鴨蛋卵清蛋白的結構、組成分析及其功能活性研究

王 倩,賀 萍,林如歌,曾凡珂,劉 琪,賴富饒,*,張曉元,吳 暉,,*

(1.華南理工大學食品科學與工程學院,廣東廣州 510640;2.韶關市華工高新技術產業研究院,廣東韶關 512027)

新鮮鴨蛋中蛋清約占全蛋重量的57%,蛋白質含量為10%～13%,脂肪含量約為0.25%,碳水化合物約為1.8%、無機鹽0.7%。另外還含有尼克酸、核黃素、生物素等多種營養物質[1]。鴨蛋蛋清中的蛋白質可分為40多種,主要為糖蛋白,其中卵清蛋白占54%、卵轉鐵蛋白占12%,類卵黏蛋白占11%,卵黏蛋白占3.5%,溶菌酶占3.5%。鴨蛋的營養價值與雞蛋相當,含有人體必需氨基酸,屬于全價蛋白[2],卞立紅[3]對市售各種蛋類蛋品質進行分析發現,鴨蛋蛋清在鴨蛋中相對重量為52.76%、在放置15 d后蛋白含量仍然有6.7 g/100 g,具有較好的營養價值。周有祥[1]的研究表明鴨蛋蛋的蛋白質水平與雞蛋相當,礦物質水平較高,而粗脂肪含量更低,鮮鴨蛋可以作為雞蛋的有益補充,秦婧[4]報道了卵清蛋白具有抗氧化、降血壓、免疫調節、血管緊張抑制等生物生理功能,鴨蛋卵清蛋白含量高,營養價值好,還具有抗氧化等生物活性,具有較好的研究價值。

文獻中報道的卵清蛋白主要純化方法如鹽沉淀法、等電點沉淀法、聚乙二醇分離、液相色譜法、分子排除液相色譜、超濾、吸附等,硫酸銨沉淀蛋白質的方法因其步驟簡單高效的優點仍被廣泛應用。傅冰[5]將雞蛋清原液用pH9.00的Tris-HCl緩沖液稀釋,后用60%飽和度的硫酸銨沉淀分離卵清蛋白,操作簡便純度高。聞崇煒[6]利用不同pH下聚乙二醇(Polyethylene glycol,PEG)對蛋清中卵清蛋白、卵轉鐵蛋白、溶菌酶三種蛋白的的沉淀效率,采用連續分離法分離出三種蛋白。Patrick[7]、Settu[8]、Omana[9]報道了利用卵清蛋白和溶菌酶、卵轉鐵蛋白在不同的水溶性兩相系統中分配系數的差異,從而達到純化目標蛋白的方法。Dileep[10]采用陰離子交換色譜法從蛋清中連續分離出了卵清蛋白、卵轉鐵蛋白、溶菌酶等組分,采用鹽析法價格低廉且操作簡便,在文獻中多有報道。

目前,關于禽蛋卵清蛋白的研究主要集中在蛋白的理化性質改良、卵清蛋白的致敏、禽蛋貯運保鮮、酶解制備生物活性肽等方面。Tang[11]研究了磷酸化對卵清蛋白的表面特性和乳化性的影響,發現磷酸化程度的增加使得卵清蛋白的粒徑減小,從而提高了其乳化能力。Flavia等[12]利用熱處理卵清蛋白,制備出一種作為多不飽和脂肪酸的納米載體的自組裝納米顆粒。郭立華[13]研究了卵清蛋白與Fe3+進行螯合形成一種新型復合物,可以充當補鐵制劑。Siriporn等[14]采用陰離子交換色譜法對鴕鳥蛋清中的主要成分卵清蛋白(OOW)進行了純化,再進行40 ℃堿性水解8 h后的產物其ACE抑制活性最佳,IC50值為63.97 μg/mL。雖然關于雞蛋卵清蛋白和鴨蛋蛋清蛋白的報道很多,但是對于鴨蛋卵清蛋白本身的結構研究和活性研究并不多見。本文主要比較了三種提取鴨蛋卵清蛋白的方法,并分析了鴨蛋卵清蛋白的二級結構和營養學評價,最后對其免疫活性、抗氧化活性進行了探究,以期為鴨蛋卵清蛋白的應用提供理論基礎。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

