EmAb、ACA及PDW聯合檢測在復發性流產臨床診斷中的應用價值

韋志萍 林忠

作者單位：廣西中醫藥大學，廣西，南寧530022

美國生殖醫學學會對復發性流產的定義是：指連續出現2 次及2 次以上妊娠丟失［1］。目前，部分復發性流產的病因尚未明確，消除復發性流產給患者帶來的困擾，確保產婦順利生產是當前臨床面臨的難題。有學者研究指出，產婦自身抗體水平異常與復發性流產的發生存在密切聯系，抗子宮內膜抗體（Anti?endometrial antibody，EmAb）、抗心磷脂抗體（Anticardiolipin antibody，ACA）均為自身抗體群，可抑制前列腺素生成，激活血小板的作用，當血液處于高凝狀態時，會引發胎盤功能不足，導致對胎兒供氧不足，最終引發胎兒死亡［2?3］。血小板分布寬度（Platelet distribution width，PDW）是反映血小板活化程度、血栓進展程度的重要指標［4］。本研究以分析EmAb、ACA 及PDW 聯合檢測在復發性流產臨床診斷中的應用價值?，F研究報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018年7月至2020年6月本院收治的106 例復發性流產產婦作為觀察組。納入標準：①均符合《復發性流產診治的專家共識》［5］，經B超檢查確定為流產，且自然流產次數在2 次以上；②夫婦染色體核型分析正常；③生殖內分泌激素水平正常范圍內。排除標準：①合并系統性紅斑狼瘡、多發性肌炎等自身免疫性疾病者；②合并妊娠糖尿病、高血壓等影響EmAb、ACA 及PDW水平的疾病者；③生殖器官感染或畸形。

選取同期在本院進行孕檢的健康女性106 例設為對照組，入選孕婦均否認自然流產史，無自身免疫性疾病。2 組產婦一般資料比較差異無統計學意義（P>0.05），見表1。本研究經醫院倫理委員會批準通過，研究對象均簽署知情同意書。

表1 2 組患者基線資料比較（±s）Table 1 Comparison of baseline data between 2 groups（±s）

表1 2 組患者基線資料比較（±s）Table 1 Comparison of baseline data between 2 groups（±s）

組別觀察組對照組t 值P 值n 106 106自然流產產次（次）2.01±0.22--平均年齡（歲）25.41±3.31 25.48±3.39 0.152 0.879體質質量指數（kg/m2）26.08±2.31 26.12±2.37 0.124 0.901停經時間（周）10.38±0.95 10.31±0.90 0.551 0.582---

1.2 方法

1.2.1 PDW 水平檢測方法

對照組于體檢當日清晨空腹采取肘靜脈血5 mL，觀察組患者于入院當日清晨空腹采取肘靜脈血5 mL。乙二胺四乙酸二鉀抗凝，室內質控品恢復至室溫。采用日本希森美康醫用電子有限公司生產的全自動血細胞分析儀（型號：SysmexXN?1000）檢測PDW 水平，配套試劑盒購自希森美康醫用電子有限公司（批號20190322）。PDW 參考范圍值：9～13（%）［6］。

1.2.2 ACA 及EmAb 水平檢測方法

采用化學發光法檢測2 組血清ACA 水平，試劑盒購自北京源德生物醫學工程有限公司，所有操作嚴格按照試劑盒說明書進行。應用ELISA 對2 組血清EmAb 水平檢測，試劑盒購自鄭州安圖生物工程有限公司，所有操作嚴格按照試劑盒說明書進行。應用波長為450nm 的酶標儀對實驗孔光密度值（Optical density value，OD）進行測定，當OD 值大于或等于l 臨界值則可判斷為陽性，反之則判斷為陰性［7］。

1.3 觀察指標

比較2 組EmAb、ACA 及PDW 表達情況，并比較不同流產次數的產婦血清mAb、ACA 及PDW水平；分析EmAb、ACA 及PDW 表達水平與流產次數的關系。

1.4 統計學方法

采用SPSS 18.0 軟件進行數據統計分析，計數資料以n（%）表示，采用χ2檢驗；計量資料采用（）表示，組間比較行t檢驗；多組間比較行F檢驗；繪制ROC 曲線，并計算ROC 曲線下面積等指標，以分析EmAb、ACA 及PDW 檢測及三者聯合檢測對妊娠期婦女發生復發性流產的預測價值；以P<0.05 為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 2 組EmAb、ACA 及PDW 表達情況比較

觀察組EmAb 及ACA 陽性表達率高于對照組，PDW 表達水平高于對照組，差異具有統計學意義（P<0.05）。見表2。

表2 2 組EmAb、ACA 及PDW 表達情況比較［n（%），（±s）］Table 2 Comparison of expression of EMAb，ACA and PDWbetween 2 groups［n（%），（±s）］

表2 2 組EmAb、ACA 及PDW 表達情況比較［n（%），（±s）］Table 2 Comparison of expression of EMAb，ACA and PDWbetween 2 groups［n（%），（±s）］

組別觀察組對照組t/χ2值P 值n 106 106陰性57（53.77）96（90.57）陰性62（58.49）100（94.34）--EmAb陽性49（46.23）10（9.43）35.721<0.001 ACA陽性44（41.51）6（5.66）37.794<0.001 PDW（%）16.41±3.89 11.23±2.09 12.077 0.001

