發酵飼料對大午金鳳蛋雞生產性能、蛋品質和抗氧化能力的影響

■易春霞 劉曉蘭 王 燕 董 原

（齊齊哈爾大學食品與生物工程學院，黑龍江齊齊哈爾161006）

我國玉米產量居世界第二位，近10多年來，我國玉米深加工產能擴張迅速，深加工量（含飼料加工）年均增長11%。玉米深加工副產物玉米黃粉和玉米胚芽粕產量大，目前主要作為飼料使用。玉米黃粉蛋白質含量高，但是主要以醇溶蛋白為主，水溶性差，且氨基酸組成不平衡，適口性差，直接作為飼料使用蛋白質消化利用率低。玉米胚芽粕蛋白質含量低且粗纖維含量較高，限制了其在單胃動物飼料中的應用[1-3]。

微生物發酵飼料通過微生物的菌體繁殖和代謝，將飼料中的大分子物質和抗營養因子進行分解或轉化，含有高活性益生菌及其代謝產物[4]。微生物發酵飼料具有提高飼料消化利用率，改善畜禽生產性能，促進動物腸道健康和具有替抗潛力等優點，在蛋雞養殖中廣泛應用[5-7]。黃竹等[8]研究結果表明，在基礎日糧中添加不同比例的玉米-豆粕發酵飼料，可在一定程度上提高海蘭褐蛋雞的生產性能及蛋品質，5%添加水平的效果最佳。丁小青等[9]研究結果表明，以茶渣、豆粕和麩皮為底物的發酵飼料使仙居雞血清超氧化物歧化酶和過氧化氫酶活性顯著升高，丙二醛含量顯著降低，有效改善機體抗氧化能力。

大午金鳳蛋雞具有紅羽產粉殼蛋、啄死淘率低、生產性能穩定、蛋殼顏色好等特點，近幾年在粉殼蛋雞市場占有率大幅提高[10]。以玉米黃粉和玉米胚芽粕為底物的發酵飼料在大午金鳳蛋雞中的應用未見報道。本試驗以玉米黃粉和玉米胚芽粕為底物，采用益生菌發酵制備發酵飼料，研究在玉米-豆粕型日糧中添加發酵飼料對大午金鳳蛋雞生產性能、雞蛋品質和抗氧化能力的影響，旨在為發酵飼料在大午金鳳蛋雞生產中合理利用提供參考依據。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

原料：玉米黃粉購自黑龍江某公司；玉米胚芽粕購自公主嶺某公司；結晶葡萄糖母液購自黑龍江某公司。

菌種：地衣芽孢桿菌、啤酒酵母菌和保加利亞乳桿菌菌種均保藏于齊齊哈爾大學食品學院生物工程實驗室。

1.2 發酵飼料的制備

采用單向閥發酵袋（25 kg）進行生料發酵，裝料量為15 kg/袋，物料配比為玉米黃粉∶玉米胚芽粕=2∶3（w/w），料水比為1∶1（g/ml），總接種量4 ml/100 g濕基，菌液體積比為地衣芽孢桿菌、啤酒酵母菌和保加利亞乳桿菌數量比1∶1∶1，活菌數108cfu/ml，發酵溫度30 ℃，發酵時間4 d。發酵結束后，60 ℃烘干8 h即為發酵飼料（含水量≤10%）。

1.3 試驗設計及飼養飼糧

試驗在齊齊哈爾市齊佳生態養殖場進行，采用單層直形式籠養，自由采食和自由飲水，每天早上8:00和下午16:00 喂食2 次。每天下午16:00 撿蛋1 次，每天清掃雞籠1次。光照時間為每天16 h，溫度控制在21～22 ℃。按正常免疫程序接種免疫。選用健康且產蛋性能相近的56 周齡大午金鳳蛋雞160 只，隨機分成2 組，每組5 個重復，每個重復16 只雞。預飼期7 d，正式試驗期分前期（1～21 d）和后期（22～42 d）共42 d。參照NY/T 33—2004《雞飼養標準》配制日糧。各組飼糧配方及營養水平見表1。對照組飼喂基礎日糧；試驗組：10%發酵飼料替代10 %基礎日糧的配方日糧。

