兩種檢測系統檢測血清淀粉樣蛋白A的結果比較

孫 麗,張詩海

血清淀粉樣蛋白A(serum amyloid A protein，SAA)是一種急性時相蛋白質，是組織淀粉樣蛋白A 的前體物質。SAA主要有4個基因型，分別表達SAA 1型至4型。人類和小鼠的SAA均由4個外顯子和3個內含子組成，分型依據其空間構型和N末端蛋白序列等[1-2]。SAA 在感染性疾病[3-4]、腫瘤檢測[5]、腦卒中預后[6]、慢阻肺[7]、細胞凋亡[8]等方面均有一定的臨床價值，目前SAA檢測平臺或檢測方法有多種，本文著重比較免疫散射比濁法和免疫熒光層析2種測定法之間的異同點，現作報道。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2016年4月至2019年4月安徽省合肥市第三人民醫院健康體檢者100名(對照組)和住院病人100例(觀察組)為研究對象。納入標準：所選研究對象血清無明顯脂血、溶血。排除標準：健康體檢者近期無感染等癥狀。本研究經醫院倫理委員會批準同意。

1.2 主要儀器及試劑 Astep全自動SAA特定蛋白分析儀采用免疫速率散射比濁法，ABPOCT干式熒光AFS2000A型免疫定量分析儀采用免疫熒光層析法，試劑購自深圳國賽和廣州微米生物有限公司。

1.3 方法 將所有研究對象血清均分別在Astep全自動SAA特定蛋白分析儀和ABPOCT干式熒光AFS2000A型免疫定量分析儀進行檢測，記錄SAA數據。數值分析時，免疫速率散射比濁法小于下限2.5以2.5計，大于上限500的以500計，有數值的以數值計；免疫熒光層析測定法小于下限5以5計，大于上限200的以200計，有數值的以數值計。

1.4 統計學方法 采用t檢驗和χ2檢驗。

2 結果

2.1 兩種檢測方法檢測SAA水平及其敏感度和特異度的比較 觀察組血清用2種方法檢測的SAA水平均高于對照組(P<0.01)；觀察組免疫速率散射比濁法所測SAA值高于免疫熒光層析測定法(P<0.01)，而對照組采用兩種方法所測SAA值差異無統計學意義(P>0.05)(見表1)。按廠家說明書所示:免疫速率散射比濁法SAA<10 mg/L判讀正常，≥10 mg/L判讀陽性；免疫熒光層析<8 mg/L判讀正常，≥8 mg/L判讀陽性。對所有研究對象的SAA水平進行檢測，結果顯示，2種方法的敏感度和特異性差異均無統計學意義(P>0.05)(見表2)。

表1 兩種方法所測SAA水平的比較

表2 兩種方法檢測SAA敏感度及特異度的比較

2.2 健康體檢者采用2種方法所測SAA的下限概率的比較 免疫熒光層析測定法對健康體檢者所測SAA的下限概率為83.00%(83/100)，高于免疫速率散射比濁法的42.00%(42/100)(χ2=35.86，P<0.01)，免疫熒光層析測定法檢測低值時候更穩定。

3 討論

SAA主要是炎癥發生時白細胞介素-6刺激肝細胞分泌產生，在肝星狀細胞纖維化中起到調節作用[9]。研究[10]顯示，NF-κB可抑制SAA的活化，與減少早期動脈粥樣硬化的形成相關。而SAA能夠誘導人羊膜細胞凋亡，同時伴有Caspase-3的活化[11]。在病毒性疾病的檢測中，SAA優于C反應蛋白(CRP)，主要因為CRP在病毒感染時不能與暴露的磷脂蛋白質結合，而SAA是一種急性的多肽蛋白，對病毒感染早期較為敏感[12]。在炎癥早期SAA指標檢測優于CRP和白細胞介素-6指標。研究[13]顯示，SAA指標與CD64、降鈣素原和CRP均能對疾病診斷有所幫助。SAA蛋白在病毒或細菌感染時均表現靈敏。有研究[14]報道，SAA/CRP對感染性疾病的診斷意義更大。

用于檢測臨床血清SAA的方法有多種，如放射性免疫測定法、免疫速率散射比濁法、免疫熒光層析法、酶聯免疫吸附試驗和微球捕獲酶免疫法。酶聯免疫吸附試驗同時可以檢測人體中抗SAA和SAA1α抗體[15]。而目前臨床上常用的檢測方法為免疫速率散射比濁法、免疫熒光層析和免疫速率透射比濁法。每個方法都有自身的參考范圍、敏感性和特異性。根據試劑說明書，免疫速率散射比濁法線性范圍為2.5～500 mg/L，免疫熒光層析法的線性范圍為10～200 mg/L。本研究結果現實，因對照組SAA值總體偏低，2種方法的檢測結果無統計學差異；但是對于觀察者數值分布范圍廣時，2種方法的檢測結果有明顯的統計學差異，免疫速率散射比濁法所測SAA值明顯高于免疫熒光層析法。本研究采用免疫速率散射比濁法和免疫熒光層析測定法分別對所有研究對象的SAA水平進行檢測，結果顯示，免疫速率散射比濁法和免疫熒光層析測定法的敏感性分別為53.00%，57.00%，特異性分別為為92.00%和93.00%。免疫速率散射比濁法敏感性和特異性雖均低于免疫熒光層析，但差異均無統計學意義。在低于下限的檢測分析中發現，免疫熒光層析法在檢測下限時更穩定，而免疫速率散射比濁法在低于下限值檢測中波動較多?？赡芘c免疫速率散射比濁法易受標本的狀態、類風濕因子、副蛋白或免疫循環復合物影響有關。