ACS患者血漿網膜素-1、MCP-1及AnnexinⅤ的變化及其診斷學價值

劉 敏

河南大學第一附屬醫院，河南 開封 475001

急性冠狀動脈綜合征（Acute coronary syndrome，ACS）是由于冠狀動脈中不穩定斑塊的破裂或侵蝕引起的急性血栓形成，導致血管急性完全或不完全閉塞的疾?。?］。ACS的發生與冠狀動脈斑塊的不穩定性和繼發性血栓形成密切相關。然而，目前用于檢測不穩定斑塊和心血管疾病血栓形成的方法包括經食道超聲心動圖，血管造影術等［2］，通常在血栓形成后發現。常規的血液檢查如高敏C反應蛋白，凝血酶，纖維蛋白原，D-二聚體等［3-4］，由于缺乏特異性，無法準確確定人體中不穩定的斑塊和血栓形成情況。因此，臨床上迫切需要一種新的標記物，以便能夠早期識別心血管系統的急性并發癥。近年來，發現單核細胞趨化蛋白-1（Monocyte chemotactic protein，MCP-1）對單核細胞具有強烈的趨化作用［5］，網膜素-1是新發現的脂肪細胞因子，在網膜脂肪組織中特異性表達。研究發現［6］，網膜素-1與糖脂代謝、胰島素抵抗、炎癥反應和血管內皮功能調節有關，但對其在ACS患者中的表達情況研究較少。膜聯蛋白Ⅴ（AnnexinⅤ）作為一種磷脂結合蛋白，與磷脂酰絲氨酸有高度親和力，它導致膜聯蛋白V和磷脂之間的親和力降低，從而促進血栓形成［7］。盡管AnnexinV在血栓形成研究中越來越受到關注，但其對心血管疾病的臨床研究還不夠。本研究旨在探討老年ACS患者血漿網膜素-1、MCP-1及AnnexinⅤ的變化對ACS的診斷價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取在河南大學第一附屬醫院確診的92例老年ACS患者作為ACS組，90例穩定型心絞痛（SAP）患者作為SAP組。納入標準：（1）參考美國心臟病協會（AHA）、美國心臟病學會（ACC）制定的診斷標準；（2）年齡≥65歲者；（3）經冠脈造影檢查至少發現一支冠脈的狹窄程度超過50%者；（4）本研究獲得醫院醫學倫理委員會的批準，研究對象知情同意。排除標準：（1）患惡性腫瘤者；（2）患風濕性心臟病、心臟瓣膜疾病、心肌病者；（3）伴有免疫系統疾病、類風濕性關節炎者；（4）高血壓、高血糖未能得到有效控制的患者；（5）伴有其他系統的嚴重病變者。

ACS組，年齡65～84歲，平均年齡（71.7±4.3）歲，其中男性51例、女性41例；其中不穩定型心絞痛58例、急性心肌梗死34例。SAP組，年齡65～86歲，平均年齡（72.6±5.0）歲，其中男性47例、女性43例。兩組患者的年齡、性別差異均無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 網膜素-1、MCP-1及AnnexinⅤ檢測方法：兩組患者在入院時從肘的正中靜脈采集5ml靜脈血。通過添加枸櫞酸鈉溶液進行抗凝，在4℃下離心10 min，收集10μl富含血小板的血漿。儲存在-80°C冰箱中待測。采用ELISA檢測血清MCP-1、網膜素-1濃度；用流式細胞術儀測定AnnexinV水平。

1.2.2 一般資料收集及檢測：收集兩組的年齡、性別、體質量指數（BMI）、吸煙、飲酒情況，檢測兩組的TG、TC、HDL-C和LDL-C，以及合并高血壓和糖尿病的情況。BMI=體質量（kg）/身高2（m2）。采用氧化酶法測定TG、TC、HDL-C、LDL-C水平。

1.3 統計學方法

數據采用SPSS 21.0軟件進行統計學分析，計量資料以均數±標準差（±s)表示，組間比較采用t檢驗；計數資料用例數和百分比（%）表示，組間比較采用χ2檢驗，繪制ROC曲線分析相關診斷學指標及AUC值；以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患者的一般資料比較

兩組患者的年齡、性別、BMI、吸煙、飲酒、TG、TC、HDL-C和LDL-C，以及合并高血壓和糖尿病的情況差異均無統計學意義（P＞0.05）。見表1。

表1 兩組患者的一般資料比較

2.2 兩組患者的網膜素-1、MCP-1及AnnexinⅤ比較

ACS組患者的MCP-1及AnnexinⅤ高于SAP組患者（P＜0.05），ACS組患者的網膜素-1水平低于SAP組患者（P＜0.05）。見表2。

2.3 網膜素-1、MCP-1及AnnexinⅤ鑒別診斷ACS和SAP患者的價值

經繪制ROC曲線分析，網膜素-1鑒別診斷ACS和SAP患者的靈敏度為82.18%、特異度為69.41%、AUC值為0.770； MCP-1鑒別診斷ACS和SAP患者的靈敏度為75.50%、特異度為85.47%、AUC值為0.824； AnnexinⅤ鑒別診斷ACS和SAP患者的靈敏度為94.10%、特異度為79.53%、AUC值為0.878。見表3、圖1。

