(安徽省動物疫病預防與控制中心,安徽合肥 230091)
禽白血?。╝vian leucosis,AL)是由C 型反轉錄病毒群的禽白血病病毒(avian leucosis virus,ALV)引起禽類不同組織、細胞的良性及惡性腫瘤性疾病。目前已從雞群中分離到A—E 5 個亞群和J 亞群ALV[1]。其中,A/B 亞群主要引起禽淋巴肉瘤白血病,J 亞群致病性和傳染性比原有的經典亞群強[2],對禽類的危害程度也比經典ALV 高?!秶抑虚L期動物疫病防治規劃(2012—2020年)》提出,國內全部種禽場禽白血病要在2020年達到凈化標準。近年來,安徽省各地區均有不同程度的禽白血病流行[3-4]。本研究在2017—2019年持續對安徽省部分禽場不同品種家禽進行了ALV 的J 抗體、A/B 抗體和p27 抗原的流行病學調查和抽樣監測,了解安徽省禽場ALV 感染情況,以期為進一步開展全省禽白血病凈化工作提供參考。
2017—2019年,結合《國家動物疫病定點監測實施方案》要求,綜合考慮安徽省禽類養殖特點和飼養規模,選取有代表性和可操作性的固定監測縣,共選擇59 個不同規模禽場進行禽白血病監測。在各規模場點,兼顧禽類的不同類型、代次和品種,同時選取疫病凈化示范創建項目和農業農村部畜牧獸醫局選定的部分種禽場(圖1)。
根據《國家動物疫病定點監測實施方案》中的動物飼養規模劃分標準,在選定的小規模(養殖量<10 000 只)、中規模(10 000 只≤養殖量≤100 000 只)和大規模(養殖量>100 000 只)商品代禽場,分別采集血清樣品100、50、30 份,在種雞場每場采集50 份蛋清;在《國家種畜禽場主要動物疫病監測實施方案》選定的安徽省祖代禽場名單中,每場采集100 份血清和150 份蛋清。
ALV-J 抗體、ALV-A/B 抗體和ALV-p27 抗原檢測,均使用ELISA 方法。使用酶標儀(TECANSunris,瑞士帝肯公司),96 通道全自動洗板機(ELx405,美國博騰儀器有限公司)等儀器,按照IDEXX 公司的ALV-p27 抗原檢測試劑盒以及ALV-J 抗體和ALV-A/B 抗體檢測試劑盒說明書進行檢測和結果判斷。
樣品中的ALV-J 抗 體、ALV-A/B 抗體和ALV-p27 抗原檢測為陽性即為陽性個體,只要檢出1 份陽性個體的禽場即為陽性禽場。使用SPSS 22.0 軟件計算P值,用卡方檢驗分析不同組間差異。用ArcGIS 10.6 軟件,標注選定禽場空間分布。
2017—2019年,血清樣品的ALV-J 抗體陽性率分別為22.51%、15.12%和26.11%,呈先降后升的趨勢,場陽性率分別為75.00%、42.86%、40.00%,呈逐年下降趨勢,2017年和2018年差異極顯著(P<0.01);血清樣品的ALV-A/B 抗體陽性率分別為14.98%、4.10%和4.07%,場陽性率分別為62.50%、46.43%、60.00%,均呈逐年下降趨勢,2017年和2018年差異極顯著(P<0.01),2018年和2019年差異不顯著(P>0.05)。2017—2019年檢測的2 100 份種蛋蛋清樣品中,個體陽性率分別為7.08%、6.00%和4.20%,呈逐年下降趨勢,且ALV-J 抗體陽性率均高于ALV-A/B 抗體和ALV-p27 抗原,但差異不顯著(P>0.05)。具體結果見表1~2。
從不同養殖規???,ALV-J 抗體和ALV-A/B抗體的場陽性率,大規模場最高,中規模場次之,小規模場最低;而個體陽性率,中規模場最高,大規模和小規模相差不大。ALV-p27 抗原場陽性率和個體陽性率,大規模場均高于中規模場。具體結果見表3。
從不同場點類型看,祖代場的ALV-J 抗體和ALV-p27 抗原個體陽性率最高,而商品場的ALV-A/B 抗體的個體陽性率最高,其中祖代場的ALV-J 抗體陽性率與父母代場差異極顯著(P<0.01),商品場的ALV-A/B 抗體與祖代場和父母代場差異極顯著(P<0.01),祖代場與父母代場差異不顯著(P>0.05);祖代場的ALV-p27 抗原陽性率與父母代場和商品場差異不顯著(P>0.05)。具體結果見表4。
表1 2017—2019年禽白血病血清樣品檢測結果統計
表2 2017—2019年禽白血病場陽性檢測結果統計
表3 不同養殖規模禽白血病檢測結果統計