新鮮鴨蛋 采購于五山農貿市場;OVA標準品(純度≥95%)、大豆分離蛋白(SPI)(BR級)、Trolox、熒光素鈉、2,2′-偶氮(二異丁基脒)二鹽酸鹽(AAPH) 上海源葉生物科技有限公司;RAW264.7細胞 為本實驗室保存;硫酸銨、PEG 4000 分析純,國藥集團化學試劑有限公司;1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、2,2′-聯氮雙(3-乙基苯并噻唑啉)二胺鹽(ABTS) Sigma公司。

KDN-102F半自動定氮儀 上海纖檢儀器公司;Infinite M1000 Pro酶標儀 瑞士Tecan公司;Avatar-370型傅立葉變換紅外光譜儀 美國Nicolet公司;J-815型CD儀 日本JASCO公司;Heracell 150i二氧化碳培養箱 美國Thermo fisher scientific;日立L-8900氨基酸分析儀 日本日立。

1.2 實驗方法

1.2.1 卵清蛋白提取方法的探究 參照秦婧[4]、岳喜慶[15]、宋宏新等[16]的方法略做修改。首先取300 g鴨蛋蛋清將其均分為三組,命名為A、B、C,分別進行如下處理。

A組、B組均用5倍水稀釋后,分別調節其pH為9.00、4.50,之后置于磁力攪拌器中以20 r/min的速度攪拌30 min后,緩慢加入硫酸銨至溶液飽和度60%,攪拌30 min,4 ℃冰箱靜置6 h,8000 r/min離心10 min后取沉淀,放入Mw為3000 Da的透析袋中透析,凍干后稱重計算得率后置于-20 ℃冰箱中保存備用。

C組用2倍水稀釋后,調節pH到7.50,8000×g離心20 min,在上清液中緩慢加入50%的PEG 4000貯存液至其質量分數為12%,8000×g離心20 min,去上清液,pH調至5.50,8000×g離心20 min收集上清,凍干后稱重計算得率后置于-20 ℃冰箱中保存備用。

1.2.2 蛋白含量的測定及得率的計算 參照GB/T 5009.5-2016《食品安全國家標準食品中蛋白質的測定》中的凱式定氮法[17]。

得率(%)=提取后蛋白質量/(蛋清質量×0.54×0.1)×100

1.2.3 蛋白分子量和純度測定 SDS-PAGE電泳法[18]。取10 μL樣品,加入2 μL的上樣緩沖液,煮沸后進行點膠,分離膠12%、濃縮膠5%,電壓80 V/120 V。用染色液考馬斯亮藍R-250振蕩染色2 h,然后過夜脫色。

1.2.4 蛋白的氨基酸組成和營養成分分析 取一定量的蛋白,加入5 mL 6 mol/L的 HCl,在105 ℃水解 24 h。將水解樣品定容到50 mL,取3 mL在60 ℃干燥后溶解在1 mL的樣品緩沖液中,過0.22 μm濾膜后裝入液相小瓶中采用全自動氨基酸分析儀測定。

1.2.5 蛋白的FT-IR分析 將2 mg鴨蛋卵清蛋白與200 mg KBr充分混勻,壓片,置于紅外光譜儀的變溫附件中于 4000～500 cm-1范圍內掃描。

1.2.6 圓二色譜分析 將鴨蛋卵清蛋白配制成500 μg/mL溶液,過0.45 μm濾膜,取200 μL進行檢測。掃描波長為190～260 nm,譜帶寬度為1.0 nm,掃描速率100 nm/min,連續掃描3次取平均值。

1.2.7 掃描電鏡 取1 mg蛋白固定在托盤上后,用噴金儀對樣品進行噴金,接著在電鏡下進行掃描拍照,觀察蛋白表面形貌。

1.2.8 蛋白的免疫活性評價 參考Wu[19]的方法。將細胞濃度為1×106個/mL的RAW 264.7細胞細胞懸液接種于96孔板中(100 μL/孔),置于CO2培養箱培養24 h后,吸去培養基,加入100 μL不同濃度(1000、500、250、125和62.5 μg/mL)的鴨蛋卵清蛋白溶液,陽性對照組為20 μg/mL的LPS,空白組為DMEM培養基,再培養24 h后收集細胞上清液,用試劑盒分別檢測細胞上清液中NO和細胞因子TNF-α和IL-6的表達量。

