PD-L1和EGFR 在非小細胞肺癌組織中的表達及關系分析

羅小紅，朱本玲

重慶市長壽區人民醫院病理科，重慶 401220

肺癌患者以病理類型別依據，可以分成兩種肺癌，一種為小細胞肺癌，另一種為非小細胞肺癌，根據有關統計表明：所有肺癌患者中大約有70%為非小細胞肺癌[1]。國內的早期肺癌篩查技術尚不成熟，無法有效在全國范圍內實施早期肺癌篩查，或者說篩查工作開展開來比較困難。肺癌的發生率逐年提升，導致病死率逐漸升高，如果肺癌得到確診，患者的病情通常發展到中期或者后期，嚴重影響患者的生活質量，威脅其生命安全。近些年來，臨床中不斷深入研究非小細胞肺癌，人們從不同的角度來研究非小細胞肺癌的發病機制，從而制訂出不同的具有針對性治療方案[2]，使患者得到有效治療，腫瘤免疫以及對于腫瘤增殖靶向治療的研究已經在逐步開展，并且得到了一定的研究成果，為臨床中非小細胞肺癌的治療提供了思路[3]。該次研究選取了該院在2018年6月—2020年1月期間收治的60例非小細胞肺癌患者，再選取同一時期來該院治療的良性病變患者40例，對其組織標本進行檢測，分析疾病類型不同的肺癌患者組織中的PD-L1和EGFR的表達情況，研究兩種指標與疾病的相關性，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

以該院收治的60例非小細胞肺癌患者為研究對象，對組織標本進行檢測，以上患者簡稱觀察組，再選取同一時期來該院治療的良性病變患者40例，對其組織標本進行檢測，以上患者簡稱對照組。觀察組患者年齡30～82歲，平均（63.45±5.45）歲；男性患者34例，女性患者26例。對照組患者年齡29～81歲，平均（63.21±5.18）歲；男性患者21例，女性患者19例。兩組一般資料對比，差異無統計學意義（P＞0.05）。具有可比性?；颊咭约盎颊呒覍儆谕鈺虾炞?，得到院內醫學倫理委員會的批準。

納入標準：①年齡≥18歲；②在同意書上簽字；③患者的肝、腎功能無異常情況。排除標準：①顱內轉移患者②心、肝、腎功能異常的患者；③重復癌患者。

1.2 方法

采集非小細胞肺癌組織60份，采集良性病變組織40份。

將所有的標本組織放在10%的中性福爾馬林溶液中進行固定，通過常規的石蠟包埋，4μm連續冰凍切片。利用二甲苯進行脫蠟、水化，進行抗原修復之后，在使用10%的BSA對標本組織進行封閉，持續封閉10 min，孵育1∶100的多克隆小鼠抗人PD-L1和兔抗人EGFR抗體，孵育溫度保持室溫，使用DAB反應顯色，利用蘇木素進行復染后，通過顯微鏡對組織標本進行觀察，細胞漿或者細胞膜中發現黃色至棕褐色的顆粒，則表明組織標本為陽性顯色。

1.3 觀察指標

比較兩組患者中PD-L1和EGFR的陽性表達率，以及PD-L1和EGFR的表達與肺癌的相關性進行研究。陽性表達率為陽性切片數與總切片的比值。

1.4 統計方法

采用SPSS 18.0統計學軟件進行數據分析，計數資料的表達方式為例數和率（%），組間比較采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患者PD-L1和EGFR陽性表達率的比較

觀察組患者的PD-L1與EGFR的陽性表達率分別為：81.7%（49/60），55.0%（33/60），對照組患者的的PD-L1與EGFR的陽性表達率分別為：10.0%（4/40），7.5%（3/40），差異有統計學意義（χ2=49.485、23.503，P＜0.05）。

2.2 PD-L1和EGFR的表達與肺癌的相關性分析

PD-L1的表達和臨床分期情況以及淋巴結轉移情況相關（P＜0.05），PD-L1的表達和性別、年齡、病理分級以及腫瘤大小無關（P＞0.05）；EGFR的表達與患者的性別、年齡、疾病的臨床分期、病理分級、腫瘤大小以及淋巴結轉移情況無關（P＞0.05），見表1。

表1 PD-L1和EGFR的表達與肺癌的相關性分析Table 1 Correlation analysis between the expression of PD-L1 and EGFR and lung cancer