1.4 樣品采集與制備

在試驗第21 d 和第42 d 時，以每組每重復為單位隨機選取6枚雞蛋測定雞蛋品質，每組每重復隨機選取2只健康蛋雞進行翅下靜脈采血，采血前禁食不禁水12 h，每只雞采集5 ml 血液，采用肝素鈉負壓采血管，待血清自然析出后，3 000 r/min 離心10 min，分離出血清，待測血清抗氧化指標。第42 d 時采血后解剖取左側肝臟約2 g 置于無菌試管中，液氮速凍，保存于-80 ℃，待測肝臟抗氧化指標。

1.5 試驗指標和測定方法

1.5.1 發酵飼料營養成分測定

常規營養成分粗蛋白質、粗纖維、氨基酸、鈣、磷和活菌數分別參考中華人民共和國農業行業標準GB/T 6432—1994、GB/T 6434—2006、GB/T 18246—2000、GB/T 6436—2002、GB/T 6437—2002 和GB 4789.2—2016 方法測定[11-16]，可溶性蛋白含量采用Folin-酚法測定[17]。

表1 試驗日糧組成及營養水平（風干基礎）

1.5.2 蛋雞生產性能測定

試驗期間每天按每重復為單位記錄產蛋數量、產蛋重量、投料量和破軟蛋數。并計算1～21 d 和22～42 d平均蛋重、產蛋率、料蛋比、平均日采食量和破軟蛋率。

1.5.3 雞蛋品質指標測定

雞蛋品質指標包括蛋殼強度、蛋殼厚度、蛋殼顏色、蛋黃顏色、蛋白高度、哈氏單位和蛋形指數。分別采用日本Robotmation 公司的EFG-0503 蛋殼強度測定儀、EFT-1601 蛋殼厚度測定儀和EMT7300 多功能蛋品質分析儀測定。

1.5.4 蛋雞抗氧化指標測定

血清用于測定總抗氧化能力（T-AOC）、過氧化氫酶活力（CAT）、丙二醛含量（MDA）、超氧化物歧化酶活力（SOD）和谷胱甘肽過氧化物酶活力（GSH-Px）；肝臟組織液測定T-AOC、MDA、SOD 和GSH-Px。測定過程嚴格按照南京建成生物研究所提供的試劑盒說明書進行測定。

1.6 統計分析

試驗數據運用SPSS 17.0 軟件進行統計，用單因子方差分析進行差異顯著性檢驗，最小顯著差數法（LSD）進行多重比較，結果均以“平均值±標準差”表示，“P＜0.05”作為差異顯著性判斷標準。

2 結果與分析

2.1 發酵前后飼料的營養成分

成分分析是飼料評價的基礎，通過對發酵物的成分分析可以更好地評價其價值和品質，發酵前后的飼料常規成分含量的變化如表2所示。與發酵前相比，發酵后可溶性蛋白含量提高了181.31%，蛋雞第一、第二限制性氨基酸蛋氨酸和賴氨酸含量分別增加了46.42%和26.92%，必需氨基酸總和增加了25.76%；檢測到的17 種氨基酸總和增加了23.47%，活菌數增加了40.19%，差異均顯著（P＜0.05）；粗蛋白質、鈣和磷含量均有增加，粗纖維含量降低了3.92%，差異均不顯著（P＞0.05）。

表2 發酵前后的飼料營養成分變化

2.2 發酵飼料對蛋雞生產性能的分析

生產性能是蛋雞養殖中最關鍵的指標，與經濟效益密切相關。發酵飼料對蛋雞生產性能的影響如表3所示。與對照組相比，試驗組蛋雞試驗前期的平均產蛋率顯著增加（P＜0.05）和破損蛋率顯著降低（P＜0.05）；試驗后期的平均產蛋率增加了3.85%（P＞0.05）；整個試驗期間，試驗組平均采食量有所增加，料蛋比和蛋重略有下降，但無明顯差異（P＞0.05）。

2.3 發酵飼料對雞蛋品質的分析

發酵飼料的添加對雞蛋的品質影響如表4所示，試驗第21 d 時，兩組蛋雞所產雞蛋品質無顯著差異（P＞0.05）；試驗第42 d時，與對照組相比，試驗組蛋雞所產雞蛋的蛋白高度和哈氏單位均顯著提高（P＜0.05），蛋殼厚度顯著下降（P＜0.05）。隨著蛋雞周齡的增加，對照組雞蛋的蛋黃顏色逐漸變淺，而試驗組雞蛋蛋黃顏色逐漸加深。

