超微技術對鐵皮石斛粗多糖浸出的影響

何云山 譚周進

摘要 ? ?通過苯酚-硫酸法測定鐵皮石斛超微粉與鐵皮石斛常規粉水溶性粗多糖的含量，探討超微技術對鐵皮石斛粗多糖浸出的影響。結果表明，鐵皮石斛超微粉中水溶性粗多糖含量為484.6 mg/g，常規粉水溶性粗多糖含量為370.2 mg/g，鐵皮石斛超微粉水溶性粗多糖含量比常規粉水溶性粗多糖含量高30.9 %，二者的差異具有統計學意義（P<0.05）。超微技術有助于鐵皮石斛粗多糖的浸出。

關鍵詞 ? ?鐵皮石斛;超微中藥;粗多糖

中圖分類號 ? ?R282 ? ? ? ?文獻標識碼 ? ?A

文章編號 ? 1007-5739（2020）04-0214-02 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 開放科學（資源服務）標識碼（OSID）

Abstract ? ?The phenol-sulfuric acid method was used to determine the water-soluble crude polysaccharide content of Dendrobium candidum ultrafine powder and regular powder，and the effect of ultramicrotechnique on the extraction of polysaccharides from Dendrobium candidum was investigated.The results showed that the content of water-soluble crude polysaccharide of Dendrobium candidum ultrafine powder was 484.6 mg/g，and the content of water-soluble crude polysaccharide of regular powder was 370.2 mg/g，the former was 30.9% higher than that of the later，there was a signficant difference between the two（P<0.05）.The ultra-microtechnique is helpful for the extraction of crude polysaccharides from D.officinale.

Key words ? ?Dendrobium officinale;ultra-micro Chinese medicine;crude polysaccharide

鐵皮石斛（Dendrobium officinale）在《神農本草經》中被列為上品，“味甘，平。主傷中，除痹，下氣，補五臟虛勞羸弱，強陰，久服厚腸胃”?！侗静菥V目》也有詳細記載，《道藏》將鐵皮石斛列為“九大仙草”之首，民間稱其為“救命仙草”，擁有“藥中黃金”之美譽[1]。研究表明，多糖是鐵皮石斛的主要成分[2]，鐵皮石斛對治療胃腸道疾病、白內障、關節炎、血栓閉塞性脈管炎及慢性咽炎等疾病有很好的療效[3]。石斛多糖對腸道中乳酸菌和雙歧桿菌有明顯的增殖作用，對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌和肺炎球菌都有很好的抑制作用[4]，石斛多糖同時具有增強免疫力的作用，對超氧陰離子自由基、羥基自由基的清除作用效果好[5]，從而對相關的腸道病原菌有很好的抑制作用。為了體現鐵皮石斛超微制劑的優越性，本文對鐵皮石斛超微細粉與傳統細粉的粗多糖含量進行了研究。

1 ? ?材料與方法

1.1 ? ?試驗材料

葡糖糖（西隴科學股份有限公司）、無水乙醇（天津市富宇精細化工有限公司）、苯酚（成都市科隆化學品有限公司）、濃硫酸（國藥集團化學試劑有限公司）;鐵皮石斛常規細粉和超微粉，由湖南龍石山鐵皮石斛基地有限公司提供。

1.2 ? ?試驗方法

1.2.1 ? ?鐵皮石斛粗多糖的提取。參照《中華人民共和國藥典》2015年一部中介紹的方法進行。設鐵皮石斛常規粉和超微粉2個處理，即分別稱取1 g鐵皮石斛常規細粉和超微粉，加水200 mL，沸水煎煮2 h，放冷，轉移至250 mL量瓶中，用少量水分次洗滌容器，洗液并入同一量瓶中，加水至刻度，搖勻、過濾，置于4 ℃冰箱保持，備用。

1.2.2 ? ?鐵皮石斛中粗多糖含量的測定。

（1）葡萄糖標準曲線繪制[6]。準確稱取在105 ℃干燥至恒重的葡萄糖100 mg，置于100 mL燒杯中，加水80 mL溶解，轉移至100 mL容量瓶中，燒杯與玻璃棒反復潤洗3次，潤洗液均需移入容量瓶中，最后加水定容至刻度線，配成濃度為1 mg/mL葡萄糖標準液，選取部分葡萄糖標準液稀釋為0.1 mg/mL置于4 ℃冰箱備用。葡萄糖標準曲線按表1進行制作。

