煙蚜繭蜂寄生對煙蚜生長發育和繁殖的影響

陳丹明, 顧 鋼, 賴榮泉, 周 挺, 白晶晶, 陳志厚, 吳曉婷

(1.福建農林大學植物保護學院, 閩臺作物有害生物生態防控國家重點實驗室, 福州 350002;2.中國煙草總公司福建省公司, 福州 350003; 3.福建省煙草公司南平市公司, 福建南平 353000)

煙蚜Myzuspersicae是烤煙上的主要害蟲之一，對煙葉的危害較大。而煙蚜繭蜂Aphidiusgifuensis是煙蚜的重要天敵之一(Laietal., 2011, 2017a, 2017b, 2019)，煙葉生產上利用煙蚜繭蜂寄生煙蚜的自然特性來防治煙蚜正越來越普遍。早在20世紀90年代，關于煙蚜繭蜂的生物學特性及其推廣應用就有報道(畢章寶和季正端, 1993; 季正端和畢章寶, 1995)。陳家驊等(1996)闡述了被煙蚜繭蜂寄生的不同齡期煙蚜發育不同。如今，隨著研究的深入，許多文章報道了關于煙蚜繭蜂寄生煙蚜研究。吳興富等(2003)研究發現，煙蚜繭蜂比較喜歡寄生煙蚜2和3齡若蟲，而且煙蚜繭蜂寄生煙蚜后對煙蚜的產仔量和壽命均有較大影響。同時，被寄生煙蚜的齡期大小對羽化出的寄生的煙蚜繭蜂的雌雄性比無關。伍紹龍等(2017)研究了煙蚜繭蜂對不同齡期煙蚜的寄生選擇及其子代發育影響，結果發現煙蚜齡期對子代煙蚜繭蜂的發育歷期、壽命和性比沒有影響。文靜等(2014)研究了煙蚜繭蜂對不同生物型煙蚜的寄生選擇，發現相比于綠色型煙蚜，煙蚜繭蜂更喜歡寄生紅色型煙蚜。

良好地控制PONV將減少患者的不適，提高患者的滿意度。近年來，提出了多模式控制PONV的概念，包括了藥物及非藥物方法的聯合[50]。非止吐藥物的方法包括避免使用吸入性麻醉藥，而使用異丙酚進行誘導及維持麻醉；縮短術后禁食時間、口服碳水化合物飲品均有良好效果；在麻醉時吸入高濃度的氧也可能減少PONV的發生率；區域神經阻滯技術如硬膜外及腹橫肌平面阻滯技術，可以有效地減少術后阿片類鎮痛藥的使用量。使用NSAIDs也是另一種減少阿片類鎮痛藥的方法。

長期以來，煙蚜的防治還是化學防治居多(李義強等, 2010; 何應琴, 2017)。但使用煙蚜繭蜂防控煙蚜技術在生產上可大大減少農藥的使用，提高煙葉安全性(Weietal., 2005; Yangetal., 2009; 何曉冰等, 2018)。然而，目前相關的多數研究聚集在如何提高煙蚜繭蜂滯育時間和煙蚜繭蜂貨架期等(李玉艷, 2011; 李玉艷等, 2013)，而對煙蚜繭蜂的研究多集中在不同溫度、不同濕度與光周期和光強對其的影響(余玲等, 2016)。近年來，煙蚜繭蜂防治煙蚜在煙草行業應用越來越廣，防治煙蚜技術日益成熟(周子方等, 2011)。但對煙蚜繭蜂防治煙蚜機理是主要影響煙蚜當代還是后代及對煙蚜防控的具體關鍵時期，未見有明確報道。因此，本研究對煙蚜繭蜂寄生后煙蚜發育歷期、壽命、產仔量等生長發育和繁殖指標進行觀測和分析，探明煙蚜繭蜂對煙蚜的防控機理及防控的具體關鍵時期，以期為更深入研究煙蚜繭蜂防治煙蚜機理及煙蚜繭蜂在大田釋放提供科學參考。