2.4 發酵飼料對蛋雞抗氧化指標的影響

2.4.1 發酵飼料對蛋雞血清抗氧化指標的影響

發酵飼料的添加對蛋雞的血清抗氧化指標的影響如表5 所示。試驗第21 d 時，與對照組相比，試驗組蛋雞的血清MDA 和CAT 含量顯著降低（P＜0.05）；試驗第42 d 時，與對照組相比，試驗組蛋雞的血清CAT、SOD和GSH-Px含量均顯著增加（P＜0.05）。

表3 發酵飼料對蛋雞生產性能的影響

表4 發酵飼料對蛋品質的影響

表5 發酵飼料對蛋雞血清抗氧化指標的影響

2.4.2 發酵飼料對蛋雞肝臟抗氧化指標的影響

發酵飼料對蛋雞的肝臟抗氧化功效的影響如表6所示，與對照組相比，試驗組蛋雞的肝臟T-AOC、SOD 和GSH-Px 含量都有升高趨勢，但差異均不顯著（P＞0.05）；MDA 含量降低了35.37%，差異不顯著（P＞0.05）。

表6 發酵飼料對蛋雞肝臟抗氧化指標的影響

3 討論

3.1 發酵對物料營養成分的影響

發酵飼料的營養成分受所用菌種和發酵參數的影響。本試驗中，采用單向閥發酵袋作為發酵介質，結合了好氧菌和厭氧菌的發酵優勢，在發酵過程中微生物快速大量繁殖，使得發酵飼料中活菌數顯著增加和粗蛋白質含量有所提高；微生物代謝過程中產生蛋白酶將大分子蛋白質水解成小分子的小肽和游離氨基酸，使得蛋氨酸、賴氨酸、必需氨基酸和總氨基酸含量顯著增加，改善了飼料中玉米黃粉賴氨酸不足和氨基酸組成不平衡的缺點，提高了其蛋白質水溶性，也解釋了可溶性蛋白質含量的增加。地衣芽孢桿菌在發酵過程中分泌纖維素酶，對玉米胚芽粕中部分纖維素進行降解，使得發酵飼料中粗纖維含量降低，提高飼料的利用率。韓國棟等[3]利用枯草芽孢桿菌、啤酒酵母菌和嗜熱乳桿菌混菌固態發酵玉米黃粉、豆粕和麩皮，可溶性蛋白含量由發酵前的59.09 mg/g 提高到發酵后的103.55 mg/g。魏炳棟等[18]利用復合菌發酵玉米黃粉，結果表明總必需氨基酸和總氨基酸含量分別增加了12.58%和12.37%。以上結果與本試驗基本一致。

3.2 發酵飼料的添加對蛋雞生產性能的影響

生產性能是蛋雞養殖中最關鍵的指標，與經濟效益密切相關。產蛋后期，蛋雞因機體退化，免疫力下降等原因，導致產蛋性能下降，蛋品質受損。所以在產蛋后期，如何維持良好的產蛋性能尤其重要[19]。夏圣奎等[20]在蛋雞飼糧中添加2.5%玉米豆粕發酵飼料，結果發現能延緩產蛋率和破蛋率下降幅度，降低次蛋率和死淘率。Linguo Zhao 等[21]將發酵銀杏葉飼料飼喂給海蘭褐蛋雞，發現黑曲霉發酵組和混菌（產朊假絲酵母菌和黑曲霉）發酵組顯著提高產蛋率和飼料轉化率（P＜0.05）。上述的結論與本試驗結果基本一致。

