發酵飼料對母豬繁殖性能與免疫功能的影響

章紅兵，簡毅科，舒芳衛

（1.金華職業技術學院，浙江金華 321007；2.播恩生物技術股份有限公司，廣東廣州 511400；3.金華市金東區大地生態養殖場，浙江金華 321007）

母豬的繁殖性能和免疫功能與仔豬的生長性能和豬場經濟效益息息相關，母豬的繁殖性能與免疫功能呈正相關[1]。在現代養殖環境下，由于養殖方式和營養等因素影響，母豬免疫功能下降和繁殖障礙問題日趨突出。特別在非洲豬瘟常態化背景下，通過飼料調控豬只免疫狀態來保護易感動物、提高抗非洲豬瘟的感染閾值尤為重要[2]。發酵飼料是指利用國家相關法規允許使用的飼料原料和微生物，通過發酵工程技術生產的含有微生物或其代謝產物的單一飼料和混合飼料。優質發酵飼料富含有機酸、有益菌、小肽、細菌素等多種代謝產物，能改善腸道健康，提升免疫功能和母豬繁殖性能[3-5]。實現從減抗到無抗養殖轉型是近年動物營養學的研究熱點，發酵飼料在調節腸道、增強免疫功能等方面具有廣闊的應用前景。但發酵飼料在畜禽上應用的研究結果并非十分一致，而且發酵飼料對于母豬繁殖性能與免疫功能的研究較少。本試驗旨在研究發酵飼料對母豬繁殖性能、哺乳仔豬生長性能和部分免疫指標的影響，為發酵飼料在母豬飼養中的應用提供依據。

1 材料與方法

1.1 試驗設計 選擇金華市金東區大地生態養殖場提供的預產期、體重、膘情、胎次接近，臨床檢查健康，乳頭正常的長×大二元雜交母豬30 頭，隨機分成對照組與試驗組，每組15 個重復，每個重復1 頭母豬，同一間產房飼養。對照組飼喂常規日糧，試驗組用5%發酵飼料代替常規日糧中5%的玉米，其他日糧組成不變。正式試驗從母豬妊娠第93 天開始至分娩后第22 天結束，正式試驗開始前進行7 d 預試驗。試驗豬高床單欄飼養，全漏縫地板，分餐飼喂，自由飲水，不銹鋼料槽。免疫、驅蟲、消毒、飼喂時間及飼養管理按豬場常規方案執行。

1.2 日糧配方與營養成分 2 組日糧均為金華市金東區大地生態養殖場自行配制的粉料（表1），濃縮料和發酵飼料由浙江播恩生物技術有限公司生產。試驗用發酵飼料以玉米為主要原料，篩選芽孢桿菌、酵母菌、乳酸桿菌和丁酸梭菌4 株菌，采用固態發酵工藝生產。發酵后有益菌≥109CFU/g、小肽≥2.0%、總酸≥5.0%。

1.3 樣品采集與指標測定

1.3.1 乳汁樣品采集與指標測定 于母豬分娩結束后12 h及分娩后第7、14、21 天08:00 分別收集乳汁。采集前用0.1%熱高錳酸鉀溶液擦拭并按摩母豬乳房，用75%酒精棉對乳頭進行消毒，然后分別擠壓前、中、后乳頭，收集20 mL 乳汁于EP 管中，混勻，迅速將樣品放在-20℃冰箱中保存備用。常乳樣品采集前10 min 經母豬耳緣靜脈注射20 IU 催產素。檢測前經12 000 r/min 離心15 min去除乳脂。采用酶聯免疫檢測試劑盒測定乳汁中免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）水平，試劑盒均購于南京建成生物工程研究所。

表1 日糧組成與營養成分

1.3.2 血清樣品采集與指標測定 每組隨機選取10 頭體況相近的母豬，于分娩后12 h 及分娩后第7、14、21天08:00 空腹，分別用促凝真空管在耳緣靜脈采集血液10 mL，于4℃靜置20 min，3 000 r/min 離心30 min，取上層血清-20℃保存備用。采用酶聯免疫檢測試劑盒測定血清IgA、IgG、IgM 含量；每窩隨機選取2 頭仔豬（公、母各半），前腔靜脈采集1、7、14、21 日齡仔豬血液，同樣方法測定仔豬血清IgA、IgG、IgM 含量。所有指標嚴格按照試劑盒說明書進行測定，試劑盒均購于南京建成生物工程研究所。