1 材料與方法

1.1 供試材料

煙草：烤煙K326 品種，由福建省煙草科學研究所南平分所提供。煙株置于具有紗窗等的實驗室內培養，以防其他昆蟲飛入。期間，不施用任何農藥，且每隔2 d澆水一次，以保障煙草正常生長且使煙株長勢一致。當每批煙株長到6葉期時，用于試驗。

2.1.3 建立人工氣道 由于氣管下段極度狹窄，導致肺通氣極差，隨時可能因氣道梗阻引起窒息而危及生命。經ICU、麻醉科會診征得患者家屬同意后，予經口氣管插管，呼吸機輔助呼吸。為減輕患者痛苦，機械通氣期間給予嗎啡、地西泮和丙泊酚等藥物鎮靜治療。由于氣道狹窄，選擇氣管插管較細，根據插管內徑選擇適當型號吸痰管，保證在清除呼吸道分泌物的同時不影響有效通氣。妥善固定氣管插管，采用膠布與繩帶雙固定方法，隨時觀察、記錄插管深度，謹防脫出，導致再插管困難。

2.1.1發育歷期：煙蚜繭蜂寄生煙蚜各齡若蚜后，煙蚜發育歷期有顯著的變化(圖1)。煙蚜1齡若蚜被煙蚜繭蜂寄生后，對1齡若蚜的歷期影響最大(F1,19=4.571,P=0.046)，比未被寄生的對照縮短了0.65 d，縮短了33.00%；對3齡若蚜的歷期影響最小(F1,23=2.193,P=0.152)，比對照縮短了0.16 d，縮短了12.00%；對其他齡期的歷期影響居中，處理組與對照組之間無顯著差異(P>0.05)(圖1:A)。2齡若蚜被寄生后，對4齡若蚜、成蚜的歷期影響最大(4齡若蚜:F1,23=152.276,P=0.000; 成蚜:F1,23=23.357,P=0.000)，處理組4齡若蚜、成蚜的歷期比對照分別縮短了1.50 d和0.83 d，均減少了100.00%；對2齡若蚜的歷期影響最小(F1,25=0.076,P=0.785)，比對照縮短了0.06 d，減少了7.00%；對3齡若蚜的歷期影響居中，處理組與對照組之間無顯著差異(P>0.05)(圖1: B)。3齡若蚜被寄生后，對4齡若蚜、成蚜的歷期影響最大(4齡若蚜：F1,23=139.080,P=0.000; 成蚜:F1,23=25.388,P=0.000)，處理組4齡若蚜、成蚜的歷期比對照分別縮短了1.50 d和0.83 d，均縮短了100.00%；對3齡若蚜的歷期影響最小(F1,22=10.876,P=0.003)，比對照縮短了0.44 d，縮短了29.00%(圖1: C)。此外，因為4齡若蚜、成蚜的歷期較短，被寄生24 h后，甚至12 h之后，就直接產仔了，無法統計其歷期。

1.2.3 合理增加每日攝入總熱量 甲狀腺功能亢進會導致患者代謝加快，加速糖類、脂肪、蛋白質的分解速度，因此，護理人員需根據理想體重值、血糖控制水平，合理調整患者熱卡值并適當增加每日攝入總熱量。

煙蚜繭蜂：煙蚜繭蜂蟲源采自福建省南平市煙草公司邵武市煙蚜繭蜂繁殖基地，用飼養的煙蚜繁殖一代后，將新羽化的煙蚜繭蜂雌雄配對，獲得已交配的雌蜂用于試驗。

其他材料：智能人工氣候箱(MRC-250B-LED，寧波普朗特儀器有限公司生產)，培養皿(直徑10 cm)，養蟲籠(長×寬×高=75 cm×45 cm×40 cm)，漂浮育苗營養液(福建省煙草科學研究所南平分所提供)等。

術后1周內患者均進行CT及X線檢查，依據術后CT平掃資料，應用Mobbs-Raley簡易分級標準［11］評價椎弓根螺釘位置：0級，螺釘位于椎弓根皮質內；1級，螺釘突破椎弓根骨壁，但≤2 mm；2級，螺釘突破椎弓根骨壁＞ 2 mm，但無神經受壓等癥狀；3 級，出現螺釘相關并發癥（椎弓根骨折、突破椎體前壁壓迫血管/神經、突破椎弓根內/外壁出現神經并發癥）。螺釘位置0和1級為優良，2級為可，3級為不良，需要翻修。螺釘位置由2位脊柱外科醫師獨立評估并達成一致?；颊咝g后每3個月門診復查，行X線檢查，視病情需要進一步行CT和/或MRI檢查。

