鹽酸普拉克索片的處方工藝與質量控制

孟晨晨,高威風,李蒙蒙,魏 惠,程鐵峰

河南大學 藥學院,河南 開封475004

鹽酸普拉克索(Pramipexole dihydrochloride)是一種非麥角類衍生物,有保護神經多巴胺的作用,可用于治療帕金森病的整個階段到疾病的晚期[1-3]。鹽酸普拉克索能夠改善早期及晚期的帕金森病運動癥狀,并能有效緩解帕金森病所伴發的抑郁[4-5],是國內外治療帕金森病的首選藥物[6-7]。目前,臨床上所使用的鹽酸普拉克索片規格為0.25 mg和1.0 mg。主藥在處方中所占含量較低,常規的混合方法很難使主藥與輔料均勻地混合。因此我們通過等量遞加法和溶劑分散法分別制備了鹽酸普拉克索片。為有效控制制劑含量,建立了高效液相色譜法對其含量均勻度和溶出度進行測定。

1 儀器和試藥

1.1 儀器

高效液相色譜儀(LC-20AT,日本島津公司),UV-2600紫外可見分光光度計(日本島津公司),智能溶出試驗儀(ZRC-8D,創興電子設備制定有限公司),電子分析天平(CP214,奧豪斯儀器有限公司),旋轉式壓片機(ZP17E,上海天和制藥機械公司),電熱恒溫鼓風干燥箱(DHG-9140A,上海一恒科技有限公司),片劑硬度測定儀(YDP-200C,黃海藥檢儀器有限公司)以及超聲波清洗器(寧波新芝生物科技股份有限公司)等。

1.2 試藥

鹽酸普拉克索(武漢江民華泰醫藥有限公司),乳糖、淀粉、微粉硅膠、聚乙烯吡咯烷酮(PVP K30)等輔料(湖州展望藥業有限公司),磷酸二氫鉀、氫氧化鈉(分析純,天津基準化學試劑有限公司),三氟乙酸、三乙胺(阿拉丁公司),乙腈(天津四友精細化學品有限公司)和蒸餾水等。

2 方法與結果

2.1 處方工藝研究

2.1.1 溶劑分散法稱取一定量的鹽酸普拉克索、乳糖、淀粉、微粉硅膠,分別過100目篩。取過篩后的鹽酸普拉克索加入到適量體積分數為50%乙醇中溶解,然后加入到已經混合均勻的乳糖和淀粉中充分混合均勻后,再加入配好的8%PVP K30水溶液黏合劑；過40目篩制粒,于50℃烘箱中烘干1 h后整粒；最后加入潤滑劑于制備好的顆粒中混合均勻,壓制成每片0.1 g,規格0.25 mg。

2.1.2 等量遞加法

稱取一定量的鹽酸普拉克索、乳糖、淀粉、微粉硅膠,分別過100目篩。將過篩后的乳糖和淀粉充分攪拌混合均勻,取鹽酸普拉克索及等量混合均勻的乳糖和淀粉加入混合均勻,再取等量的乳糖和淀粉加入混合均勻,直至加完處方量的乳糖和淀粉；再加入體積分數為50%的乙醇溶液及配好的PVP K30水溶液黏合劑,過40目篩制粒,在50℃烘箱中烘干1h后整粒；最后加入潤滑劑于制備好的顆粒中混合均勻,壓制成每片0.1 g,規格0.25mg。

2.2 鹽酸普拉克索含量分析方法的建立

參考有關文獻[8-12],本研究通過多次試驗建立了高效液相色譜法對兩種方法制備的鹽酸普拉克索片進行含量均勻度、溶出度的測定。

2.2.1 檢測波長的確定

用磷酸鹽緩沖溶液分別配制適量濃度的鹽酸普拉克索溶液和除鹽酸普拉克索之外的輔料溶液,在200～400nm范圍內進行紫外掃描,確定檢測波長。結果見圖1。

圖1 鹽酸普拉克索及輔料的紫外掃描圖譜

由圖1知,鹽酸普拉克索在264 nm處有明顯的紫外吸收,而輔料在264 nm處無紫外吸收,對其無干擾,因此選擇264 nm作為鹽酸普拉克索的檢測波長。

2.2.2 色譜條件

色譜柱：Agilent SB-C18(4.6 mm×150 mm,5μm)；流動相：三氟乙酸-三乙胺緩沖液(每1 L中含三氟乙酸0.9 m L、三乙胺0.5 m L)∶乙腈(94∶6)；進樣量：100μL；流速：1 m L/min；柱溫：30℃；檢測波長：264 nm；理論塔板數按照鹽酸普拉克索計算不低于3 000。

