輕度胃腸炎伴嬰幼兒良性驚厥患兒血清一氧化氮水平、一氧化氮合酶活性、白細胞介素及其受體水平的變化及意義▲

張彥博 張 滟 張學琴

(河北省秦皇島市第二醫院1 兒科，2 麻醉科，秦皇島市 066600，電子郵箱：hbzyb5088@163.com)

輕度胃腸炎伴良性嬰幼兒驚厥(benign infantile convulsions with mild gastroenteritis,BICE)是嬰幼兒期最常見的良性驚厥，其病因和發病機制尚不完全清楚，常容易出現誤診[1-2]。近年來，雖然對該病的了解有所加深，但多數相關研究仍為臨床病例觀察，而有關其發病機制的研究報告較少[3-4]。研究表明，一氧化氮有致癲癇的作用，可刺激釋放谷氨酸而增加驚厥的發生概率[5]，因此有學者推測BICE的發病機制可能與一氧化氮及其代謝物有關[6-7]。同時，BICE的發病過程涉及多種炎癥因子的調節作用，其中白細胞介素(interleukin,IL)表達水平對患兒病情進展的預測作用逐漸引起重視。然而，目前一氧化氮和IL在BICE發病過程中的相互關系和作用的相關研究報告尚少見。本研究檢測BICE患兒血清中一氧化氮、一氧化氮合酶(nitric oxide synthase，NOS)以及可溶性白細胞介素2受體(soluble interleukin 2 receptor，SIL-2R)、IL-6、IL-8的表達情況，分析其在 BICE發生和病情發展過程中的作用，為該病的治療及預后評估提供理論參考。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2018年6月1日至2019年7月31日秦皇島市第二醫院收治的89例輕度胃腸炎患兒(單純腸炎組)及36例BICE患兒(BICE組)為研究對象。BICE納入標準：符合BICE的診斷標準[8]，年齡3～36個月。排除標準：首次血標本采集時間距驚厥發作時間超過72 h；有中重度脫水、電解質紊亂、高熱、顱腦損傷、腦炎、腦膜炎、腦病和診斷明確的癲癇者。單純腸炎組納入標準：符合輕度胃腸炎的診斷標準[9]，年齡3～36個月。排除標準：首次血標本采集時間距腸炎發生時間超過72 h；有中、重度脫水及電解質紊亂；體溫>38.5℃。選取同期在我院進行體檢的30例健康嬰幼兒(正常對照組)，年齡3～36個月。BICE組中男性20例、女性16例，年齡(18.86±2.56)個月；單純腸炎組中男性45例、女性44例，年齡(17.92±2.45)個月；正常對照組中男性15例、女性15例，年齡(18.37±3.07)個月。3組性別和年齡差異均無統計學意義(均P>0.05)，具有可比性。研究對象的家長對本研究均知情同意。本研究獲得秦皇島市第二醫院醫學倫理委員會批準。

1.2 血清一氧化氮水平及NOS活力的檢測方法 BICE組與單純腸炎組患兒均于入院24 h內(急性期)及發病后5～7 d(恢復期)留取靜脈血3 mL。正常對照組在取得家長同意，簽知情同意書后留取空腹外周靜脈血3 mL。所有標本采集后立即以3 000 r/min離心15 min后取上清液，放置于-80℃冰箱保存。采用硝酸還原酶法檢測一氧化氮水平，采用化學比色法檢測NOS。實驗操作均由專業技術人員嚴格按說明書進行，試劑盒購自南京生物工程研究所(一氧化氮生產批號：20191208；NOS生產批號：20191215)。

1.3 血清SIL-2R、IL-6、IL-8的檢測方法 按1.2方法采集處理靜脈血標本后，應用德國西門子公司生產的SIL-2R(批號：XL-Er0358)、IL-6(批號：XL-Er0196)、IL-8(批號：XL-Er0199)同批次試劑盒，采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法檢測血清SIL-2R、IL-6、IL-8水平。由有經驗的技術員按說明書操作。

1.4 統計學分析 采用SPSS 13.0統計軟件進行統計分析。計量資料采用(x±s)表示，兩組間比較采用兩獨立樣本t檢驗或t′檢驗，組內比較采用配對t檢驗，多組間比較，方差齊時采用單因素方差分析，方差不齊時采用Kruskal-Wallis檢驗；計數資料以例數(百分比)表示，組間比較采用χ2檢驗。以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 3組血清一氧化氮水平和NOS活力的比較 在急性期，BICE組、單純腸炎組患者血清一氧化氮水平、NOS活力均高于正常對照組(均P<0.05)，且BICE組以上指標均高于單純腸炎組(均P<0.05)，但在恢復期兩組以上指標差異無統計學意義(均P>0.05)。BICE組恢復期血清一氧化氮水平、NOS活力均較急性期降低(均P<0.05)，而單純腸炎組急性期與恢復期以上指標差異無統計學意義(均P>0.05) 。見表1。