1.2.9 蛋白的抗氧化活性評價

1.2.9.1 DPPH·清除能力 參考You等[20]的方法。取樣品稀釋液2 mL,加入2 mL 0.2 mmol/L DPPH乙醇溶液混勻,室溫避光反應30 min后用溶劑作空白對照在517 nm波長測定吸光度,以Trolox作為陽性對照。

DPPH·清除率(%)=[1-(OD樣品-OD空白)/OD空白]×100

1.2.9.2 ABTS·清除能力 參考Zhang[21]等的方法,略作修改。取200 μL樣品稀釋液液加入2 mL ABTS+·反應液混合均勻,室溫下避光反應30 min后,在734 nm下測定其吸光值。以Trolox作為陽性對照。

ABTS+·清除率(%)=[1-(OD樣品-OD空白)/OD空白]×100。

1.2.9.3 ORAC 法測定樣品抗氧化能力 參考王光[22]的方法略作修改,在96孔板中加入25 μL樣品(濃度分別為1000、500、250、125、62.5 μg/mL)、403.2 nmol/L熒光素鈉25 μL,37 ℃條件下預熱5 min后迅速在各孔中加150 μL 17.07 mmol/L的AAPH啟動反應,在37 ℃條件在485 nm/338 nm下進行連續測定2 h,每5 min讀取一次各微孔熒光值。以Trolox作為陽性對照,同時設定只加熒光素鈉的熒光自然衰減組對照、加蒸餾水的空白對照組。

ORAC值=[(AUCsample-AUC+AAPH)/(AUCTrolox-AUC+AAPH)]×(molarity of Trolox/concentration of sample)。

1.3 數據處理

所有試驗均做3組平行,結果以平均值±標準方差(mean±SD)表示。采用Origin 8.5、SPSS 17.0進行結果統計。實驗數據采用ANOVA進行Ducan’s差異分析,P<0.05表示差異顯著,P<0.01表示差異極顯著。

2 結果與分析

2.1 卵清蛋白的蛋白含量分析

采用半自動凱式定氮儀測定A、B、C三種方案提取出的卵清蛋白中總氮的含量,其結果分別為84.59%±3.61%、86.75%±4.12%、62.91%±2.04%,采用方案A、B即硫酸銨沉淀法的蛋白含量與李健[23]的卵清蛋白中總氮含量86%接近,但是采用方案C即PEG 4000提取法得到的樣品中蛋白含量僅為62.91%,根據聞崇煒[6]的報道,推測其原因可能是用PEG 4000沉淀卵清蛋白時有PEG 4000殘留,從而導致總氮含量偏低。干燥后稱重,A、B、C三種方法提取蛋白得率分別為85.32%±2.98%、86.17%±2.69%、97.11%±3.05%。

2.2 卵清蛋白分子量和純度測定

由圖1可知,A、B、C三種方法提取得到的卵清蛋白的電泳圖譜與OVA標準品SDS-PAGE圖譜分布相同,條帶均集中于45.0、66.2 kDa,且無其他雜帶,說明制備的鴨蛋卵清蛋白的純度與實驗所用的標準品近似,達到了90%以上。此電泳圖分布與聞崇煒[8]報道的聚乙二醇提取卵清蛋白,秦婧[4]、李健[23]報道的鹽析法分離卵清蛋白的圖譜分布一致,表明本研究制備的卵清蛋白純度較好。且由2.1可知,采用pH4.50、硫酸銨飽和度60%進行提取的方案B的總氮含量高、蛋白得率高,電泳圖與OVA標準品最接近,后續采用該方法進行鴨蛋中卵清蛋白的提取。