3 討論

非小細胞肺癌是一種惡性腫瘤，源于支氣管粘膜上皮或者肺泡上皮，在臨床中發病率相對較高，且大多數發病患者的年齡超過60歲，但是，就最近幾年的統計表明[4]，非小細胞肺癌的發病人群逐漸年輕化。非小細胞肺癌根據其病理類型，可以分成5種，分別為：唾液腺型腫瘤、腺鱗癌、大細胞癌、鱗癌以及腺癌。臨床中，一般會通過手術方法將病灶切除，或者通過放射治療、放療、靶向治療以及免疫治療等，進而可以將患者的疼痛進行減輕，提高患者的生存質量。醫學界的共識表明：肺癌的主要發作人群就是長期吸煙人群，而長期接觸氡元素或者長期處于空氣污染嚴重地區的人群的肺癌發生率也相對較高[5]。非小細胞肺癌中的腺癌是一種比較常見的肺癌組織學亞型，亞洲患者以及女性患者的發病率較高，其病灶一般在肺的周圍組織，病灶為球形，和胸膜的距離較近，一般會發生在患者的肺泡以及較小的支氣管上皮細胞中，腺癌患者于發病早期，一般沒有明顯的疾病癥狀，通常是健康體檢偶然發現，腺癌標本一般是不規則的分葉狀的外觀，切面的顏色無灰白色；鱗癌的主發人群一般為50歲以上的患者，男性患者多于女性患者，且吸煙史越長的患者，發生概率越高，病灶一般在肺段以上的支氣管上，還有一小部分的鱗癌患者的病灶在外周的肺實質中；大細胞癌的病灶直徑在5 cm以上，一般呈多角形，想要診斷大細胞癌，一般需要手術切除標本，組織學評估腫瘤整體，將局部病灶分化后方可有效診斷；腺鱗癌的病灶的病理成分相對復雜，既有腺癌的惡性生物學特征，又有鱗癌的惡性生物學特征，即會出現局部浸潤，又會出現淋巴結轉移，惡性程度較高，預后效果較差；唾液腺型腫瘤的發病概率較低，屬于異質性高的腫瘤，且惡性程度較低，病程發展緩慢，遠處轉移概率較低，預后情況相對良好[6]。通過流行性病學表明：肺癌是全球的發病率以及病死率最高的惡性腫瘤，非小細胞肺癌占所有肺癌患者的80%以上，且女性患者發生肺癌的概率要低于男性患者，主要發病人群從原來的60歲以上變為40歲以上，逐漸年輕化[7]。非小細胞肺癌患者在臨床中的主要疾病癥狀包括：咳嗽、咯血、呼吸障礙、胸部疼痛、消瘦等情況，如果患者到肺癌晚期，則會出現病灶轉移情況[8]，還有一部分的患者因為腫瘤中出現內分泌物質，進而呈現出非轉移性的全身癥狀，非小細胞肺癌的主要并發癥包括：膿胸、病理性骨折以及營養不良等情況，所以，臨床中，需要對非小細胞肺癌患者進行及時診斷，使患者得到及時治療。病理診斷為肺癌的診斷金標準，其他的影像學檢查技術可以提示肺癌，但是，確診還是需要病理診斷[9]。病理診斷主要是通過取出病灶標本，進行病理送檢，最終得到完整的病理診斷報告，而隨著臨床技術的越發成熟，有研究表明，PD-L1以及EGFR和非小細胞肺癌具有一定的相關性[10]。

續表1Continued Table 1

PD-L1屬于負性T細胞共刺激分子，它能夠和配體PD-L1進行過結合，對CD4以及CD8T細胞的增值以及活化情況進行抑制[11]，從而能夠對機體免疫應答情況進行負性調控，進而能夠在腫瘤的免疫逃逸以及腫瘤增殖中起到十分重要的作用。2004年，有研究文獻上表明，非小細胞肺癌、乳腺癌、大腸癌以及肝癌等多種腫瘤細胞患者組織中的PD-L1水平表達情況會出現明顯異常情況[12]。2004年[13]以后的多數研究文獻，都對PD-L1在腫瘤疾病介導中的免疫逃逸情況以及免疫功能的影響情況進行研究，對于PD-L1和惡性腫瘤的其他發病機制的關聯性并沒有一個明確研究[14]。目前，非小細胞肺癌與PD-L1的表達之間的相關性還正處于研究階段。除此之外，EGFR屬于一種跨膜受體，重要性較強，EGFR能夠和多種配體相結合，對于增值信號的傳遞中也能夠起到重要作用，同時，EGFR在腫瘤的增值、浸潤、轉移和血管的新生也起到一定作用[15]。目前，有研究文獻表明，EGFR的異常表達和腫瘤患者存在一定關系[16]。EGFR的表達可以在多種腫瘤組織標本中檢測，EGFR通過自分泌的形式在腫瘤增殖以及發展中均產生一定的作用。有部分研究表明，非小細胞肺癌組織標本中的EGFR的異常表達發生率較高，但是，臨床中對于PD-L1和EGFR的表達與非小細胞肺癌疾病之間的相關性還沒有明確分析[17]。

該次研究結果表明，觀察組患者的PD-L1與EGFR的陽性表達率分別為81.7%（49/60）、55.0%（33/60），對照組患者的的PD-L1與EGFR的陽性表達率分別為10.0%（4/40），7.5%（3/40）；PD-L1的表達和臨床分期情況以及淋巴結轉移情況相關（P＜0.05），PD-L1的表達和性別、年齡、病理分級以及腫瘤大小無關（P＞0.05）；EGFR的表達與患者的性別、年齡、疾病的臨床分期、病理分級、腫瘤大小以及淋巴結轉移情況無關（P＞0.05）；張浩等[18]的研究結果表明：非小細胞肺癌患者中的PD-L1和EGFR陽性表達率為：83.9%，55.4%，良性病變組織的PD-L1和EGFR陽性表達率為：9.5%，4.7%，和該次研究結果大致相符。

綜上所述，PD-L1和EGFR的異常表達和非小細胞肺癌的發病存在密切聯系，影響組織免疫、增值情況，給臨床治療提供根據。