液用于進樣分析。

2.2 氣相色譜條件

氣相色譜條件：HP-5 MS彈性石英毛細管色譜柱(30 m×250 μm×0.25 μm)，載氣He(≥99.999%)，流量(1.0 mL·min-1)，進樣口溫度270 ℃，桂枝的分流比為80∶1，其他樣品為20∶1，進樣量10 μL，溶劑延遲5.0 min，程序升溫，起始溫度為60 ℃，保持8 min，然后以3 ℃/min升至170 ℃，再以2 ℃/min升至270 ℃，保持10 min。

2.3 質譜條件

電離方式EI，電子能量70 eV，離子源溫度230 ℃，傳輸線溫度 280 ℃，質量范圍M/Z 50～550。

2.4 質譜數據庫

NIST11.L、Flavor2.L質譜數據庫。

2.5 揮發性成分定性和定量分析

按上述實驗條件進樣分析，通過 MSD ChemStation化學工作站檢索NIST11.L標準質譜圖庫和 Flavor2.L質譜圖庫，確定桑寄生及其寄主藥材揮發性成分的化學組成；通過化學工作站RTE積分器進行積分(最大峰數為100)，采用峰面積歸一化法計算出各成分在揮發性成分中的相對含量。

3 結果

寒、熱不同寄主桑寄生與寄主藥材揮發油的總離子流圖譜見圖1，不同寄主桑寄生及寄主藥材總離子流比較見圖2。桑寄生及其寄主藥材揮發性成分分析結果見表1、表2、表3。柳樹桑寄生識別鑒定揮發性成分68個，相對含量最高的兩個揮發性成分分別為反式-橙花叔醇和芳樟醇，柳樹桑寄生與其寄主柳枝共有的特征性成分為15個，這15個揮發性成分相對總含量為7.520%；肉桂桑寄生識別鑒定揮發性成分52個，相對含量最高的兩個揮發性成分分別為6，10，14-三甲基-十五烷-2-酮和8-庚癸烯，肉桂桑寄生與其寄主桂枝共有的特征性成分為9個，這9個特征性成分相對總含量為4.878%。

圖1 桑寄生及其寄主揮發油GC-MS總離子流

A1.柳樹桑寄生；A2.柳枝；B1.肉桂桑寄生；B2.桂枝

A1.柳樹桑寄生；A2.柳枝；B1.肉桂桑寄生；B2.桂枝

序號tR(min)化合物分子式柳樹桑寄生揮發性成分及相對含量柳枝揮發性成分及相對含量肉桂桑寄生揮發性成分及相對含量桂枝揮發性成分及相對含量16.199正己醛 C6H12O0.8860.8580.1010.01828.180反式-2-己烯醛 C6H10O0.070---38.848正己醇 C6H14O0.2391.298--410.008苯乙烯 C8H8---0.018512.227(1R)-(+)-α蒎烯C10H16---0.190613.041莰烯 C10H16---0.207713.764苯甲醛C7H6O---1.929814.271庚醇 C7H16O0.1840.184--914.608β-蒎烯 C10H16---0.0911014.7891-辛烯-3-醇 C8H16O0.9490.949--1115.4362-正戊基呋喃 C9H14O0.7310.731--1216.064辛醛 C8H16O0.0910.186--1317.3191-異丙基-2-甲基苯 C10H140.036--0.0161417.540右旋萜二烯 C10H160.067--0.1581517.661桉樹腦 C10H18O-0.475-0.0511617.8623-乙基-2-甲基-1,3-己二烯 C9H160.042---1718.1133-辛烯-2-酮 C8H14O-0.308--1818.374間羥基苯甲醛 C7H6O2---0.5171918.379水楊醛 C7H6O2-0.287--

續表1 不同寄主桑寄生與寄主藥材的揮發性化學成分 (%)

續表1 不同寄主桑寄生與寄主藥材的揮發性化學成分 (%)

表2 柳樹桑寄生與柳枝共有的特征性化學成分 (%)

表3 肉桂桑寄生與桂枝共有的特征性化學成分 (%)

4 討論

柳樹寄主藥用部位為柳枝，《中藥大辭典》[11]記載柳枝“性寒”，因此將柳樹寄主的藥性定義為寒性寄主；肉桂寄主藥用部位有桂枝和肉桂皮，2015版《中國藥典》[1]記載桂枝“性溫”，肉桂皮性“大熱”，因此將肉桂寄主的藥性定義為溫熱寄主。

本研究發現，不同寒、熱藥性寄主柳樹和肉桂桑寄生的揮發性成分組成及含量不同，寄主會通過它們之間特殊的寄生關系將寄主的特征性揮發性成分轉運到桑寄生中去，其中柳樹寄主轉運過去的特征性揮發性成分有15個，這些成分的相對總含量為7.520%；肉桂寄主轉運過去的特征性揮發性成分有9個，這些成分的相對總含量為4.878%。

本草古籍[3-5]中關于寄主對桑寄生藥材藥性的影響記載頗多，上述揮發性成分由寄主向寄生其上的桑寄生轉運，是否對桑寄生的藥性構成影響，有待進一步研究。