圖1 樣品SDS-PAGE圖譜

2.3 蛋白的氨基酸組成和營養成分分析

大豆分離蛋白(SPI)是一種商用化的蛋白,其氨基酸種類有近20種,含有人體所必需的8種氨基酸,且組成比例接近FAO/WHO推薦模式,營養豐富,是植物蛋白中為數不多的可替代動物蛋白的品種之一,常用于標準蛋白進行營養評分比較,吳麗英等[24]比較了瑪咖蛋白與SPI、酪蛋白的營養評分。鴨蛋卵清蛋白的氨基酸組成見表1,與大豆分離蛋白(SPI)相比,本實驗提取的鴨蛋卵清蛋白的必需氨基酸總含量超過了SPI,其中蛋氨酸(Met)、纈氨酸(Val)、苯丙氨酸(Phe)、絲氨酸(Ser)、半胱氨酸(Cys)的含量均高于SPI,有研究表明,含硫氨基酸(Met、Cys)可以促進機體生長,促進腸道黏膜的生長發育,促進腸道對營養物質的吸收[25]。鴨蛋中卵清蛋白的含硫氨基酸含量顯著高于SPI,為SPI的6.7倍,且E/N、E/T比值均高于SPI,這表明鴨蛋卵清蛋白營養評分高于SPI。大豆蛋白的第一限制性氨基酸是含硫氨基酸,而這正是鴨蛋卵清蛋白所富含的。鴨蛋中卵清蛋白的第一限制性氨基酸為亮氨酸。與陶志云[26]研究的高郵鴨蛋和金定鴨蛋中蛋清的氨基酸數據進行比較,兩種鴨蛋蛋清中必需氨基酸占總氨基酸總量(E/T)分別為43.79%、43.68%、必需氨基酸與非必需氨基酸的比值(E/N)分別為0.77、0.75,此結果略低于與本實驗E/T為0.44、E/N為0.81,推測原因是鴨蛋蛋清中卵清蛋白為主要蛋白質,因此提取出的鴨蛋卵清蛋白在營養評分上與鴨蛋蛋清評分相同。

表1 鴨蛋卵清蛋白的氨基酸組成(g/100 g蛋白質)

對比FDA/WHO發布的2～5歲兒童限制性氨基酸推薦值,可以發現在限制性氨基酸中,蘇氨酸(Thr)、賴氨酸(Lys)、組氨酸(His)3種氨基酸的含量接近于推薦值,而其余5種必需氨基酸均高于推薦值,異亮氨酸(Ile)、亮氨酸(Leu)、蛋氨酸(Met)、纈氨酸(Val)、苯丙氨酸(Phe)的含量分別是推薦值的1.25倍、2.44倍、3.08倍、2.72倍、4.95倍,因此可將鴨蛋卵清蛋白作為部分兒童的輔食,增強兒童營養健康。

2.4 蛋白的二級結構分析

2.4.1 鴨蛋卵清蛋白的FT-IR分析 鴨蛋卵清蛋白的FT-IR光譜見圖2,在1539和1391 cm-1的吸收峰分別是肽鏈官能團-HN-C=O的反式構型和順式構型的吸收峰,且1539 cm-1吸收峰強度較高,說明反式構型存在的比例大。有文獻報道反式構型的能量比順式構型低,穩定性強[27],在天然蛋白中比例更大,這表明提取出來的卵清蛋白在提取過程中沒有遭到破壞,保持了它本身的天然構象。

蛋白紅外光譜的酰胺Ⅰ帶位于1600～1700 cm-1,由于蛋白質的三種二級結構(α-螺旋,β-折疊和無規卷曲)的酰胺I振動區域在1645～1680 cm-1范圍內彼此交壘,很難進行定量的解析。且極易受到水分子的干擾,定量解析各種二級結構的含量比較困難。因此,對其酰胺Ⅲ帶進行進一步的分析[27],蛋白紅外光譜的酰胺Ⅲ帶位于1220～1330 cm-1,其中,α-螺旋為1290～1340 cm-1,β-折疊為1220～1248 cm-1,β-轉角為1265～1290 cm-1,無規卷曲為1245～1270 cm-1。從圖2可以看出,鴨蛋卵清蛋白在酰胺Ⅲ帶1237 cm-1有吸收,為β-折疊結構,里面可能還含有無規卷曲結構。在1320 cm-1有一個小吸收峰,分析其屬于α-螺旋結構,因此初步判斷鴨蛋卵清蛋白至少含有β-折疊、無規卷曲結構、α-螺旋三種二級結構。

