血清PCT、α1-AT、HMGB1水平對新生兒細菌性肺炎的鑒別診斷

祝體紅 趙勇 許玉峰

依照病原體的不同，新生兒肺炎可分為細菌性肺炎、病毒性肺炎以及支原體肺炎等，不同感染類型治療方法及預后狀態均存在較大差異，因此加強病原微生物的鑒別對治療藥物的合理選擇具有重要參考價值［1］。細菌性肺炎發病率與死亡率均居于新生兒感染性疾病首位，炎癥細胞和因子可造成全身炎癥反應綜合征，加重患兒病情［2］。細菌性肺炎臨床表現不典型，因此其臨床早期鑒別診斷也較為困難。當機體出現全身性的細菌感染、系統炎性反應綜合征等時，機體血液中的降鈣素原（Procalcitonin，PCT）濃度可出現異常升高［3］。α1-抗胰蛋白酶（α1-antitrypsin，α1-AT）是血漿中最重要的蛋白酶抑制劑，其濃度變化和肝實質損害以及肺組織酶解損傷關系密切［4］。高遷移率族蛋白B（High Mobility Group Box protein，HMGB1）參與多種疾病病理過程，可介導機體炎癥反應［5］。本研究將比較細菌性肺炎與非細菌性肺炎新生兒血清PCT、α1-AT、HMGB1 水平，分析三項指標在新生兒細菌性肺炎的鑒別價值，旨在為疾病早期診斷提供參考，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院2019年7月至2020年8月120 例感染性肺炎新生兒，根據血、痰培養和病毒學指標檢測結果，分為細菌性肺炎組（n=52 例）與非細菌性肺炎組（n=68 例），非細菌性肺炎組又分為病毒性肺炎組（n=29 例）和支原體肺炎組（n=39 例）。納入標準：①符合《諸福棠實用兒科學》感染性肺炎診斷標準［6］；②病原檢測證實；③日齡≤28 d。排除標準：①入組前接受過抗生素等治療；②合并有其他感染性疾病，如血液系統、消化系統、泌尿系統感染；③合并嚴重免疫低下或心腦血管疾??；④合并遺傳代謝性疾病、先天性畸形、先天性心臟病等；⑤合并其他肺部疾病，如肺結核、支氣管哮喘等；⑥近期使用免疫抑制劑、抗凝藥或激素等治療。另選取50 例作先天性疾病篩查的健康新生兒納入健康對照組。各組一般資料比較差異無統計學意義（P＞0.05），見表1。本研究經醫院醫學倫理委員會批準通過，受試者監護人均簽署知情同意書。

表1 一般資料比較［n（%），（±s）］Table 1 General data［n（%），（±s）］

表1 一般資料比較［n（%），（±s）］Table 1 General data［n（%），（±s）］

組別細菌性肺炎組病毒性肺炎組支原體肺炎組健康對照組χ2/F 值P 值n 52 29 39 50性別男30（57.69）18（62.07）24（61.54）29（58.00）0.263 0.967女22（42.31）11（37.93）15（38.46）21（42.00）胎齡（周）37.41±1.23 37.34±1.17 37.80±1.19 37.92±1.29 0.108 0.914出生體質量（g）3214.99±410.15 3309.75±387.45 3198.83±409.81 3277.59±310.95 0.314 0.754日齡（d）15.75±2.97 15.81±2.46 15.49±2.18 15.80±2.99 0.177 0.838

1.2 方法

抽取所有研究對象4 mL 外周靜脈血，3 000 rpm 離心10 min，分離血清，于低溫下保存。血清PCT 檢測采用免疫熒光定量法，通過法國生物梅里埃公司Minividas 全自動免疫熒光分析儀檢測。α1-AT 含量檢測采用免疫擴散法，試劑由上海生物制品研究所提供。HMGB1 含量檢測采用酶聯免疫吸附法，通過德國eppendorf 公司酶標儀極其配套試劑盒檢測。

1.3 統計學方法

采用SPSS 22.0 軟件進行統計分析，計數資料用n（%）表示，行χ2檢驗，計量資料采用（）表示，組間比較采用t檢驗，多組間比較采用F 檢驗；通過受試者工作特征曲線（ROC 曲線）進行診斷鑒別評估效能分析，以P＜0.05 為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 不同組別患兒PCT、α1-AT、HMGB1 水平比較

血清PCT、α1-AT、HMGB1 水平：細菌肺炎組＞非細菌肺炎組＞健康對照組，差異均有統計意義（P＜0.05）。見表2。

表2 不同組別患兒PCT、α1-AT、HMGB1水平比較（±s）Table 2 Comparison of PCT，α1-AT and HMGB1 levels among different groups（±s）

