崔貴醫 龐志剛
【摘 要】 目的:探討沉默OTUD1基因對人膽囊癌細胞增殖及遷移的影響。方法:選取2013年4月到2019年9月我院收治60例的采用慢病毒感染與siRNA干擾技術沉默人膽囊癌細胞GBC-SD中OTUD1基因患者作為siRNA組,同時選取60例空白對照組作為GBC-SD組,運用CCK-8法對上述兩組患者24h、48h、72h細胞吸光度值(A450)進行檢測,并運用Transwell小室細胞遷移與侵襲實驗對穿膜細胞數進行檢測,觀察兩組患者的A450、穿膜細胞數情況。結果:siRNA組24h、48h、72h的A450分明顯低于GBC-SD組,差異顯著(P<0.05);在Transwell小室細胞遷移與侵襲實驗中,siRNA組24h的穿膜細胞數顯著較少,與GBC-SD組相比差異顯著(P<0.05)。結論:沉默OTUD1基因能夠有效的阻止人膽囊癌細胞增殖與遷移。
【關鍵詞】 沉默OTUD1基因;膽囊癌;細胞增殖;細胞遷移
【中圖分類號】R735.7?? 【文獻標志碼】A?? 【文章編號】1005-0019(2020)03-051-02
膽囊癌在臨床中較為常見,依據臨床研究顯示,該疾病的預后質量多較差,主要與腫瘤侵襲、轉移存在密切關聯,因此若能夠有效的控制癌細胞的侵襲與轉移,能夠有效的改善患者的預后質量[1]。沉默OTUD1基因是一個含有OTU結構域的去泛素化酶,通過臨床研究可知[2],沉默OTUD1基因與膽囊癌的惡化、不良預后及生存期縮短具有密切關聯,因此需要有效的明確沉默OTUD1基因水平,明確其抑制膽囊癌細胞增殖與侵襲的機制,從而改善患者的預后[3]。
1 資料與方法
1.1 一般資料
選取2013年4月到2019年9月我院收治60例的采用慢病毒感染與siRNA干擾技術沉默人膽囊癌細胞GBC-SD中OTUD1基因患者作為siRNA組,同時選取60例空白對照組作為GBC-SD組。siRNA組男女各37例與23例,年齡為41-61歲,平均年齡為(51.1±4.9)歲;GBC-SD組男女各39例與21例,年齡為42-61歲,平均年齡為(51.5±5.1)歲。兩組患者之間的線性資料差異具有可比性(P>0.05)。
1.2 方法
(1)提取患者的癌細胞組織,運用CCK-8法對上述兩組患者24h、48h、72h細胞吸光度值(A450)進行檢測。
(2)Transwell小室細胞遷移實驗。將Transwell小室放置于24孔細胞培養板中,將小室內作為上室,將培養板內作為下室,之后將GBC-SD組的無血清培養液放置于上室內,將含10%胎牛血清的DMEM培養液放置于下室內,根據檢測穿膜細胞數對細胞遷移能力進行判斷。
(3)Transwell小室細胞侵襲實驗。將Matrigel膠涂抹于上室,將FN膠涂抹于下室,根檢測穿膜細胞數對細胞的侵襲能力進行判斷。
1.5 觀察指標
①24h、48h、72h細胞吸光度值(A450)。
②Transwell小室細胞遷移與侵襲實驗中的穿膜細胞數情況。
1.6 統計學處理
使用SPSS18.0統計軟件進行分析,A450、穿膜細胞數為計量資料,使用LSD-t檢驗,P<0.05提示差異具有統計學意義。
2 結果
2.1 24h、48h、72h細胞A450比較
siRNA組24h、48h、72h的A450明顯低于GBC-SD組,差異顯著(P<0.05),見表1。
2.2 Transwell小室細胞遷移與侵襲實驗中的穿膜細胞數比較
在Transwell小室細胞遷移與侵襲實驗中,siRNA組24h的穿膜細胞數顯著較少,與GBC-SD組相比差異顯著(P<0.05),見表2。
3 討論
膽囊癌在臨床中較為常見,較易對周圍臟器形成累及,并且將會向淋巴結等器官進行轉移,從而產生更加嚴重的不良影響,因此需要采取有效的措施阻止癌細胞的增殖與遷移。隨著研究的不斷深入,臨床人員發現沉默OTUD1基因與膽囊癌的惡化、不良預后及生存期縮短具有密切關聯,即隨著OTUD1基因表達量的不斷提升,患者的病情將會隨之加重,并且預后質量也將不斷變差[4]。在本研究中,通過使用siRNA干擾技術對OTUD1基因進行沉默,能夠使其表達量不斷降低,從而能夠改善患者的預后質量。依據結果顯示,通過對OTUD1基因進行沉默,患者的A450、穿膜細胞數明顯降低,由此說明siRNA沉默OTUD1基因的表達后,能夠有效的抑制膽囊癌細胞的增殖與遷移,與國外相關學者的研究結果類似。
綜上所述,本研究認為沉默OTUD1基因能夠有效的阻止人膽囊癌細胞增殖與遷移,能夠有效的對患者的預后情況進行改善,具有良好的效果。但臨床相關人員仍然需要加強對OTUD1基因的研究,以獲得更進一步的效果。
參考文獻
[1] 任立剛.Cx43基因修飾對人膽囊癌GBC-SD細胞增殖和遷移能力的影響[J].中國實驗診斷學,2015,19(11):1826-1829.
[2] 蔡煒龍,余勝,汪偉民,許洪寶,樓能.siRNA沉默CD44表達對人膽囊癌細胞增殖、侵襲和遷移的影響[J].浙江醫學,2019,41(11):1133-1137.
[3] 段巨濤,張琦.電轉法介導沉默ABCE1基因對人膽囊癌細胞基因表達及增殖能力的抑制作用[J].中國中西醫結合外科雜志,2017,23(05):523-527.
[4] 張生彬,曹翠霞,鄒曉明,云哲琳,石雪英.NDRG1基因過表達對膽囊癌GBS-SD細胞增殖及凋亡的影響[J].基因組學與應用生物學,2018,37(12):5640-5647.