1.2 煙蚜繭蜂寄生后煙蚜(F0)生長發育觀測

2.2.1發育歷期：煙蚜2-3齡若蚜(F0)被寄生后，其后代(F1)發育歷期有顯著變化(圖3)。對若蚜產生的F1代1齡若蚜的歷期影響最大(F1,19=5.591,P=0.024)，比未被寄生的若蚜所產后代(對照)的縮短了0.80 d，縮短了40.00%；對若蚜產生的F1代3齡若蚜的歷期影響最小(F1,28=1.231,P=0.277)，比對照縮短了0.10 d，縮短了7.00%。

講座教學-案例教學結合法在臨床藥師培訓中的實踐與探索…………………………………………………… 陳 琦等（5）：703

1.3 煙蚜繭蜂寄生后煙蚜后代(F1)生長發育觀測

試驗數據均用Excel 2010和SPSS 23軟件進行處理，均用平均值±標準誤表示，并采用t檢驗(α=0.05)比較。文中煙蚜逃逸的處理或對照重復不計入數據統計中，但每個處理或對照組至少保持20次重復(其中5次備用)，以確保每組數據均具有代表性。

1.4 數據分析

以同一已被煙蚜繭蜂寄生的2-3齡煙蚜(F0)產出的同一后代(F1)若蚜15頭作為處理；并以同一未被煙蚜繭蜂寄生的2-3齡煙蚜(F0)產生的后代(F1)若蚜15頭作為對照。處理及對照共2組，各處理重復15次。對對照及處理進行觀察、記載，其他方法同1.2節。

2 結果

2.1 煙蚜繭蜂寄生對煙蚜(F0)影響

煙蚜：煙蚜蟲源為采自福建省南平市煙草公司邵武市煙蚜繭蜂繁殖基地的煙蚜無翅若蚜。先在人工氣候箱(溫度26±1℃，相對濕度75%±2%，光周期14L∶10D)的煙株上把田間采集到的煙蚜若蚜飼養2代(以得到相對一致、整齊的種群)以上，再接種到培養皿上用于試驗。每個培養皿里放入用打孔器打好的煙葉葉碟(直徑2.5 cm)3片，每片煙葉上均飼養1頭剛產出的1齡若蚜，并把濕棉花墊于煙葉下，以保持煙葉不易失水的同時又可防止若蚜逃脫；根據煙葉上蚜蟲蛻皮的數量判斷若蚜的齡期，試驗時先挑選低齡期若蚜進行試驗，其余若蚜繼續飼養。

圖1 煙蚜繭蜂寄生煙蚜1齡(A)、2齡(B)和3齡(C)若蚜后煙蚜的發育歷期

不同齡期煙蚜(F0)被煙蚜繭蜂寄生后，其產仔量也發生顯著變化(圖2: B)。2齡若蚜被寄生后產仔量受影響最大(F1,21=65.513,P=0.000)，每雌產仔量比對照減少了48.67頭，減少了100.00%；1齡若蚜被寄生后對產仔量影響最小(F1,22=0.013,P=0.911)，每雌產仔量比對照增加了0.83頭，增加了2.00%；其他若蚜被寄生后對產仔量影響居中，差異顯著。

圖2 煙蚜繭蜂寄生不同齡期煙蚜后當代(F0)煙蚜的壽命(A)和產仔量(B)

2.1.2壽命和產仔量：與未被寄生的對照相比，不同齡期煙蚜(F0)被煙蚜繭蜂寄生后，煙蚜壽命發生顯著變化(圖2: A)。2齡若蚜被寄生后受影響最大(F1,21=38.622,P=0.000)，比對照縮短了8.39 d，縮短了54.00%；4齡若蚜和成蚜被寄生后受影響最小(F1,23=0.005,P=0.943)，比對照縮短了0.13 d，縮短了1.00%；僅1齡若蚜被寄生后壽命比對照延長了3.61 d(F1,24=5.681,P=0.025)，延長了24.00%；3齡若蚜被寄生后的影響居中，比對照減少了39.00%(F1,22=18.723，P=0.000)。