表2 兩組患者的網膜素-1、MCP-1及AnnexinⅤ比較（±s）

表2 兩組患者的網膜素-1、MCP-1及AnnexinⅤ比較（±s）

組別ACS組SAP組（n=92）（n=92）tP網膜素-1（ng/m l）13.16±2.88 17.30±3.14-9.273 0.000 MCP-1（pg/m l）147.8±19.5 116.2±14.7 12.325 0.000 AnnexinⅤ（%）18.95±8.77 9.41±3.39 9.639 0.000

表3 網膜素-1、MCP-1及AnnexinⅤ鑒別診斷ACS和SAP患者的價值

圖1 網膜素-1、MCP-1及AnnexinⅤ鑒別診斷ACS和SAP患者的ROC曲線

3 討論

ACS是冠狀動脈心臟病的重要臨床亞型，由斑塊不穩定和破裂引起，近年來，隨著ACS研究的深入，心血管疾病標志物的研究取得了很大進展，可以在一定程度上反映ACS疾病進程的各個階段，但仍存在臨床局限性。目前，血管內超聲和冠狀動脈造影等侵入性影像學檢查，以及CT、MRI、凝血指標等無創檢查，具有特異性和敏感性差的缺點，早期無法檢測到不穩定的斑塊，并形成血栓。為了在早期更敏感地預測心血管風險事件，需要找尋更為敏感的標記物來輔助診斷老年ACS穩定性心絞痛（Stable angina pectoris， SAP）患者。

炎癥因子在斑塊不穩定中的介導作用已被廣泛接受，脂肪組織可以分泌多種生物活性的炎癥相關細胞因子，近年來，脂肪細胞因子與冠心病的相關性已成為研究的熱點［8］。網膜素-1是在網膜脂肪組織中特異性表達的新發現的細胞因子。目前研究發現［9-10］，2型糖尿病和慢性炎癥性腸病患者的血漿網膜素-1水平降低，類風濕性關節炎患者的網膜素-1水平明顯低于骨關節炎患者。以上表明，血漿網膜素-1與體內各種慢性炎癥反應有關，可能通過改變血管內皮的炎癥狀態，在動脈粥樣硬化的預防和發展中起到關鍵的作用。而網膜素-1在ACS急性炎癥狀態中的作用尚不清楚。我們推測類網膜素-1可直接作為抗炎因子起作用，或通過抑制其他炎癥因子的作用而影響急性炎癥反應，以改變急性冠狀動脈病變的不穩定性。

研究結果顯示：ACS組患者的網膜素-1水平低于SAP組患者，這可能與ACS和SAP急性發作期間的病理生理學差異有關。與ACS相比，SAP的病理是冠狀動脈粥樣硬化斑塊相對穩定，血流動力學穩定，機體內炎癥因子處于相對平衡的狀態。結果表明，網膜素-1的降低是ACS的獨立危險因素，可能參與冠狀動脈斑塊的發展?？蔀锳CS和SAP的早期篩查提供依據，減少臨床急性心血管事件的發生。

趨化細胞因子主要由白細胞和造血微環境中的基質細胞分泌，MCP-1是β亞家族的代表，并且可以趨化單核細胞。最近的研究表明［11-12］，MCP-1在冠狀動脈疾病等動脈粥樣硬化疾病的發展中起著重要作用。據報道，單核細胞和巨噬細胞浸潤是動脈粥樣硬化斑塊中最重要的驗證細胞，單核細胞如血管內皮細胞的粘附和遷移是動脈粥樣硬化的早期基本病變。MCP-1對單核細胞和巨噬細胞具有明顯的趨化作用，可誘導單核細胞凋亡［13］。本研究結果顯示：ACS組患者的MCP-1高于SAP組患者，表明MCP-1可能參與ACS發生和發展的病理生理過程，并且與疾病的嚴重程度有關。結果與謝兆弟等［14］的結論一致。同時，該研究還表明，MCP-1是一種潛在的ACS血清學標志物，可用于ACS的診斷，具有高靈敏度和特異性。

最近的研究表明［15］，AnnexinV的生物學活性與細胞分化和凋亡，炎癥和血栓形成密切相關。研究證實，AnnexinV參與了心肌梗死的過程。至于ACS如何引起AnnexinV的增加，最重要的病理生理學可能是不穩定斑塊的破裂導致局部血液動力學變化，導致高剪切激活的血小板，導致繼發性血栓形成。本研究結果顯示：ACS組患者的AnnexinⅤ高于SAP組患者，這表明AnnexinV在體內的表達增加對ACS的發生具有一定的預測價值，可能是由于ACS和SAP患者病理生理學的差異有關，與ACS相比，SAP患者的冠狀動脈粥樣硬化斑塊相對穩定，無明顯繼發性血栓形成。因此，SAP組中的AnnexinV表達水平遠低于ACS組。

分析發現，血漿網膜素-1、MCP-1及AnnexinⅤ水平輔助診斷ACS和SAP患者時，靈敏度和特異度較好，可用作診斷兩種疾病的指標。然而，本研究中包括的每組病例數相對較少，所有病例均來自同一醫療單位，在患者選擇中可能存在一些信息偏差，并且在評估結果時沒有實施盲法。上述情況可能對結果的穩定性產生一定的影響，因此在條件的情況下，應進一步擴大樣本量以進行多中心前瞻性診斷評估。

綜上所述，ACS患者MCP-1及AnnexinⅤ水平較SAP患者升高，血漿網膜素-1較SAP患者降低，檢測上述3項指標對于輔助診斷老年ACS及SAP患者具有一定的價值。