產蛋率是衡量家禽產蛋性能的一個重要指標，蛋雞進入產蛋后期，產蛋率會因為自身的機體退化等加速降低。本試驗表明，添加10%發酵飼料顯著提高了平均產蛋率，隨著蛋雞日齡增加，產蛋率趨于平穩甚至有小增長趨勢，可能原因是發酵飼料中富含益生菌，提高了機體抗氧化和免疫性能，延緩了機體退化，從而穩定了產蛋率。破損蛋主要受飼料營養、蛋自身、環境等因素影響，而飼料營養中對蛋殼質量影響較大的是鈣、磷與維生素D[22]。本試驗表明，在試驗前期飼喂發酵飼料替代豆粕顯著降低了破損蛋率，試驗后期無顯著影響?？赡苁且驗榘l酵飼料中鈣磷含量較高和啤酒酵母菌菌體本身所富含的氨基酸、消化酶、維生素、核糖核酸等有益物質可以提高飼料的消化性和營養價值，從而降低了破損蛋率；而隨著產蛋周期的增加，蛋雞機體受損，破損蛋率都有所增加。料蛋比是衡量家禽養殖經濟效益的一個重要指標，在保證產蛋重量的前提下，料蛋比越低，養殖利潤越大。本試驗表明，飼喂發酵飼料替代基礎日糧對料蛋比有降低作用，可能原因是玉米黃粉和玉米胚芽粕經過益生菌發酵后，飼料中部分大分子蛋白質降解成易吸收的小分子的小肽、游離必需氨基酸等增加了動物采食量，提高了飼料利用率。

3.3 發酵飼料的添加對雞蛋品質的影響

蛋白高度和哈氏單位是衡量蛋白品質的有效指標，數值越大，蛋白黏稠度越高，雞蛋品質越好[8]。研究表明，在蛋雞日糧中添加發酵飼料可以有效提高雞蛋哈氏單位[9，23]。在本試驗中，試驗后期，試驗組雞蛋的蛋白高度和哈氏單位顯著高于對照組。蛋殼強度越大，在運輸中受損幾率越小，蛋的保鮮程度越高。本試驗表明，試驗后期添加發酵飼料使蛋殼厚度均顯著降低，但整個試驗期間，兩組雞蛋的蛋殼強度無明顯差異，這可能是由于隨著蛋雞日齡的增加，蛋雞對鈣的吸收降低，整體蛋殼厚度下降。蛋黃顏色是衡量雞蛋品質的一項重要指標，一般認為蛋黃顏色越黃，營養價值越高，且蛋黃顏色鮮艷或者蛋黃比例大更易受到消費者青睞[24-25]。本試驗表明，兩組雞蛋的蛋黃顏色無顯著差異，但隨著飼喂時間延長，飼喂發酵飼料的雞蛋蛋黃顏色加深，可能原因是玉米黃粉富含葉黃素，而蛋黃的著色程度與飼料中的葉黃素的有效供給量和在蛋雞體內沉積的總量有關[26]。飼喂發酵飼料可以部分改善雞蛋品質，說明發酵玉米黃粉和玉米胚芽粕飼料對蛋雞的養殖具有有利影響。

3.4 發酵飼料對蛋雞抗氧化指標的影響

超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶和過氧化氫酶能共同清除機體活性氧和自由基，減輕和阻止活性氧的過氧化作用[27]?？偪寡趸芰捅┖扛叩涂梢苑从硻C體細胞受自由基攻擊的嚴重程度及機體健康程度[28]。本研究表明，玉米黃粉和玉米胚芽粕經過發酵后對蛋雞的血清抗氧化能力有顯著提高作用，具體表現為試驗前期蛋雞的血清MDA 含量顯著降低，試驗后期蛋雞的血清CAT、SOD和GSH-Px含量顯著增加?？赡苁且驗榘l酵過程中益生菌的生長和微生物降解作用產生的小肽類物質可以提高飼料的抗氧化功能。飼喂發酵飼料可以部分改善蛋雞的肝臟抗氧化功能，說明發酵玉米黃粉和玉米胚芽粕飼料可以有效改善機體抗氧化水平，進而保障蛋雞的健康養殖。

4 結論

本試驗條件下，①玉米黃粉和玉米胚芽粕經過益生菌發酵后營養價值提高。②大午金鳳蛋雞日糧添加10%發酵飼料后，在生產性能方面，可以顯著提高蛋雞產蛋率，對降低料蛋比和破損蛋率有一定效果；在雞蛋品質方面，雞蛋的蛋白高度和哈氏單位顯著提高；在抗氧化指標方面，蛋雞血清抗氧化功效顯著改善，對肝臟抗氧化功效起到積極作用。綜上所述，本試驗結果在一定程度上提高了玉米深加工副產物的附加值，發酵飼料在大午金鳳蛋雞的應用上得到較好的結果，有一定的經濟價值。