貴州青腳麻雞傳染性支氣管炎的診斷

陳永惠，劉 淵，陳秀娟

（1.貴州省六枝特區動物科技服務中心 553400；2.貴州省水城縣動物疫病預防控制中心 553600）

青腳麻雞是生活在中國西南片區的肉用地方品種雞之一，主要特征為青腳、麻羽，體型特征可概括為“一楔”、“二細”、“三麻身”。 “一楔”指母雞體型象楔形，前軀緊湊，后軀圓大。 “二細”指頭細、腳細。 “三麻身”指母雞背羽面主要有麻黃、麻棕、麻褐三種顏色。 公雞頸部長短適中，頭頸、背部的羽金黃色，胸羽、腹羽、尾羽及主翼羽黑色，肩羽、蓑羽棗紅色。 母雞頸長短適中，頭部和頸前1/3 的羽毛呈深黃色。 背部羽毛分黃、棕、褐三色，有黑色斑點，形成麻黃、麻棕、麻褐三種。 單冠直立。 脛趾短細、呈黃色。 成年體重公雞為2180g，母雞為1750g。 青腳麻雞肉質細嫩、營養價值高，具有山區“土雞”的特色，它適應性強、生長快、成本低。 在西南片區，如四川綿陽、貴州貴陽及六盤水等地農村地區養殖較多， 在部分地區進行遺傳基因純化后作為地方品種得以保種和擴大生產，是當地人們最為喜食的肉食家禽，對地方經濟的發展起到不可估量的作用。 但正因為其逐步規?；彤a業化發展，使很多疾病也接憧而至，對其地方適應性造成了挑戰，特別是易發傳染性支氣管炎，該病由傳染性支氣管炎病毒引起，本病據其臨床癥狀分為呼吸道型、腎臟型、生殖型和腺胃型四種，具有極強的傳染性，在養雞生產中極為常見，能夠在短時間內引起快速傳播，并造成雞的生長發育不良及大批死亡，危害巨大。

本文就貴州省六枝特區動物科技服務中心接到的創興養殖場送來的8 只青腳麻雞病例（其中2 只死亡）進行了系列診斷和分析，現將檢查及診斷進行報道，為養雞生產提供參考。

1 材料與方法

1.1 被檢動物與檢測試劑 被檢動物為貴州省六枝縣創興養殖場于2020 年7 月3 日送來的8 只青腳麻雞病例（其中2 只死亡）。 檢測試劑：RNA 提取試劑盒購自北京世紀元亨有限公司；cDNA 的合成試劑盒為北京康為世紀生產的HiFi-Script cDNA第一鏈合成試劑盒。

1.2 流行情況 創興養殖場8000 只33 日齡的青腳麻雞，免疫過馬立克、法氏囊疫苗以及雞新城疫、傳染性支氣管炎二聯活疫苗。2020 年7 月3 日送檢病雞時已發病12d 左右，發病一周后開始死亡，第1d 死亡100 多，第2d 死亡300，第3d 死亡400 只，每天死亡幾百只，至送檢日共死亡1000 多只。

1.3 病雞臨床特征 病雞出現呼吸困難、張口呼吸，消瘦，無食欲，站立不穩，搖頭轉圈，拉水樣糞便等臨床癥狀。

1.4 病雞剖檢主要病變 對發病雞進行剖檢， 主要解剖病變有：肺部與法氏囊內有黃色干酪樣物質，氣管出血，心包積液，法氏囊、腎臟、腺胃腫大。

1.5 實驗室檢測

1.5.1 細菌分離培養鑒定

取送檢雞的肝臟、心臟、脾臟、腎等組織進行細菌分離培養，37℃培養16h。

1.5.2 病原核酸檢測

1.5.2.1 樣品處理

解剖病雞，無菌采集病死雞心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟、法氏囊及氣管等組織用無菌手術剪剪碎，于研磨器中研磨、勻漿，制備待檢樣本。

1.5.2.2 病毒核酸提取

按照北京世紀元亨有限公司生產的RNA 快速抽提試劑盒說明書進行總RNA 的提取。

1.5.2.3 cDNA 的合成

用北京康為世紀生產的HiFi-Script cDNA 第一鏈合成試劑盒進行反轉錄。

2 結果

2.1 細菌分離培養結果

細菌分離培養結果顯示無細菌生長。

2.2 病毒核酸PCR 檢測

2.2.1 新城疫病毒PCR 檢測

使用新城疫病毒通用型引物對核酸樣本進行PCR 檢測，結果為陰性。

2.2.2 雞傳染性喉氣管炎病毒PCR 檢測

使用雞傳染性喉氣管炎病毒特異性引物對核酸樣本進行PCR 檢測，結果為陰性。

2.2.3 傳染性支氣管炎病毒PCR 檢測

使用傳染性支氣管炎病毒特異性引物對核酸樣本進行PCR 檢測，結果可以擴增出特異性條帶，為陽性。

2.2.4 傳染性法氏囊病毒PCR 檢測

使用傳染性法氏囊病毒特異性引物對核酸樣本進行PCR檢測，結果為陰性。

2.2.5 雞毒支原體PCR 檢測

使用雞毒支原體特異性引物對核酸樣本進行PCR 檢測，結果為陰性。

3 結論與討論

對送檢雞進行細菌分離，結果為陰性；對送檢雞進行雞傳染性喉氣管炎、新城疫、雞毒支原體、傳染性法氏囊病病原核酸檢測，結果均為陰性；而進行雞傳染性支氣管炎病毒病原核酸為陽性。 結合發病雞的流行特點、臨床癥狀、剖檢病變、細菌培養和病毒核酸檢測結果綜合分析判斷， 該雞場發生的傳染病為雞傳染性支氣管炎。

雞傳染性支氣管炎1930 年最早發現于美國，1972 年我國首次報道，如今廣泛流行于世界各地。 本病由傳染性支氣管炎病毒引起的急性、高度接觸性呼吸道傳染病，其中主要血清型是腎型。 潛伏期36h 或者更長，臨床表現流鼻涕、因呼吸困難而張口呼吸、咳嗽、噴嚏、甩頭、食欲下降或廢絕、腹瀉、糞便呈黃白色；病雞主要病變為氣管、支氣管或喉頭有漿液性或干酪樣滲出物。死亡率不高， 主要影響產蛋量和蛋品質。 除了雞能夠感染發病外，其他家禽都不會感染，且各個年齡的雞都能夠發生，其中雛雞較為嚴重，通常是40 日齡以下的雞更易發病，發病率可高達95%，死亡率一般為5%，但隨毒株變異，毒性增強會致死亡率增加。 在肉雞飼養過程中，每年都有發生該病，由于該病傳播快，死亡率相對較高，往往會嚴重損害養雞戶的經濟效益。 近幾年，該病的發病率呈明顯升高的趨勢，給養雞生產造成嚴重影響。 一般認為，對該病除采取常規藥物進行預防外，免疫接種是主要和有效的辦法。