2.2.3 專屬性考察

取適量的除原料藥之外的輔料溶液,過0.22μm的微孔濾膜,取續濾液,即得陰性對照試液。按照2.2.2項下的色譜條件進樣測定,記錄色譜峰,結果見圖2。

精密稱取一定量的鹽酸普拉克索原料藥,轉移到容量瓶中,用配制好的磷酸鹽緩沖液溶解后定容到刻度線,過0.22μm微孔濾膜,取續濾液,即得樣品溶液。按照2.2.2項下的色譜條件進樣測定,記錄色譜峰,結果見圖3。

圖2 陰性對照高效液相圖譜

圖3 鹽酸普拉克索樣品高效液相圖譜

由圖3知,在2.2.2的色譜條件下鹽酸普拉克索的保留時間在4.0～4.5 min之間,峰型較好,分離度較高?？瞻纵o料溶液的色譜圖上無色譜峰出現,表明空白輔料對鹽酸普拉克索的含量測定無干擾,專屬性良好。

2.2.4 標準工作曲線的繪制

精密稱取10 mg的鹽酸普拉克索原料藥,轉移到100 m L的容量瓶中,用配制好的磷酸鹽緩沖液溶解后定容到刻度線,即得濃度為100μg/m L的標準儲備液,分別精密量取鹽酸普拉克索標準儲備液20μL、50μL、100μL、300μL、500μL、1 m L轉移至10 m L的容量瓶中,用溶劑定容至刻度線并搖勻,即得0.2μg/m L、0.5μg/m L、1μg/m L、3μg/m L、5μg/m L、10μg/m L的溶液,分別取適量不同濃度的溶液,過0.22μm微孔濾膜,在2.2.2色譜條件下進樣測定。將濃度(X)作為橫坐標,對應的峰面積(Y)作為縱坐標并繪制標準曲線,見圖4。得到鹽酸普拉克索標準曲線方程為

表明了鹽酸普拉克索在0.2～10μg/m L濃度范圍內線性關系良好。

圖4 鹽酸普拉克索標準曲線

2.2.5 含量測定分析方法的建立

本實驗選擇高效液相方法對鹽酸普拉克索進行含量測定,建立的高效液相方法精密度RSD為0.86%、重復性RSD為0.98%、穩定性RSD為1.21%、方法回收率為98.63%、RSD為0.6%,RSD均小于2%。說明該方法精密度良好、重復性好、穩定性高、且峰型對稱,可用于快速檢測鹽酸普拉克索片的含量均勻度和溶出度。

2.3 鹽酸普拉克索片質量檢查

2.3.1 含量均勻度的測定

按照中國藥典2015年四部通則中含量均勻度檢查法檢查,取供試品10片,照各品種項下規定的方法,分別測定每一個單劑以標示量為100的相對含量xi,求其均值X-和標準差S以及標示量與均值之差的絕對值A。

如A+2.2S≤15.0,則供試品的含量均勻度符合要求。

表1 含量均勻度測定

由表1可知,溶劑分散法與等量遞加法制得的鹽酸普拉克索片的含量均勻度均符合中國藥典的規定。等量遞加法制備的鹽酸普拉克索片所測得的含量明顯高于溶劑分散法所制備的鹽酸普拉克索片。從平均含量、標準差及含量均勻度來分析比較,等量遞加法相較于溶劑分散法優越。

2.3.2 溶出度的測定

通過溶出度測定法(中國藥典2015年版四部通則第一法),取本品以枸櫞酸鹽/磷酸鹽緩沖液(p H 6.8)500 m L作為溶出介質,轉速為50 r·min-1,按照方法操作,分別在1、3、10、30、60、120 min吸取1 m L,隨即進行同時補液1 m L,將所取試液濾過,取續濾液作為供試品溶液。按照2.2.2項測量溶出度,計算每片的溶出量,繪制溶出曲線,結果見圖5。

圖5 溶出曲線圖

由圖5可以看出,兩種方法制得的鹽酸普拉克索片在60 min內的溶出行為能很好地反應出不同工藝之間的差別。在前5 min內,可以看出溶劑分散法相較于等量遞加法的溶出較多,10 min～30 min時間內溶劑分散法的溶出速率較快,30 min之后兩種方法制備的鹽酸普拉克索片的溶出度均趨于平衡狀態,60 min時兩種方法制備的鹽酸普拉克索片均達到了85%以上。

3 結論

目前臨床上所應用的鹽酸普拉克索片規格為0.25 mg和1.0 mg。主藥在處方中所占含量較低,常規的混合方法很難使主藥與輔料混合均勻。本研究通過兩種方法成功制得鹽酸普拉克索片,并且建立的高效液相色譜法精密度良好、重復性好、且峰型對稱?？捎糜诳焖贆z測鹽酸普拉克索片的含量均勻度和溶出度,并進行有效的質量控制。