2.2 煙蚜繭蜂對被寄生煙蚜后代(F1)影響

試驗在位于福建省福州市倉山區建新鎮的福建農林大學科技園田間實驗室進行，試驗溫度控制在26±1℃，相對濕度75%±2%，光周期14L∶10D。試驗采用葉片培養皿法，設置5組處理，即1-4齡煙蚜若蚜及成蟲分別設置用煙蚜繭蜂寄生的處理組及未寄生的對照組。處理組：把同時形成的大小一致的1齡煙蚜若蟲15頭接于煙葉主脈二側。之后接入交配后的煙蚜繭蜂雌蜂1頭，接蜂24 h后移走煙蚜繭蜂(被寄生后若蚜在外觀比較光亮，必要時結合顯微鏡觀察或解剖分析以確認蚜蟲被寄生過；并設置備用處理，以確保足量被寄生的煙蚜)。對照組：不接入煙蚜繭蜂，其他同處理。此外，對照及處理均用濕棉花(保濕)墊于煙葉底部的培養皿中。其他處理及對照組僅更換不同蟲齡煙蚜若蚜。并將對照及處理組的若蚜分開飼養(1頭/皿)，編號每頭蚜蟲。處理及對照共5組，10個處理，各處理重復15次。對對照及處理分別于處理后至死亡為止，每隔12 h一次，觀察并記載煙蚜蛻皮情況、產仔數量等生長發育及繁殖情況，并根據煙蚜若蟲蛻皮的間隔時間計算各蟲態的發育歷期，將各蟲態歷期相加計算煙蚜當代壽命，并統計煙蚜每雌產仔量。

圖3 煙蚜繭蜂寄生2-3齡若蚜后煙蚜后代(F1)的發育歷期

2.2.2壽命和產仔量：煙蚜2-3齡若蚜(F0)被寄生后，其后代(F1)壽命有顯著差異(P<0.05)(圖4: A)。被寄生煙蚜產生的后代(F1)的平均壽命是19.60 d，比未被寄生的若蚜所產后代(對照)的平均壽命延長了5.72 d，延長了41.20%。

被寄生煙蚜后代(F1)產仔量比對照的少，但差異不顯著(P>0.05)(圖4: B)。被寄生煙蚜產生后代的平均每雌產仔量是41.80頭，比對照減少了6.90頭，減少了14.00%。

圖4 煙蚜繭蜂寄生2-3齡若蚜后煙蚜后代(F1)的壽命(A)和產仔量(B)

3 討論

本試驗結果表明：煙蚜被煙蚜繭蜂寄生后，煙蚜(F0)各齡期的發育歷期縮短，受影響最顯著的是被煙蚜繭蜂寄生的煙蚜2和3齡若蚜，受影響最小的是被寄生的煙蚜1齡若蟲(圖1)。煙蚜繭蜂寄生煙蚜會加快若蚜發育速度，使之盡快發育至成蚜，2和3齡若蚜受影響最顯著，1齡若蚜受影響較小。被寄生后的煙蚜壽命相比對照而言，受影響最大的是2齡若蚜，壽命縮短了54.00%；被寄生后的煙蚜若蟲的產仔量相比對照而言，受影響最大的是2齡若蚜，產仔量減少了100.00%(圖2)。產生這些現象原因是可能在于煙蚜2齡若蚜被寄生的可能性最高，達到了100.00%，可能被寄生過后7 d 內煙蚜若蟲體內各個器官都被體內的煙蚜繭蜂幼蟲蠶食干凈而變成僵蚜，失去生命體征無法產生后代，對產仔量影響也最大，每雌產仔量比對照減少了48.67頭，減少了100.00%(圖2)。因此，在煙蚜繭蜂寄生煙蚜試驗中，對2齡若蚜壽命及其產仔量的影響比對其他齡期的影響更為顯著。4齡若蚜、成蟲體型較大較為靈活，在煙蚜繭蜂寄生過程當中，其會扭動掙扎而增加煙蚜繭蜂產卵器剌穿煙蚜身體的難度，導致寄生率較低(吳興富等, 2003)，蟲體較硬也可能不利于寄生，而對其壽命和產仔量的影響較小。煙蚜被煙蚜繭蜂寄生過后，壽命減短，產仔量也減少，說明煙蚜繭蜂對煙蚜種群的擴繁有較大的抑制作用，這為實際生產中煙蚜繭蜂防治煙蚜提供一定的科學依據。

