血清載脂蛋白E水平與頸動脈粥樣硬化斑塊的關系研究*

宋 揚，范雪松，王恩世，孫 奇，賀建勛，張 蕾，趙 松，崔 穎，袁 慧△

1.首都醫科大學附屬北京安貞醫院/北京市心肺血管疾病研究所檢驗科，北京 100029；2.中國醫學科學院阜外醫院成人心臟外科中心，北京 100037；3.北京市第一社會福利院/北京市老年病醫院檢驗科，北京 100011

動脈粥樣硬化可導致心腦血管疾病，是嚴重危害人類健康的病理基礎。而載脂蛋白E(ApoE)是血液中參與機體脂質代謝及調節膽固醇平衡的主要載脂蛋白之一，其基因多態性與多種疾病相關。ApoE在動脈粥樣硬化的病理過程中具有抗動脈粥樣硬化的作用，ApoE通過促進外周細胞膽固醇的流出及清除血漿膽固醇脂蛋白，并通過減少低密度脂蛋白和極低密度脂蛋白的形成，達到抑制泡沫細胞形成從而抗動脈粥樣硬化[1]。本文通過研究頸動脈粥樣硬化斑塊患者血清中ApoE水平，旨在分析脂類代謝與頸動脈粥樣硬化的關系。

1 資料與方法

1.1一般資料 收集2019年2—5月在首都醫科大學附屬北京安貞醫院體檢中心行頸動脈超聲的體檢者300例為研究對象。研究對象中男177例，女123例；年齡30～86歲，平均(57.42±13.06)歲；男女比例為1.44∶1。所收集的人群中對照組118例，對照組的頸動脈超聲結果為雙側頸動脈正常，并排除心腦血管疾??；頸動脈內膜中層厚度(IMT)異常組182例。所有研究對象均排除嚴重肝腎功能不全、腦卒中、心臟病、肺動脈高壓、腫瘤、嚴重感染等。所有研究對象均自述未服用過任何降脂藥物。本研究檢查前所有研究對象簽署知情同意書。

1.2儀器與試劑 美國貝克曼庫爾特AU5400全自動生化分析儀檢測血脂指標。主要血脂檢測指標包括三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)和ApoE，試劑購自日本積水醫療株式會社。采用國際臨床化學和實驗室醫學聯盟(IFCC)推薦的酶法檢測TG水平。采用第3代均相法檢測LDL-C水平，當標本測定值超過上限時，將標本用9 g/L氯化鈉溶液作1+1稀釋重新檢測，結果乘以2。采用第3代均相法檢測HDL-C水平，當標本測定值超過上限時，將標本用9 g/L氯化鈉溶液作1+2稀釋重新檢測，結果乘以3。采用免疫透射比濁法檢測ApoE水平。均采用日本積水醫療株式會社提供的配套校準品及質控品，嚴格按照試劑說明書制訂測定參數。

1.3方法 受試者均于前一日空腹12 h以上，次日清晨VACUETTE?真空采血管采集肘靜脈血5 mL，室溫靜置30 min，4 ℃ 3 000×g離心10 min分離血清，送檢驗科直接檢測TG、LDL-C和HDL-C水平。同時吸取500 μL血清于EP管中，凍存至-80 ℃保存，統一進行ApoE水平檢測。頸動脈超聲檢查儀器為日本東芝Aplion-500超聲診斷儀(探頭頻率4～11 MHz)，均為同一位超聲體檢醫生操作，根據《血管超聲檢查指南》對頸動脈粥樣硬化斑塊進行評價，如果IMT異常組中有局限性回聲結構突出管腔情況存在(回聲結構可不均勻或伴聲影)，則進一步分亞組：IMT 1.0～<1.5 mm者納入IMT增厚組(65例)，IMT≥1.5 mm者納入頸動脈粥樣硬化斑塊組(117例)。

2 結 果

2.1IMT異常組與對照組臨床資料比較 IMT異常組與對照組的性別構成、體質量指數(BMI)`和既往史(吸煙、飲酒、運動、高血壓和冠心病患病率)比較，差異均無統計學意義(P>0.05)。IMT異常組的年齡和糖尿病患病率高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

2.2IMT異常組與對照組血脂水平比較 IMT異常組與對照組的TG和HDL-C水平比較，差異均無統計學意義(P>0.05)。IMT異常組的LDL-C水平高于對照組，IMT異常組的ApoE水平低于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。