1.3.3 糞便樣品采集與指標測定 分別于正式試驗開始時、分娩當天、試驗結束當天，用滅菌棉拭子采集母豬直腸新鮮糞便5 g，分裝在無菌封口袋中，-20℃保存備用。采用MRS 瓊脂培養基測定糞便中乳酸桿菌數量，采用麥康凱瓊脂培養基測定糞便中大腸桿菌數量。

1.3.4 母豬便秘發生率的測定 每天早、中、晚各1 次觀察母豬排便情況和糞便性狀，記錄發生便秘的母豬頭數。便秘判斷標準：糞便成形、體積縮小，糞便水分較少，質地變硬，成顆粒狀或圓珠狀，顏色暗灰或呈黃色或黑色。便秘發生后不采取治療措施。便秘率=（便秘母豬頭數×便秘天數）/（母豬總頭數×試驗天數）×100%。

1.3.5 母豬繁殖性能測定 在母豬分娩當天記錄產仔總數、產活仔總數，計算窩均產仔數和窩均產活仔數；記錄仔豬死亡頭數，計算斷奶成活率；分別對初產活仔和斷奶仔豬進行稱重，記錄仔豬初生窩重（每頭活仔初生個體重之和）、斷奶窩重（每頭斷奶仔豬個體重之和），計算平均初生重、平均斷奶重和仔豬平均日增重（ADG）；記錄每頭母豬從第1 頭仔豬產出到胎衣全部排出的時間間隔，計算平均產程；觀察母豬產后子宮炎、乳房炎、無乳綜合征（MMA）發生情況，計算MMA 發生率；觀察母豬斷奶后發情表現，計算斷奶后7 d 的發情率。

MMA 判定標準：母豬產后不食或食欲減退，體溫升高，呼吸急促，陰門紅腫，陰道內流出污紅色或膿性分泌物，乳房紅腫或蒼白扁平，少乳或無乳，趴臥不讓仔豬吮乳或仔豬不斷用力拱撞乳房吮乳，仔豬吮乳后下痢、消瘦。MMA 發生后采取治療措施，但不改變日糧組成，不在日糧中添加任何功能性添加劑和藥物。

母豬發情判斷標準：食欲下降、興奮不安、爬跨其他母豬或接受其他母豬爬跨，出現“靜立反射”；陰戶充血、腫脹、流出透明黏液。

窩均產仔數=產仔總數（頭）/試驗母豬總數（頭）

窩均產活仔數=產活仔總數（頭）/試驗母豬總數（頭）

平均初生重=初生窩重（kg）/窩活仔數（頭）

平均斷奶重=斷奶窩重（kg）/窩斷奶仔數（頭）

ADG=（斷奶窩重-初生窩重）/試驗天數/斷奶仔數頭數

仔豬斷奶成活率=斷奶仔豬數（頭）/產活仔豬數（頭）×100%

平均產程=所有母豬產程總和（h）/ 分娩母豬總數（頭）

MMA 發生率=發生MMA 母豬數（頭）/ 試驗母豬總數（頭）×100%

斷奶后7 d 發情率=斷奶后7 d 內發情母豬數（頭）/試驗母豬總數（頭）×100%

1.4 統計分析 應用SAS 9.2 軟件對數據進行單因素方差分析（One-Way ANOVA），以P＜0.05 作為差異顯著的標準。

2 結果

2.1 發酵飼料對母豬便秘率的影響 由表2 可知，除分娩后15～21 d 對照組與試驗組便秘率差異不顯著外，試驗組在各階段及整個試驗期平均便秘率較對照組均極顯著下降。表明發酵飼料能顯著改善母豬的糞便形態，降低便秘發生率。

表2 發酵飼料對母豬便秘率的影響 %

2.2 發酵飼料對母豬繁殖性能的影響 從表3 可以看出，試驗組窩均產仔總數、窩均產活仔數、斷奶成活率和平均日增重與對照組差異不顯著，其中窩均產活仔數、斷奶成活率、平均日增重較對照組有提高趨勢。試驗組的斷奶仔豬數、平均初生重、平均斷奶重和斷奶后7 d 發情率較對照組均顯著提高，平均產程極顯著縮短，MMA發生率極顯著降低。

表3 發酵飼料對母豬繁殖性能的影響

2.3 發酵飼料對母豬乳汁和血清中免疫球蛋白水平的影響 由表4 可知，與對照組相比，試驗組母豬初乳中IgA 水平顯著提高、IgG 和IgM 水平極顯著提高；第7、14、21 天乳汁中IgA、IgG 和IgM 水平均極顯著提高。分娩當天和分娩后第7、14、21 天母豬血清IgA 水平均極顯著提高，分娩當天和分娩后第7 天母豬血清IgG水平顯著提高，分娩當天和分娩后第7、14 和21 天母豬血清IgM 水平均顯著提高，分娩后第14、21 天母豬血清IgG 水平差異不顯著。

