陳榆
(福建晶華生物科技有限公司,福建 福州 350105)
隨著寵物進入千家萬戶,寵物香波的用量也日益增加,寵物由于自身的厚實毛發及生活習慣很容易滋生各種細菌,有時還會攜帶病毒,這些細菌和病毒不僅會危害寵物的健康生長,甚至還會引起人畜疾病交叉傳播和感染。為了達到消毒的目的,傳統的做法是采用寵物殺蟲劑對寵物的毛皮進行噴曬或清理,但這樣去除效果不佳而且還會損傷寵物的皮毛?;趯櫸锩ぜ毦奶攸c,新型功能型的寵物香波在傳統洗浴清潔作用的基礎上,把抑菌劑融入浴液之中,達到抑菌與洗滌的雙重效果。本文依據銀離子的抑菌作用,就加入銀離子抑菌劑寵物香波的抑菌效果進行了實驗探討。
寵物香波(福建省輕工業研究所研制,福建晶華生物科技有限公司生產);
銀離子抑菌劑:淺黃色液體,銀離子含量1 g/kg,生產用量0.2%(質量分數),廣東迪美生物技術有限公司提供。
超凈工作臺、恒溫培養箱、恒溫水浴鍋、高壓蒸汽滅菌鍋、培養皿、移液槍、試管等。
2.3.1 試劑
0.03 mol/L 磷酸鹽緩沖液(PBS);營養瓊脂培養基;沙氏瓊脂培養基。
2.3.2 菌種
大腸埃希氏菌ATCC25922、金黃色葡萄球菌ATCC6538、白色念珠菌ATCC10231:廈門大學生命與科學學院環境與應用微生物研究所提供。
2.4.1 用PBS液將大腸埃希氏菌、金黃色葡萄球菌和白色念珠菌各標準菌分別做適當稀釋作為實驗菌,要求濃度:0.1 mL滴于5 mL對照樣液(PBS)內,回收菌數在1×104~9×104CFU/mL。
2.4.2 將寵物香波取出5 mL 12支分別編號放入滅菌試管中(20±1)℃恒溫5 min;
2.4.3 吸取各實驗菌種0.1 mL加入到5 mL樣品的已編號試管中,迅速混勻,分別按5、10、15、20 min時間作用,并立即計時,時間到各取實驗菌種與樣品的混合液0.5 mL加入到4.5 mL經滅菌的PBS試管中,充分混勻。
2.4.4 放置10 min后,分別吸取液1 mL置于滅菌平皿內,每個樣液接種2個皿,分別用恒溫40~45 ℃的營養瓊脂(大腸埃希氏菌、金黃色葡萄球菌)、沙氏瓊脂培養基(白色念珠菌)15 mL做培養基,轉動平皿使其充分均勻,瓊脂凝固后翻轉平皿,在(35±2)℃培養48 h(大腸埃希氏菌、金黃色葡萄球菌)和72 h(白色念珠菌),做活菌菌落計數。
2.4.5 每組以PBS代替實驗樣品,按以上步驟操作作為空白對照。
2.4.6 實驗重復3次,求其平均值算出抑菌率(%)。
2.4.7 計算公式
其中:
Ⅰ——對照組平均菌落數,CFU/mL
Ⅱ——實驗組平均菌落數,CFU/mL
抑菌效果評價:抑菌率≥50%有抑菌作用;抑菌率≥90%有較強抑菌作用。
3.1.1 寵物香波對大腸埃希氏菌在不同時間的抑菌率見表1。
表1 銀離子對大腸埃希氏菌的抑菌實驗效果
3.1.2 寵物香波對金黃色葡萄球菌在不同時間的抑菌率見表2。
表2 銀離子對金黃色葡萄球菌的抑菌實驗效果
3.1.3 寵物香波對白色念珠菌在不同時間的抑菌率見表3。
表3 銀離子對白色念珠菌的抑菌實驗效果
3.1.4 該寵物香波與大腸埃希氏菌、金黃色葡萄球菌和白色念珠菌在混合作用5 min后都顯示出一定的抑菌效果,20 min后對3種實驗菌抑菌率均>99%,其中不同時間抑菌率各不相同,抑菌率,隨著時間的延長而提高,趨勢圖如圖1曲線所示,作用時間(min)與抑菌率(%)成正相關,可以看出對大腸埃希氏菌(1線)的抑菌過程比金黃色葡萄球菌(3線)和白色念珠菌(2線)較快起作用。
圖1 各實驗菌的抑菌率與時間的關系
采用含銀離子抑菌劑的寵物香波對革蘭氏陰性代表菌——大腸埃希氏菌、革蘭氏陽性代表菌——金黃色葡萄球菌以及白色念珠菌進行了抑菌實驗,結果表明該寵物香波在不同時間對這3種實驗菌均有較強的抑菌作用,并且抑菌作用在20 min時抑菌率均達99%以上,說明該寵物香波成分中銀離子具有良好的抑菌能力。
抑菌主要因為Ag+帶著活性極強的正電荷陽離子,而細菌的細胞壁和細胞膜由磷脂質雙分子膜組成,帶負電荷,依靠庫侖引力二者產生電吸附作用而牢固結合,導致銀離子穿透細胞膜進入細胞內。由于Ag+與蛋白質有較強的親和性,能與細菌蛋白質上的硫氨基(-SH)發生化學反應,造成蛋白質凝固形成不可逆的硫銀化合物,使細菌合成酶的活性遭到破壞,從而干擾細菌DNA、RNA的合成以及DNA模板轉錄mRNA等,使細菌喪失分裂增殖能力而死亡。另外Ag+未飽和的配位能力與菌體表面的N或O作用,凝固核酸,使DNA分子上的化學鍵斷裂,破壞菌體表面活性結構,從而使菌體因生理變化或活動受阻死亡。正是銀離子具有非常高的生物活性,一定濃度的銀離子就能對病菌、真菌等均有良好的抑制作用。
銀離子的抑菌能力很強,但對人畜無任何傷害,是一種廣譜抑菌劑,有研究表明銀離子能消滅多種敏感細菌,并且少量的銀離子就有很好的抑菌效果,是目前廣泛使用的抑菌材料,具有廣譜殺菌、無毒無味、無刺激、無污染、無任何交叉藥物感染、不產生耐藥性的特點。在寵物香波中加入銀離子抑菌劑不但能夠高效去污、柔軟皮毛,而且能起抑制細菌的作用,達到抑菌與洗滌清潔的二合一,在市場上具有廣闊的應用前景。