2.3頸動脈粥樣硬化斑塊組、IMT增厚組與對照組臨床資料比較 頸動脈粥樣硬化斑塊組、IMT增厚組與對照組的性別構成、BMI和既往史(吸煙、飲酒、運動、高血壓和冠心病患病率)比較，3組間差異均無統計學意義(P>0.05)。頸動脈粥樣硬化斑塊組和IMT增厚組的年齡高于對照組(P<0.01)，頸動脈粥樣硬化斑塊組與IMT增厚組的年齡差異無統計學意義(P>0.05)。IMT增厚組的糖尿病患病率高于頸動脈粥樣硬化斑塊組和對照組(P<0.01)，頸動脈粥樣硬化斑塊組與對照組糖尿病患病率差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 IMT異常組及其各亞組與對照組臨床資料比較

2.4頸動脈粥樣硬化斑塊組、IMT增厚組與對照組血脂水平比較 頸動脈粥樣硬化斑塊組、IMT增厚組與對照組的TG、HDL-C和LDL-C水平比較，3組間差異均無統計學意義(P>0.05)。頸動脈粥樣硬化斑塊組ApoE水平低于IMT增厚組和對照組，差異有統計學意義(P<0.05)，IMT增厚組和對照組ApoE水平差異無統計學意義(P>0.05)。見表2。

表2 IMT異常組及其各亞組與對照組血脂水平比較

3 討 論

ApoE在多種脂蛋白顆粒中均存在，最先在健康者VLDL-C中發現，主要作用是參與脂類代謝、神經元的修復、再生和免疫反應，所以，ApoE的異常往往伴隨著脂代謝的異常[2]。LDL-C作為傳統的致動脈粥樣硬化危險因素，有著不可替代的臨床應用價值。但在臨床上許多患者盡管LDL-C在正常范圍但仍發生急性心腦血管事件，還有許多患者盡管應用他汀類藥物使LDL-C降到正常范圍仍發病，說明非傳統血脂指標提示LDL-C以外的危險因素及血脂殘留風險有著重要的臨床意義。

本研究發現，ApoE的水平在頸動脈粥樣硬化斑塊組低于IMT增厚組和對照組，而LDL-C水平僅在IMT異常組和對照組之間有差異，在頸動脈粥樣硬化斑塊組、IMT增厚組與對照組3組間差異無統計學意義，提示ApoE水平隨著斑塊嚴重程度發展可進一步識別出頸動脈粥樣硬化斑塊，從另一個側面反映ApoE在不同的疾病分層中具有不同的水平。年齡在頸動脈粥樣硬化斑塊組和IMT增厚組高于對照組，頸動脈粥樣硬化斑塊組和IMT增厚組的年齡差異無統計學意義。IMT增厚組的糖尿病患病率高于頸動脈粥樣硬化斑塊組和對照組，而頸動脈粥樣硬化斑塊組與對照組的糖尿病患病率差異無統計學意義，提示在頸動脈粥樣硬化斑塊組中ApoE水平低不是由年齡和糖尿病導致的。

ApoE參與到脂質運輸及代謝過程的方式是依靠其所攜帶的脂質結合域，結合極低密度脂蛋白和高密度脂蛋白來運輸膽固醇和TG，從而參與細胞對脂蛋白的吸收。越來越多的研究發現，ApoE可以影響血脂水平，而脂質代謝紊亂是動脈粥樣硬化眾多發病因素中非常重要的環節。動脈粥樣硬化斑塊中膽固醇主要由血漿脂蛋白構成，而ApoE又是構成血漿脂蛋白的重要成分，ApoE在脂質代謝中可作為高脂血癥與動脈粥樣硬化發生、發展的重要分子靶標[3-5]。此外，有研究顯示，ApoE具有非常明顯的基因遺傳多態性，ApoE可通過多態性蛋白形式參與脂蛋白的轉化與代謝過程，ApoE與脂代謝紊亂、冠心病和動脈粥樣硬化的發生、發展密切相關[6-7]。ApoE的其他作用還包括：ApoE能調控血漿中脂蛋白的清除與脂蛋白的氧化，從而增加外周細胞膽固醇的流出，達到維持血漿膽固醇總體內穩態的作用；ApoE可抑制血小板衍生生長因子誘導的血管平滑肌細胞的遷移、增殖活動；ApoE可以調節血小板功能，通過激活一氧化氮合酶，促使血小板產生足夠的一氧化氮達到抑制血小板聚集的作用；ApoE亦可通過減少T淋巴細胞活化，達到抑制白細胞介素-2的產生及淋巴細胞增殖的作用[8-9]。本研究結果也進一步支持ApoE可參與到動脈粥樣硬化發生、發展過程中。

本研究的不足之處：(1)未能通過大樣本數據獲取資料；(2)本研究為橫斷面研究，無法確定ApoE與頸動脈粥樣硬化斑塊發生之間的因果關系。因此，若要進一步確定ApoE在頸動脈粥樣硬化斑塊中的臨床應用價值,需要更深入的研究。