本試驗中得出的結論與孟祥杰(2009)和伍紹龍等(2017)的結論較一致，研究結果均表明煙蚜繭蜂對2和3齡煙蚜若蚜的影響大于對1齡若蟲。但與吳興富等(2003)研究結果存在一定差異，其研究表明，煙蚜繭蜂寄生煙蚜后，煙蚜的產仔量和壽命均發生較大影響，若蚜齡期越小，被寄生后產生的影響越大。而本試驗結果表明，煙蚜繭蜂寄生煙蚜1齡若蚜對其產仔量和壽命有一定影響，但是對2和3齡若蚜的影響更為顯著(圖2)。不一致的可能原因為采用的煙蚜繭蜂來源和種群密度不同：本試驗所用煙蚜繭蜂均為福建邵武煙蚜繭蜂繁育基地采回的僵蚜經繁殖兩代后產生的煙蚜繭蜂，而吳興富等(2003)試驗所用煙蚜繭蜂是直接采自田間煙株上。二者不同的蜂源和種群對煙蚜的寄生能力不同(李子蒙等, 2012)，低密度、煙株上采集到的煙蚜繭蜂寄生能力不及高密度、網壁上趨光的煙蚜繭蜂。煙蚜被煙蚜繭蜂寄生過后產生的后代(F1)的平均壽命比對照的延長了41.20%(圖4)，但3齡若蚜被寄生后的當代煙蚜的平均壽命縮短了54.00%(圖2)，造成這種現象的可能原因是當代被寄生煙蚜體內消耗營養物質等較多，影響了煙蚜的正常生長發育，縮短了壽命；而上代被寄生煙蚜產生的下一代煙蚜壽命卻增加，可能是因為被寄生當代煙蚜能成功提供煙蚜繭蜂正常生長發育而自身不適減少壽命，但被寄生能產生后代的煙蚜及其后代，通過自身體內調控機制或體內煙蚜繭蜂刺激煙蚜(F0)而提高其適應性，形成了較強的生命力而增加了后代煙蚜的壽命。煙蚜繭蜂寄生1齡若蚜后當代(F0)煙蚜壽命比對照的增加(圖2)，這可能是因為煙蚜繭蜂與煙蚜協同進化造成即煙蚜繭蜂寄生1齡若蚜消耗物質較多而延緩發育，且寄生誘導煙蚜體內有益物質增加，提高了若蚜的生命力，使其達到更好地適應體內煙蚜繭蜂卵的發育，最后導致其壽命增加。煙蚜繭蜂寄生后的后代(F1)煙蚜各個齡期的歷期均發生不同程度的縮短，影響最大的是1齡若蚜的歷期，1齡若蚜被寄生的可能性較低，2齡若蚜的歷期延長，2齡若蚜被寄生可能性較高(圖3)。所以，從不同齡期煙蚜的歷期看，在自然條件下，被煙蚜繭蜂寄生過后的后代(F1)煙蚜被煙蚜繭蜂寄生的可能性高于對照組的。但被煙蚜繭蜂寄生過后的煙蚜體內酶含量等調控物質變化情況，煙蚜歷期的影響是否與保幼激素、蛻皮激素有關等問題有待進一步深入研究。

本研究發現，煙蚜繭蜂寄生煙蚜若蚜后，煙蚜若蚜歷期和壽命縮短，產仔量降低。所以，在煙蚜的當代2齡若蚜期使用煙蚜繭蜂來進行防治，可較好地控制煙蚜種群的大發生、大危害，以減少煙葉或其他作物的損失。