膠乳增強透射免疫比濁法與電化學發光免疫分析法檢測CEA和AFP的結果對比

諶秋華，陳燕玲，謝聯斌

(中國人民解放軍廬山康復療養中心a.檢驗科；b.腫瘤科，江西 九江 332000)

癌胚抗原(CEA)是首先從結腸癌和胚胎組織中提取出的一種腫瘤相關抗原，屬于細胞膜結構蛋白，存在于細胞漿中，可通過細胞膜分泌到細胞外進入血液中[1]。臨床實踐證實，CEA可以作為結腸癌、肺癌、乳腺癌以及其他多種惡性腫瘤的特異性標志物，在惡性腫瘤的鑒別診斷、病情監測、療效評價等方面均具有重要的臨床價值[2]。甲胎蛋白(AFP)是一種糖蛋白，屬于白蛋白家族，在胎兒血液循環中的水平較高，出生后2～3個月時AFP被白蛋白替代，血液中水平較低[3]。AFP具有多種生物學功能，如免疫抑制、淋巴細胞誘導凋亡等，其與多種腫瘤的發生發展密切相關，可作為多種腫瘤的陽性檢測參考指標[4]。本研究比較膠乳增強透射免疫比濁法與電化學發光免疫分析法對CEA和AFP的檢測結果，旨在為臨床血清腫瘤標志物檢測方法的選擇提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本研究210名受試者為中國人民解放軍廬山康復療養中心2015年7月至2020年4月期間收治的124例結直腸癌患者和在此期間來院進行體檢的86例健康人群。其中男125例，女85例；年齡26～76歲，中位年齡47.4歲；消化系統腫瘤73例，呼吸系統腫瘤51例。本研究符合知情同意原則。

1.2 檢測方法

1.2.1 膠乳增強透射免疫比濁法

清晨空腹收集受試者全血標本，收集血清后，應用全自動生化分析儀(日本HITACHI公司生產，型號：7180)進行膠乳增強透射免疫比濁法檢測。CEA、AFP膠乳增強透射免疫比濁法檢測試劑盒均購于北京九強生物技術股份有限公司，檢測操作步驟嚴格按照試劑盒說明書進行。檢測儀器的狀態和質量控制情況均良好。

1.2.2 電化學發光免疫分析法

清晨空腹收集受試者全血標本，收集血清后，應用電化學發光儀(德國ROCHE公司生產，型號：Cobas e 411)進行電化學發光免疫分析法檢測。CEA、AFP電化學發光免疫分析法檢測試劑盒均購于德國ROCHE公司，檢測操作步驟嚴格按照試劑盒說明書進行。檢測儀器的狀態和質量控制情況均良好。

1.3 觀察指標

分別比較應用膠乳增強透射免疫比濁法、電化學發光免疫分析法檢測血清中CEA、AFP的水平。將兩種檢測方法的CEA、AFP檢測結果進行Pearson相關性分析。分別對兩種檢測方法檢測血清中CEA、AFP水平診斷腫瘤的受試者工作特征曲線(ROC曲線)進行分析，統計ROC曲線下面積(AUC)。

1.4 統計學方法

2 結果

2.1 兩種檢測方法檢測結果比較

兩種檢測方法所得CEA、AFP值比較，差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 兩種檢測方法CEA、AFP值的比較

2.2 兩種檢測方法檢測CEA、AFP的相關性分析

Pearson直線相關性分析結果顯示，兩種方法檢測所得CEA、AFP值呈正相關(r=0.733、0.669，P<0.01)。見圖1—2。

2.3 兩種檢測方法檢測CEA、AFP診斷腫瘤的ROC曲線

分別將CEA、AFP納入腫瘤診斷的ROC曲線分析中。膠乳增強透射免疫比濁法檢測CEA、AFP的結果在診斷腫瘤中的AUC分別為0.674、0.655，差異均有統計學意義(P<0.001)，見表2、圖3A。電化學發光免疫分析法檢測CEA、AFP的結果在診斷腫瘤中的AUC分別為0.606、0.639，差異均有統計學意義(P<0.001)。見表3、圖3B。