表2 不同組別患兒PCT、α1-AT、HMGB1水平比較（±s）Table 2 Comparison of PCT，α1-AT and HMGB1 levels among different groups（±s）

注：與健康對照組比較，aP＜0.05；與非細菌性肺炎組比較，bP＜0.05。

組別細菌性肺炎組非細菌性肺炎組病毒性肺炎組支原體肺炎組健康對照組F 值P 值n 52 29 39 50 PCT（ng/mL）9.81±1.68ab 1.15±0.11a 1.09±0.13a 0.22±0.02 989.514＜0.001 α1-AT（g/L）4.52±0.43ab 3.54±0.34a 3.37±0.38a 1.95±0.17 613.881＜0.001 HMGB1（ng/mL）18.59±1.83ab 15.03±1.94a 14.29±1.22a 10.36±1.07 294.803＜0.001

2.2 血清PCT、α1-AT、HMGB1 診斷細菌性肺炎效能分析

PCT、α1-AT、HMGB1 聯合診斷細菌性肺炎ROC 曲線下面積為0.945，高于單獨檢測診斷值（P＜0.05）。見表3、圖1。

表3 ROC 曲線診斷Table 3 ROC curve

圖1 ROC 曲線Figure 1 ROC curve

2.3 血清PCT、α1-AT、HMGB1 鑒別細菌性與非細菌性肺炎效能分析

PCT、α1-AT、HMGB1 聯合檢測鑒別細菌與非細菌性肺炎ROC 曲線下面積為0.908，高于單獨檢測診斷值（P＜0.05）。見表4，圖2。

表4 ROC 曲線診斷Table 4 ROC curve

圖2 ROC 曲線Figure 2 ROC curve

3 討論

早期診斷并合理使用抗生素對新生兒細菌性肺炎診治具有重要意義，然而臨床上新生兒細菌性肺炎表現不典型，易和病毒性感染二者相互混淆，同時病原體檢測又耗時較長，患兒病情進展變化迅速，迫切需借助一些生化指標來進行早期的鑒別診斷［7-9］。

PCT 為降鈣素前體，不具有激素活性，可在感染早期2～3 h 后出現升高，6～12 h 后顯著高于正常值，24 h 到達高峰；PCT 值升高狀態主要和感染相關，不受性別、體重、免疫妥協狀態、類固醇、母體PCT 等的影響，在新生兒感染性疾病的診斷中具有較高的準確性［10］。本研究結果顯示，細菌性肺炎組、支原體肺炎組、病毒性肺炎組患兒血清PCT 水平均較健康新生兒高，且相較于支原體肺炎組、病毒性肺炎組，新生兒細菌性肺炎組PCT 增高更為顯著，這與國內外相關研究成果一致［11］。Wang 等［12］研究顯示，PCT 測定雖不能區分病毒和支原體感染，但對于細菌性肺炎和非細菌性肺炎具有較高的鑒別價值。ROC 曲線是敏感度和特異度結合起來對診斷試驗正確程度進行綜合評價的一種方法，依照曲線形狀以及曲線下面積進行分析，其結果不受患病率影響。

α1-AT 作為一種急性時相蛋白，可與靶細胞二者結合抑制血清中其他蛋白酶，其中對白細胞彈性蛋白酶的抑制效果最強。Gao 等［13］研究中顯示感染性肺炎新生兒血清α1-AT 表達水平明顯升高，其結果支持本研究結論。當機體內出現肺部急性炎癥，患兒肺內白細胞數量即可出現增加，造成肺泡中巨噬細胞以及中性粒細胞衰老或死亡，釋放出更多蛋白酶［14］。本研究中血清α1-AT 對于細菌性肺炎的診斷效能ROC 曲線分析，說明血清α1-AT 能夠在一定程度上反映機體內細菌性感染的發生。

HMGB1 是一種高度保守型的蛋白分子，研究顯示，HMGB1 作為重要的炎癥介質與致炎因子，在啟動和維持炎癥瀑式反應中具有關鍵性作用［15］。本研究聯合上述三項指標共同檢測診斷新生兒細菌感染性，并鑒別新生兒細菌感染性與非細菌感染性肺炎，結果顯示PCT、α1-AT、HMGB1聯合診斷和鑒別下ROC 曲線下面積分別達到0.945、0.908，提高了診斷效能，在細菌感染性肺炎與病毒感染性肺炎、細菌感染性肺炎與支原體感染性肺炎的鑒別評估中有較高的評估價值。

綜上所述，感染性肺炎新生兒血清PCT、α1-AT、HMGB1 水平高于健康者，且細菌感染性肺炎高于非細菌感染性肺炎，三者聯合應用對于細菌感染性與非細菌感染性的鑒別具有較高的評估價值。