（2）鐵皮石斛粗多糖含量的測定。準確量取“1.2.1”項中的濾液2 mL，置于15 mL離心管中，加入無水乙醇8 mL，搖勻，冷藏過夜，取出，4 000 r/min離心20 min，棄去上清液，沉淀加80%乙醇洗滌2次，每次8 mL，離心，棄上清液，沉淀加熱水溶解，轉移至25 mL量瓶中，放冷，加水至刻度，搖勻，即得待測液。準確量取1 mL待測液（設3個平行，以蒸餾水作為空白對照），加入1 mL 5%苯酚溶液，搖勻，再加入濃硫酸5 mL，搖勻，置于沸水浴中加熱20 min，置于冰浴中冷卻5 min，在488 nm處測吸光度值，根據平均吸光度值計算鐵皮石斛粗多糖的含量。

1.3 ? ?統計學分析

用SPSS 19.0軟件處理數據，各分組所得計量數據采用平均值±標準差（x±s）表示，2組間均數符合正態性、方差齊性用t檢驗進行比較，否則運用非參數檢驗進行比較。

2 ? ?結果與分析

2.1 ? ?葡萄糖標準曲線

由圖1可以看出，不同葡萄糖含量在488 nm處的吸收值均勻分布在標準曲線的兩側或其上，反映出此次試驗葡萄糖標準曲線的線性極好，運用標準曲線能很好地計算各個吸光值下的葡萄糖含量。通過線性方程擬合發現吸光度與糖含量之間的關系方程式為Y=1.438X。

2.2 ? ?超微對鐵皮石斛粗多糖浸出的影響

由圖2可知，運用苯酚-硫酸法測得鐵皮石斛常規粉中粗多糖的含量為370.2 mg/g，而鐵皮石斛超微粉中粗多糖的含量為484.6 mg/g，結果表明，鐵皮石斛超微粉粗多糖浸出量顯著高于鐵皮石斛常規粉（P<0.05）。進一步比較發現，鐵皮石斛超微粉粗多糖浸出含量比鐵皮石斛常規粉粗多糖浸出含量增加30.9%，促進了鐵皮石斛的利用。綜上可知，超微技術有助于鐵皮石斛水溶性粗多糖的浸出。

3 ? ?結論與討論

中藥飲片經歷了傳統中藥、配方顆粒、納米中藥、超微中藥等發展歷程[7]。傳統中藥飲片顯示了極強的生命力，但是傳統中藥飲片服用前需臨時煎煮，使用和攜帶不方便。超微中藥采用現代科學技術與傳統的中藥炮制技術相結合，將傳統飲片加工成一種粒徑為微米級的新型中藥飲片，服用方便。超微技術增加了藥材成分與溶劑的接觸面積，使中藥有效成分在水中的溶出明顯高于傳統中藥飲片，顯著提高了藥材利用率，節省了資源;同時超微粉碎能促進藥物在體內的吸收，提高生物利用度[8]。陳 ?熹等[9]采用高效液相色譜法分別測定肉蓯蓉常規粉和肉蓯蓉超微粉中有效成分的含量，結果發現，肉蓯蓉常規粉中松果菊苷、毛蕊花糖苷的含量明顯低于超微粉（P<0.01）。何春龍等[10]通過比較靈芝超微粉、普通粉以及其提取物三萜類成分之間指紋圖譜的差異，發現靈芝藥材超微粉碎后，三萜類成分種類數目并未改變但單位質量相對峰面積積分值均明顯提高。本研究通過苯酚-硫酸測定法發現超微鐵皮石斛能夠顯著提高粗多糖浸出量，對鐵皮石斛的臨床應用和產品研發具有重要的指導意義。

4 ? ?參考文獻

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[10] 何春龍，張屏，鞠愛華，等.靈芝超微粉、普通粉和靈芝提取物高效液相色譜指紋圖譜的比較研究[J].中華中醫藥雜志，2017，32（2）：575-578.