圖2 鴨蛋卵清蛋白樣品的紅外光譜分析

2.4.2 鴨蛋卵清蛋白的圓二色譜分析 蛋白質由于其氨基酸的α-C不對稱性和主鏈構象的不對稱而具有光學活性。蛋白質稀溶液在近紫外區和遠紫外區譜帶位置和吸收強弱可以反應出蛋白質的二級結構和三級結構。卵清蛋白在遠紫外區(190～260 nm)的圓二色譜光譜圖如圖3所示。根據吳麗英[24]的報道,CD譜包含了豐富的二級結構信息。最大吸收峰在220 nm處,在222、208 nm處出現了負峰,為α-螺旋的特征峰,在195～198 nm處正峰為無規則卷曲特征峰。將數據導入CD pro軟件,預測二級結構比例,鴨蛋卵清蛋白中四種二級結構分布為:α-螺旋、15.06%,β-折疊、24.69%,β-轉角、25.63%,無規則卷曲、33.83%。此預測結果與FT-IR所得蛋白二級結構基本一致。

圖3 鴨蛋卵清蛋白樣品的圓二色譜分析

2.4.3 掃描電鏡分析 掃描電鏡可以看出蛋白質的分子微觀結構。從圖4對鴨蛋卵清蛋白分子微觀形態的觀察可知,卵清蛋白具有較大的片狀結構,表面均勻光滑。此結構與前人文獻中報導的豌豆清清蛋白[28]、核桃分離蛋白[29]的表面結構相似,屬于清蛋白典型微觀結構。

圖4 鴨蛋卵清蛋白樣品的掃描電鏡分析

2.5 蛋白的免疫活性評價

當機體受到外來物質入侵時,巨噬細胞可以通過分泌細胞因子來清除外來物質,也可以通過趨化因子受體將更多的細胞趨化至炎癥部位,通過分泌炎癥因子來參與炎癥反應[30-32]。不同濃度的鴨蛋卵清蛋白對NO產量的影響見圖5A。鴨蛋卵清蛋白在不同濃度下促進細胞產生NO的能力均顯著優于空白組(P<0.05),且分泌量呈濃度遞增趨勢,當濃度達到1000 μg/mL時,NO分泌量達到13.84 μmol/L,而LPS陽性對照組的分泌量為20.94 μmol/L,與麥胚谷蛋白[19]相比,其在200 μg/mL時NO的分泌量為14.82 μmol/L,而LPS組的分泌量約為36 μmol/L,NO分泌量隨濃度變化趨勢與本實驗一致,表明鴨蛋卵清蛋白具有促進NO分泌的能力。推測NO分泌量略低于麥胚谷蛋白的原因可能是RAW 264.7細胞經多次傳代培養后活力降低,并且有文獻報道免疫活性與疏水性有關[33],本實驗中鴨蛋卵清蛋白中疏水性氨基酸含量(38.26 g/100 g)也較低,因而出現NO分泌量較低的結果。

巨噬細胞受到外來的刺激時可產生IL-6和TNF-α等促炎因子來發揮炎癥反應[34],由圖5B、5C可知,RAW 264.7細胞上清液中TNF-α、IL-6濃度具有相同的變化趨勢,分泌量隨濃度增加而顯著上升(P<0.05),且與空白組具有顯著差異(P<0.05),表明鴨蛋卵清蛋白刺激下,巨噬細胞能顯著分泌細胞因子,參與炎癥反應。當樣品濃度達到1000 μg/mL時,TNF-α分泌量達到(1008.17±26.93) pg/mL,IL-6分泌量為(421.33±5.22) pg/mL,與LPS陽性對照組TNF-α分泌量(1648.60±37.81) pg/mL、IL-6分泌量(914.23±4.61) pg/mL均差異顯著(P<0.05),表明鴨蛋卵清蛋白引起的炎癥反應沒有LPS劇烈。Zhang[30]研究的瑪卡糖蛋白在500 μg/mL時TNF-α分泌量約為1500 pg/mL,而He[31]研究的東革阿里多糖在1000 μg/mL時TNF-α分泌量約為1200 pg/mL,與本實驗的TNF-α分泌量相當,表明鴨蛋卵清蛋白與這些樣品一樣具有一定的免疫調節活性。實驗提取的鴨蛋卵清蛋白能促進小鼠巨噬細胞中NO、促炎因子TNF-α、IL-6的分泌,且顯著高于空白組(P<0.05),表明鴨蛋卵清蛋白具有激活巨噬細胞來調節細胞免疫反應的潛能。