表4 發酵飼料對母豬乳汁和血清免疫球蛋白水平的影響 mg/mL

2.4 發酵飼料對哺乳仔豬血清中免疫球蛋白水平的影響從表5 可以看出，與對照組相比，試驗組哺乳仔豬出生后當天血清中IgA、IgG 和IgM 水平均極顯著提高；7日齡血清中IgA 水平顯著提高，IgG 和IgM 水平極顯著提高；14 日齡血清中IgA、IgG 和IgM 水平均極顯著提高；21 日齡血清中IgA 水平顯著提高，IgG 水平極顯著提高，IgM 水平差異不顯著。

表5 發酵飼料對哺乳仔豬血清中免疫球蛋白水平的影響 mg/mL

2.5 發酵飼料對母豬直腸微生物菌群數量的影響 由表6 可知，與對照組相比，試驗組分娩當天和分娩后21 d，大腸桿菌數量均極顯著減少，乳酸桿菌數量均極顯著增加。試驗開始時，試驗組與對照組母豬直腸大腸桿菌和乳酸桿菌數量差異不顯著，對照組整個試驗期大腸桿菌和乳酸桿菌數量變化不顯著，但試驗組隨著發酵飼料使用時間的延長，大腸桿菌數量顯著下降，乳酸桿菌數量極顯著增加。

表6 發酵飼料對母豬直腸微生物菌群數量的影響 ×107 CFU/g

3 討 論

3.1 發酵飼料對母豬便秘率的影響 規?；B豬中，母豬便秘是普遍現象，特別是妊娠后期和哺乳期便秘更為嚴重，而便秘會不同程度降低母豬的年生產力。研究表明，補飼發酵飼料能改善腸道內環境、促進腸道運動和增加食糜流通性，改善母豬糞便形態，減少母豬便秘的發生[6-7]。本研究發現，給妊娠后期和哺乳期母豬補飼發酵飼料能顯著降低母豬便秘發生率，這可能與發酵飼料中含有較豐富的膳食纖維、維生素、有機酸、多糖及益生菌[8-9]等成分有關。高纖維飼糧可以刺激胃腸蠕動、加快食糜排空，提高回腸末端食糜的流通速度，有效降低便秘發生；有機酸能刺激腸道蠕動，丁酸能為腸壁平滑肌直接提供蠕動能量，有效降低便秘發生；益生菌可調節后腸道的微生態平衡，在腸內定植產生的短鏈脂肪酸可以降低結腸內pH，刺激腸道蠕動，提高食糜排空速度，抑制毒素的積累而促進腸道健康，從而降低便秘發生。

3.2 發酵飼料對母豬繁殖性能的影響 研究發現，母豬飼喂發酵飼料可顯著提高其產仔數和產活仔數、仔豬的初生重、平均日增重和平均斷奶重[10]，改善母豬繁殖性能和仔豬生長性能[11]。其原因可能與發酵飼料可提高母乳質量、泌乳量和仔豬自身腸道的吸收情況有關[12]。本試驗所用的發酵飼料含有豐富的酵母菌、乳酸桿菌、芽孢桿菌和丁酸梭菌及其甘露寡糖、果寡糖、低聚殼聚糖、維生素、有機酸、小肽、細菌素、消化酶、飼料抗營養物質分解酶等代謝產物。其中，甘露寡糖、果寡糖、低聚殼聚糖能增強動物機體的免疫力[13]；氨基酸、維生素、活性肽、有機酸和消化酶等能促進腸道對養分的消化吸收[14]；益生菌的定植能在腸道內形成生物屏障，抑制有害菌侵染，調節腸道微生態區系，促進腸道健康發育，提高微生物蛋白的合成和對營養的吸收率[15]；酵母菌和芽孢桿菌的代謝可產生大量乳酸，降低腸道pH，提高母豬消化率和飼料轉化率，提高乳汁產量和質量，有利于仔豬的健康生長，進而提高斷奶窩重[16]。益生菌和代謝活性產物共同作用于機體，參與機體生理活動和代謝調節，不僅能增強機體免疫能力，改善母豬健康狀態，還能提高母豬繁殖性能，促進仔豬生長[15]。發酵飼料提高了母乳中免疫球蛋白含量，仔豬攝入母乳可促進腸道健康發育，提高抗病力，從而提高哺乳仔豬的生長性能[17]。但本研究結果顯示，試驗組用5%發酵飼料代替常規日糧中5%的玉米，未能提高產仔總數、產活仔數和仔豬平均日增重，這與王小明等[10]研究結果不一致。