表4 不同場點類型禽白血病檢測結果統計
不同養殖品種上,ALV-J 抗體個體陽性率,黃羽肉雞>蛋雞>鴨>白羽肉雞>地方品種雞;ALV-A/B 抗體個體陽性率,鴨>白羽肉雞>黃羽肉雞>蛋雞>地方品種雞(表5)。
表5 不同養殖品種禽白血病個體陽性率檢測結果統計
2017—2019年監測的59 個場點分布于8 個市(縣),大部分位于安徽南部,ALV-J 抗體、ALV-A/B 抗體、ALV-p27 抗原個體陽性率呈現一定的區域分布特點,其中ALV-J 抗體個體陽性率,貴池區最高(51.90%),長豐縣最低(0);ALV-A/B 抗體個體陽性率,太湖縣最高(15.6%),寧國市最低(0);ALV-p27 抗原個體陽性率,貴池區最高(9.00%),廣德市(0)、寧國市(0)最低。具體結果見表6。
表6 不同地區禽白血病個體陽性率統計 %
2017—2019年分別檢出ALV 抗體陽性樣品352、311 和154 份,其中ALV-J 和ALV-A/B 亞群混合感染樣品分別為51、8 和9 份。由表7 可見,陽性樣品中,ALV-J 亞群單一感染占比逐年增高,而ALV-A/B 亞群單一感染和混合感染占比逐年降低。
表7 2017—2019年陽性樣品中ALV-J 和ALV-A/B 亞群感染占比 %
安徽是禽類養殖大省,唐文中[5]、胡曉田[6]均在安徽省的禽類樣品中監測到ALV-J 抗體、ALV-A/B 抗體和ALV-p27 抗原。本次調查結果顯示:2017—2019年檢測的3 275 份禽血清樣品和2 100 份蛋清樣品中,ALV-J 抗體和ALV-A/B 抗體平均陽性率為19.36%和7.66%,ALV-p27 抗原個體平均陽性率為5.90%;59 個場點中,超過半數檢出ALV-J 抗體陽性。
不同養殖規模和場點類型均能檢測到該病。禽白血病是垂直傳播性疾病,因而種禽場是防控重點。劉麗平等[7]2019年檢測了山東省8 個種雞場,發現ALV-J 抗體個體陽性率為12.51%。本次調查結果顯示,祖代場的ALV-J 抗體個體陽性率最高,表明安徽省需要加強種禽場的禽白血病凈化。安徽榮達禽業自開展禽白血病凈化后,連續3年的ALV-J 抗體陽性率低于9.00%,說明只要通過連續系統的凈化工作,嚴格加強祖代場和父母代場凈化,可以有效控制禽白血??;本次調查結果還顯示,商品代場的ALV-A/B 抗體陽性率明顯高于祖代場和父母代場,說明商品代場的ALV-A/B 亞群凈化工作更加艱巨。但只要堅持開展祖代場和父母代場凈化,在種禽場開產后及時采集血清或種蛋進行檢測,淘汰陽性雞[8],就可以從源頭上控制該病,從而可以有效降低商品代場的感染率;本次調查發現,祖代場蛋清中ALV-p27 抗原檢出率較高。對于種禽,檢測蛋清中ALV-p27 抗原可用于研究雞群的感染狀態[9]。只有及時將有陽性檢出的整個家系的雛雞全部淘汰,同時淘汰相應種母雞[10],對種禽場的產蛋雞和種用公雞開展禽白血病凈化[11],才能更好地降低通過種蛋傳播該病的風險。
不同禽種均可感染ALV。2006—2011年,全國70%的蛋雞群暴發ALV-J 流行[12]。韋平等[13]在廣西14 個地方品種雞和其他11 種非雞類家禽中均檢測到禽白血??;彭昊等[14]在地方品種鴨和鵝體內也檢測到ALV-A/B 抗體。本次調查顯示,不同品種禽類的A LV-J 抗體陽性率差異較大(2.00%~26.24%),其中黃羽肉雞和蛋雞檢出率最高,鴨的ALV-A/B 抗體陽性率較高,說明ALV 感染禽類范圍不斷擴大。因此,目前不僅要加強雞群的禽白血病凈化,也要重視鴨、鵝等禽類的監測和凈化,引導各禽場有計劃、有步驟地按照國家制定的有關凈化程序,分批、分區、分階段進行凈化,建立核心種群,讓養殖戶從凈化場引進種蛋。通過積極有效開展凈化工作,可以提高家禽的生產效率,降低動物疫病發病率和死亡率[15]。
2017—2019年ALV-J 和ALV-A/B 混合感染情況均呈下降趨勢。但由于混合感染引起的發病情況比單一感染更為嚴重[16],且不同亞群病毒在同一雞群或同一雞體內傳播,存在不同亞群發生基因重組的潛在威脅[17],因此仍然需要加強混合感染的控制。
定點監測表明,安徽省禽白血病流行較為嚴重,尤其是大型場、祖代場以及肉雞和鴨的ALV感染風險較高。因此,應進一步加強對此類高風險禽場和禽群的禽白血病監測,持續推進禽白血病凈化工作。