圖5 鴨蛋卵清蛋白對RAW 264.7產細胞因子的影響

2.6 蛋白的抗氧化活性評價

樣品清除DPPH·和ABTS+·的結果見表2。由表2可知,DPPH·和ABTS+·清除率均存在著劑量效應,當樣品濃度到2000 μg/mL時,DPPH·清除率為26.12%±2.20%,低于陽性對照,可能是因為DPPH·清除能力與蛋白的疏水性以及其在介質中的分散性間的平衡有關[35],本實驗提取的鴨蛋卵清蛋白的疏水性氨基酸含量相對較低(38.26 g/100 g),而顯示出較弱的DPPH·清除能力。而樣品濃度達到2000 μg/mL時ABTS+·清除率達到57.05%±4.88%,高于陽性對照組Trolox,表明鴨蛋卵清蛋白在水溶性體系中的具有更好的清除自由基能力。

表2 鴨蛋卵清蛋白的抗氧化活性

ORAC分析是體外測定抗氧化能力的一種重要的評價手段。按照公式計算,鴨蛋卵清蛋白的ORAC值為(0.3148±0.0121) μmol/L TE/mg。You[20]報道的雞蛋溶菌酶酶解產物的ORAC值在0.387～2.774 μmol/L TE/mg之間,略微高于本研究的結果,推測其原因可能是酶解之后一些疏水性強的小肽被釋放出來,從而可以更好地淬滅氧自由基,顯示出較高的ORAC值。

綜合表2和圖6的結果可知,樣品具有較好的ABTS+·清除能力和較高的ORAC值,但是DPPH·清除率很低,分析其原因可能是鴨蛋卵清蛋白中的疏水性氨基酸含量只占總量的38.26%,其更容易與水溶性體系ABTS+·反應,而與脂溶性體系DPPH·的反應較慢[20],表明鴨蛋卵清蛋白可在親水性體系中發揮較好的抗氧化活性。

圖6 不同濃度樣品的化學抗氧化能力指數(ORAC)

3 結論與討論

本文研究了鴨蛋中的卵清蛋白提取的三種方法,用凱式定氮法測量總氮,SDS-PAGE檢驗了蛋白的純度,與標準品進行比對后,發現采用pH4.50、硫酸銨濃度60%的沉淀法獲取的鴨蛋卵清蛋白圖譜與標準品最接近,無其他雜帶,且與秦婧[4]、李健[23]等的圖譜一致,表明提取出的鴨蛋卵清蛋白純度較好,采用pH9.00進行提取的方案A的SDS-PAGE條帶與pH4.50進行提取的方案B的SDS-PAGE條帶近似,說明采用不同的pH對于卵清蛋白的提取影響不大,但是pH9.00方案的蛋白得率和純度略微低于pH4.50方案,推測原因是卵清蛋白的等電點為4.50,而蛋清蛋白的pH為9左右,因為在pH4.50時會有更多的卵清蛋白沉淀下來,因而得率較高。

對制備的鴨蛋卵清蛋白的氨基酸組成分析可知,其E/N、E/T比值均高于SPI,與陶志云[26]對兩種鴨蛋蛋清中E/T比值(43.79%、43.68%)、E/N比值(0.77、0.75)相比,與本實驗E/T為0.44、E/N為0.81結果近似,表明鴨蛋卵清蛋白與鴨蛋蛋清蛋白一樣具有較好的營養值,推測其原因是鴨蛋蛋清中卵清蛋白為主要蛋白質,因此提取出的鴨蛋卵清蛋白在營養評分上與鴨蛋蛋清評分相同。

對鴨蛋卵清蛋白進行活性分析,發現鴨蛋卵清蛋白能顯著提高小鼠巨噬細胞上清液中NO、TNF-α、IL-6的分泌量(P<0.05),且低于LPS組,表明鴨蛋卵清蛋白可以通過激活巨噬細胞來調節免疫反應,在抗氧化模型中,鴨蛋卵清蛋白的ORAC值為0.3148±0.0121 μmol/L Trolox TE/mg,而2000 μg/mL的樣品的ABTS+·清除率57.05%±4.88%,高于Trolox組,但DPPH·清除率26.12%±2.20%,低于Trolox組。推測出現這種實驗結果的原因可能是鴨蛋卵清蛋白中疏水性氨基酸含量為38.26 g/100 g,而DPPH體系為脂溶性體系,ABTS+·體系為水溶性體系,因而會在溶解度更高的ABTS+·體系中清除率更高,后續實驗也將對鴨蛋卵清蛋白酶解成小分子肽段,進一步提高其抗氧化活性和免疫調節活性。