2.2 觀察組不同流產次數EmAb、ACA 及PDW 表達情況比較

EmAb、ACA 陽性表達率：流產4 次>流產3 次>流產2 次，PDW 表達水平：流產4 次>流產3 次>流產2 次，差異均具有統計學意義（P<0.05）。見表3。

表3 觀察組不同流產次數EmAb、ACA 及PDW 表達情況比較［n（%），（±s）］Table 3 Comparison of EMAb，ACA and PDW expression in observation group with different abortion times［n（%），（±s）］

表3 觀察組不同流產次數EmAb、ACA 及PDW 表達情況比較［n（%），（±s）］Table 3 Comparison of EMAb，ACA and PDW expression in observation group with different abortion times［n（%），（±s）］

注：與流產3 次比較，aP<0.005。

次數2 次3 次4 次F/χ2值P 值例數（n=106）31 40 35 EmAb陽性（n=49）2（4.08）13（26.53）34（69.39）a 4.457 0.035陰性（n=57）29（50.88）27（47.37）1（1.75）陰性（n=62）30（48.39）32（51.61）0（0.00）--ACA陽性（n=44）1（2.27）8（18.18）35（79.55）a 8.634 0.003 PDW（%）15.62±1.89 17.45±2.08 19.22±2.33a 23.850<0.001

2.3 EmAb、ACA 及PDW 檢測及三者聯合檢測對妊娠期婦女發生復發性流產的預測價值

ROC 曲線分析結果顯示：EmAb、ACA、PDW 單獨

及三者聯合檢測曲線下面積分別為0.878、0.834、0.855、0.945，各指標曲線下面積以聯合檢測最大（P<0.005），見表4 及圖1。

表4 EmAb、ACA 及PDW 檢測及三者聯合檢測對妊娠期婦女發生復發性流產的預測價值Table 4 the predictive value of EMAb，ACA and PDW detection and their combined detection for recurrent abortion in pregnant women

圖1 EmAb、ACA 及PDW 檢測及三者聯合檢測對妊娠期婦女發生復發性流產的預測價值Figure 1 the predictive value of EMAb，ACA and PDW detection and their combined detection for recurrent abortion in pregnant women

3 討論

復發性流產是育齡期女性不育疾病中的頑疾，染色體因素、內分泌因素、感染因素、生殖器解剖等多種因素均會引發復發性流產。隨著廣大學者對復發性流產作用機制研究的不斷深入，目前認為復發性流產患者存在潛在的自身免疫功能的失調，因此復發性流產也稱為“亞臨床自身免疫疾病”［8］。

有學者研究報道，ACA 是引起反復流產、死胎、妊娠高血壓疾病和胎兒宮內生長受限等最主要的自身抗體［9］。本研究中，觀察組ACA 陽性表達率明顯高于正常孕婦，流產4 次的患者ACA 陽性表達率明顯高于流產2 次及流產3 次的患者，這一研究結果與既往文獻報道結果一致［10?11］。ACA是一種以血小板和內皮細胞膜上帶負電荷的心磷脂作為靶抗原的自身抗體，位于細胞膜脂質雙層的內層，能夠避免被免疫系統所識別［12］。ACA 激活血小板的活性，促使血小板黏附、聚集，并釋放出血栓素A2 引起血小板凝聚，最終形成血栓，同時ACA高表達還會促使胎盤血管收縮和血栓形成，胎盤的血流量減少，致使胎兒氧供不足而死亡［13］?？梢?，ACA 可作為檢測不良妊娠結局的重要指標。

PDW 是反映血小板大小分布的指標，通過形態及功能而發生變化，是血小板活化的特異性標志物［13］。已有較多文獻報道，PDW 與心腦血管疾病、糖尿病等代謝性疾病的發生有著密切聯系［14］。Shukla 等學者［15］報道，在復發性流產患者，PDW 表達水平會明顯高于正常孕婦，且PDW 表達量會隨著患者流產次數增加而提高，這一研究結果與本研究結果一致。

本研究經采用ROC 曲線分析流產次數與EmAb、ACA 及PDW 檢測及三者聯合檢測對妊娠期婦女發生復發性流產的預測價值，結果顯示各指標曲線下面積以聯合檢測最大，這一研究結果與Ransing 等學者［16］報道結果一致。EMAb 存在于子宮內膜中，是一種特異性的自身抗體，子宮內膜是胚胎著床及發育的重要場所，內膜的功能直接影響孕婦的妊娠情況［17］?？梢姳M早對妊娠期婦女加強EmAb、ACA 及PDW 聯合檢測，可預測其妊娠結局，有利于臨床盡早確定針對性的診治方案，從而改善妊娠結局。

綜上所述，復發性流產次數越多，則妊娠期婦女血清AcA、EMAb、PDW 水平越高。血清AcAb、EMAb、PDW 水平檢測對孕早期復發性流產的診斷具有重要臨床意義，三者可作為預測復發性流產的敏感性指標。復發性流產病因非常復雜，且尚未有明確定論，后續筆者將擴大樣本量，研究其他免疫性因素與該病之間的關系，以進一步完善基礎研究及臨床實踐研究，為臨床療效治療提供理論依據。