表1 3組血清一氧化氮水平和NOS活力的比較(x±s)

2.2 3組血清SIL-2R、IL-6、IL-8水平的比較 在急性期，BICE組、單純腸炎組血清SIL-2R、IL-6、IL-8水平均高于正常對照組(均P<0.05)，但在急性期及恢復期兩組間以上指標比較差異無統計學意義(均P>0.05)。兩組恢復期血清SIL-2R、IL-6、IL-8水平均較急性期降低(均P<0.05)。見表2。

組別nIL-8(ng/L)急性期▲ 恢復期t值P值正常對照組3099.02±25.01—單純腸炎組89145.02±33.07*98.16±24.2010.866<0.001BICE組36153.21±31.04*105.11±27.147.006<0.001 H/t值29.9161.403P值<0.0010.163

3 討 論

隨著對驚厥發病機制的深入研究，目前認為神經遞質及其相關調節介質在驚厥發生過程中具有重要調節作用。而一氧化氮作為一種具有自由基性質的氣性介質，在中樞神經系統的突觸傳遞及病理過程中，不僅具有逆信使的神經介質調節功能，同時還參與體內的炎癥反應[10-11]。目前國內外已經有較多研究報告了一氧化氮和NOS參與癲癇和發熱驚厥發病的作用機制，但有關一氧化氮和NOS參與BICE發病作用機制的研究報告仍不多見。國外有學者認為，輪狀病毒感染機體后可刺激體內大量炎癥介質(腫瘤壞死因子、IL等)釋放，NOS被激活，患兒血液中一氧化氮水平明顯增高，這可能是患兒發生抽搐的原因[12-13]。本研究結果顯示，BICE及單純腸炎患兒在疾病急性期的血清一氧化氮水平、NOS活力均高于健康兒童，且BICE患兒以上指標均高于單純腸炎患兒(均P<0.05)，這與石凱麗等[14]的研究結果相似。這提示一氧化氮水平、NOS活性增高可能與BICE有關，我們推測BICE患兒體內一氧化氮及其合成物NOS的過量表達刺激谷氨酸過量分泌，是引起驚厥的原因之一。此外，BICE組恢復期血清一氧化氮水平、NOS活力均較急性期降低(均P<0.05)，且與單純腸炎組差異無統計學意義(P>0.05)，而單純腸炎組急性期與恢復期以上指標差異無統計學意義(均P>0.05)。這提示血清一氧化氮水平可能對BICE的病情變化有重要影響，調節NOS活力水平及控制一氧化氮水平有可能是治療BICE的另一途徑。

目前，已有多種細胞因子被證實參與胃腸炎癥的免疫反應，與疾病的發病及轉歸密切相關[12]。許多學者研究認為，SIL-2R水平可以反映體液免疫的活性，并可作為中樞神經系統損傷的預后評估標準。IL-6具有多重功能，既可以激活T淋巴細胞而增強細胞免疫功能，又可以刺激已經激活的B淋巴細胞產生抗體，在中樞神經系統內具有增強機體抗損傷和防御能力的重要作用[15-16]。IL-8是由多種細胞產生的細胞因子，可誘導中性粒細胞和淋巴細胞浸潤，增強血管通透性。有研究表明，在感染、創傷患者的血清及組織液中都可以檢測到高水平的IL-8[17-18]。本研究結果顯示，在發病急性期無論單純腸炎組還是BICE組血清SIL-2R、IL-6、IL-8水平均較正常對照組升高(均P<0.05)，和文獻[19-20]報告的結果相似，提示SIL-2R、IL-6、IL-8參與嬰幼兒胃腸炎的免疫反應，BICE患兒存在免疫失衡，從而導致神經細胞的病理、生理改變。此外，BICE組恢復期血清SIL-2R、IL-6、IL-8水平明顯低于急性期(均P<0.05)，說明經過臨床治療，隨著病情好轉，患兒機體免疫失衡有所糾正，這也提示動態檢測以上指標變化有助于評估機體免疫功能紊亂糾正情況，對于判斷病情發展具有指導意義。Kawashima等[5]研究發現，輪狀病毒腸炎患兒血液中炎癥因子的表達水平可間接反映腦實質損傷的程度。但在發病急性期單純腸炎組與BICE組之間以上指標差異并無統計學意義(P>0.05)，因此SIL-2R、IL-6、IL-8是否參與了BICE患兒的驚厥發作，還有待進一步研究。

綜上所述， BICE患兒血清一氧化氮水平及NOS活力增高，兩者可能是引起驚厥的原因之一，調節NOS活力水平及控制一氧化氮水平或有助于治療BICE； BICE患兒存在免疫失衡，動態檢測血清SIL-2R、IL-6、IL-8水平變化，或有助于評估機體免疫功能紊亂糾正情況，對于判斷病情發展也有一定的指導意義。