表2 膠乳增強透射免疫比濁法AUC統計結果

表3 電化學發光免疫分析法AUC統計結果

3 討論

臨床檢驗學中檢測血清中CEA、AFP的方法較多，如酶聯免疫吸附試驗、電化學發光免疫分析法、膠乳增強透射免疫比濁法等。酶聯免疫吸附試驗的操作比較簡單，費用較低，臨床可廣泛應用，特別適用于基層醫院對腫瘤患者的篩查，但該方法的檢測敏感性較低，準確度和穩定性并不十分理想，因此檢測的結果與金標準之間存在一定的差距[5]。電化學發光免疫分析法起源于20世紀90年代，本質上是一種新型標記免疫分析方法，實驗原理是基于抗原和抗體的特異性反應進行檢測的一種手段，通過將一些容易測定又具有高度敏感性的物質標記到特異性抗原或抗體分子上，再通過這些標記物的增強放大效應來顯示反應體系中抗原或抗體的性質與含量[6-7]。電化學發光免疫分析法的檢測速度較快，檢測結果的準確度較高，應用廣泛，且實驗的過程具有較高的自動化的特點，因此在臨床相關指標的檢測中應用較為廣泛[8-9]。然而，電化學發光免疫分析法所使用的設備和試劑目前均需進口，因此價格較為昂貴，導致臨床應用存在一定的局限性。膠乳增強透射免疫比濁法是將液相內的沉淀反應與現代光學儀器和自動分析技術相結合的一種指標分析技術[10-11]。當抗原、抗體在特定的電解質溶液中進行反應時，將形成小分子免疫復合物(免疫復合物微粒)，導致反應液出現一定的濁度，經過相關的儀器檢測后，可通過吸光度來進行分析(待測抗原量與反應溶液的濁度呈正相關關系)，與相應的標準曲線進行對照后，即可計算得出血清中相關檢測指標的水平[12-13]。膠乳增強透射免疫比濁法具有操作簡單、反應迅速、成本低廉的優勢，檢測過程不需要使用價格昂貴的儀器，實驗試劑無需進口，因此在臨床上值得推廣使用[14]。

本研究結果中，分別應用膠乳增強透射免疫比濁法、電化學發光免疫分析法檢測血清中CEA、AFP水平，檢測結果顯示兩種檢測方法檢測得到的血清CEA、AFP濃度比較，差異無統計學意義(P>0.05)。相關性分析結果也顯示，膠乳增強透射免疫比濁法與電化學發光免疫分析法檢測血清中CEA、AFP的結果均具有明顯正相關關系(r=0.733、0.669，P<0.01)。以上均說明膠乳增強透射免疫比濁法在血清CEA、AFP濃度的檢測方面，其檢測結果與電化學發光免疫分析法相比較基本相當。在臨床腫瘤的診斷中，筆者分別將CEA、AFP納入腫瘤診斷的ROC曲線分析中，分析結果發現：兩種檢測方法檢測血清中CEA的結果在腫瘤診斷中的AUC值分別為0.674、0.606，差異均有統計學意義(P<0.01)；兩種檢測方法檢測血清中AFP的結果在腫瘤診斷中的AUC值分別為0.655、0.639，差異均有統計學意義(P<0.01)。提示分別使用膠乳增強透射免疫比濁法與電化學發光免疫分析法檢測血清中CEA、AFP的結果，在腫瘤診斷中的價值基本一致。

綜上所述，膠乳增強透射免疫比濁法對血清CEA、AFP的檢測結果與電化學發光免疫分析法的檢測結果基本一致，且具有操作簡單、成本低廉的優點，其檢測結果可以為臨床腫瘤的診斷提供參考。