劉江英等[18]研究表明，多菌種聯合發酵飼料能夠改善黃羽肉雞沙門氏菌感染導致的炎癥反應；楊淑華等[19]研究表明，發酵乳桿菌能夠調控炎性細胞因子的表達與釋放，抑制炎性反應的發生，對脂磷壁酸（LTA）所誘導的牛子宮內膜細胞炎性損傷發揮保護作用；賴濤等[20]研究表明，給妊娠后期和哺乳期母豬補飼發酵蘆筍下腳料能顯著降低母豬血清白細胞介素-6（IL-6）含量；毛春瑕等[7]研究表明，發酵飼料可降低母豬初乳中炎性因子水平，但未見發酵飼料對母豬產后MMA 的影響。本研究表明，妊娠后期與哺乳期母豬補飼發酵飼料可極顯著降低MMA 發生率，可能與發酵飼料含有多種活性物質且含量較高有關，增強了機體免疫能力，改善了母豬健康狀況，從而降低了便秘發生率、縮短了產程、減少了炎性因子。母豬便秘可能會導致難產、死胎，糞便發酵產生的毒素還會損害器官，引發子宮炎、乳房炎、產后泌乳障礙等諸多問題，這與本研究結果便秘率與MMA 發生率呈正相關一致。

蟲草真菌發酵中草藥能夠顯著縮短母豬斷奶至發情間隔，降低乏情率[21]；發酵中藥能顯著縮短母豬產程和斷奶至發情間隔[22]；微生態制劑飼料能提高陜北絨山羊發情率[23]，但未見發酵飼料對母豬斷奶后發情率的影響。本研究表明，發酵飼料可顯著提高斷奶后7 d發情率，這可能與發酵飼料豐富的活性代謝產物參與機體生理活動和代謝調節有關。

3.3 發酵飼料對免疫球蛋白水平的影響 李薛強等[24]研究發現，復合菌培養物或發酵飼料能顯著提高母豬血清中免疫球蛋白含量，改善母豬機體免疫功能。飼料發酵過程中大量增殖的益生菌及其代謝產物對母豬起到明顯的免疫促進作用[7]。IgA、IgG、IgM 水平是反映機體免疫機能的重要指標[25]。本試驗結果顯示，圍產期母豬日糧中使用發酵飼料能顯著提高母豬乳汁、血清和哺乳仔豬血清中IgG、IgA、IgM 水平，且與母豬產程縮短、斷奶后7 d 發情率提高及MMA 發生率下降均呈正相關，這與鹿曉龍等[26]研究結果一致。母豬免疫功能提高可提高乳汁質量，進而提高仔豬被動免疫力。本試驗發酵飼料中的活性氨基酸、小肽、有機酸等發酵產物能刺激機體對營養物質的消化、吸收，調節消化道內微生物區系，影響免疫系統的功能[27]。發酵飼料中的有益菌可以作為一種非特異性免疫調節因子，通過吞噬細胞活力或作為佐劑激活腸道黏膜中的巨噬細胞、T 細胞、NK 細胞、DC 細胞等，增強母豬自身的免疫應答反應[28-29]。雙歧桿菌和乳酸菌的活菌、細菌結構性分子和基因組DNA 等均具有免疫調節功能[30]。同時，代謝產物中甘露聚糖等作為一種免疫促進劑，能夠增強機體的非特異性免疫能力[13]。

3.4 發酵飼料對母豬直腸微生物菌群數量的影響 研究發現，飼喂發酵飼料能夠提高糞便中乳酸菌等益生菌數量[31]，降低大腸桿菌、沙門氏菌等有害菌數量[31-32]，調節動物體內菌群平衡[33]。本試驗結果顯示，母豬日糧中使用發酵飼料能極顯著提高母豬直腸中乳酸桿菌數量，極顯著降低大腸桿菌數量，與其他研究報道一致[34-35]。這主要是發酵飼料中的益生菌進入動物腸道后能夠通過競爭性抑制作用阻止有害菌群在動物腸道的黏附與繁殖，促進有益微生物的繁殖，減少潛在的致病性微生物，改善母豬腸道微生物的平衡。本試驗結果還表明，母豬便秘的發生與直腸中有益菌數量呈負相關，與有害菌數量呈正相關。

4 結 論

本研究結果表明，母豬日糧中用5%發酵飼料代替玉米能提高母豬繁殖性能和免疫功能，降低母豬便秘發生率，減少母豬直腸大腸桿菌數量、增加乳酸桿菌數量。