鉤藤現代研究進展

蔣京辰 李梅珊 朱廷春

1.廣西師范大學化學與藥學學院，省部共建藥用資源化學與藥物分子工程國家重點實驗室/廣西民族藥省部共建協同創新中心，廣西 桂林 541004；2.邯鄲學院化學化工與材料學院，河北省雜環化合物重點實驗室，河北 邯鄲 056005

鉤藤(Uncariarhynchophylla)原名“釣藤”，為茜草科植物鉤藤Uncariarhynchophylla(Miq.)Miq.ex Havil、大葉鉤藤UncariamacrophyllaWall.、毛鉤藤UncariahirsutaHavil.、華鉤藤Uncariasinensis(Oliv.) Havil.或無柄果鉤藤UncariasessilifructusRoxb.的干燥帶鉤莖枝?！吨腥A人民共和國藥典》記載其具有息風定驚，清熱平肝之功效。常用于肝風內動、驚癇抽搐、高熱驚厥、感冒夾驚、小兒驚啼、妊娠子癇、頭痛眩暈[1]，其形態及常用藥用部位見下圖1和圖2[2]。

圖1 鉤藤入藥部位：干燥帶鉤莖枝圖

圖2 植物鉤藤形態及其常用藥用部位圖

鉤藤屬植物在我國有10～14種，而鉤藤的植物資源分布在福建、江西、廣東、廣西、湖南、湖北、貴州、云南、浙江、四川和安徽等[3-4]，詳見下表1[5]?！侗静菥V目》曰：“古方多用皮，后世多用鉤，取其力銳爾?！薄侗静輩R言》云：“鉤藤，久煎無力，他藥煎熟十余沸，投入即起，頗得力也。去梗純用嫩鉤，功力十倍?！盵6]《廣西本草選編》記載用鉤藤全株5錢至1兩，水煎服，治療感冒風熱，高燒抽搐，高血壓，頭暈，頭痛，目眩。用全株1斤水煎代茶飲，可解斷腸草中毒[7]。

表1 鉤藤屬植物資源分布一覽表[5]

此外，在中醫治療當中，鉤藤常與天麻做為藥對。如中醫天麻鉤藤飲方組出自《雜病證治新義》，該方具補益肝腎、平肝潛陽以及清熱活血等作用，天麻鉤藤飲方是當前中醫治療高血壓病的一張經典代表方[8]。而國內外學者對于天麻鉤藤飲方的研究大多停留在臨床患者或者實驗動物的臨床療效觀察統計上[9-10]，對于鉤藤毒性成分的毒性作用在經典方中所表現出來的不良反應，以及是否成劑量相關性，鮮有文獻發表。本文就鉤藤化學成分及其藥理作用、毒性作用及其在整體動物上的毒性表現和毒性作用機制做一綜述。

1 鉤藤化學成分及其藥理作用

1.1 鉤藤化學成分 近年來，對鉤藤的主要藥效/毒效物質基礎的研究[11-12]表明，其主要成分含生物堿類、黃酮類、萜類、酯類以及其它成分(如胡蘿卜苷，β-谷甾醇，α-香樹素乙酸酯，對羥基肉桂酸甲酯、鄰苯二甲酸二丁酯，烏蘇酸，東莨菪素，咖啡酸、地榆素，食子酰原矢車菊素， 玄參苷等多種成分)。

研究[13-14]表明，生物堿類物質(吲哚類)，特別是鉤藤堿( Rhynchophylline) 和異鉤藤( Isorhynchophylline) ，是鉤藤的藥效物質基礎和毒性物質基礎。其中，鉤藤堿占鉤藤總堿28.9%，異鉤藤堿占鉤藤總堿14.7%，二者合占在鉤藤總堿的40%以上。此外，辛文波等[15]從鉤藤和毛鉤藤葉中分離出毛鉤藤堿、去氫毛鉤藤堿、異去氫鉤藤堿、柯諾新、喜果苷、卡丹賓堿、二氫卡丹賓堿、帽柱木菲堿以及臺鉤藤堿A和B等；鄭嘉寧等[16]從大葉鉤藤中分離得到柯諾辛堿、柯諾辛堿B等6 種生物堿。

1.2 鉤藤藥理作用 研究[17]表明，鉤藤具有降壓作用。鉤藤總堿、鉤藤堿、異鉤藤堿均有較明顯的降壓作用，但其中鉤藤堿降壓強度略低于異鉤藤堿，其降壓特點是先降壓，然后快速升壓，然后持續下降。黃樊南等[18]發現鉤藤堿具擴張小血管功能且能拮抗激動劑導致的血管收縮。Zhang等[19]使用大鼠離體動脈血管模型，發現鉤藤堿和異鉤藤堿能顯著擴張大鼠離體動脈血管，同時對于KCL誘導的動脈血管收縮的拮抗作用，鉤藤堿和異鉤藤堿具有相近的抑制作用。此外，在中醫臨床治療頑固性高血壓(Resistant or Refractory hypertension, RH)中，鉤藤多是和其它中藥關聯用藥[20]。劉大勝等[21]對文獻中的中藥多藥物進行關聯分析(設定最小支持度為0.05，最小置信區間為0.1，最小提升度為1)，得到RH中藥用藥關聯圖如圖3，其結果表明牛膝、鉤藤、茯苓等與其它藥物之間關聯度較高。

圖3 頑固性高血壓(Resistant or Refractory Hypertension, RH)多味中藥關聯分析圖

另外，鉤藤具有鎮靜和抗癲癇作用。Hsieh等[22]研究發現，鉤藤生物堿類成分(如鉤藤堿和異鉤藤堿)能抑制大鼠的中樞神經多巴胺(DA)，從而提高其高香草酸(HVA)和3,4-二羥苯乙酸(DOPAC)水平，進而抑制運動反應。鉤藤堿和異鉤藤堿能顯著抑制神經突觸傳遞，在大鼠致癇模型中能表現出明顯的抗癲癇作用。鉤藤堿具有抗血小板聚集和抗血栓作用。陳長勛等[23]在大鼠靜脈注射鉤藤堿10～20 mg/kg，發現其能明顯抑制花生四烯酸(AA)、膠原和腺苷二磷酸鈉鹽(ADP)誘導的血小板聚集；鉤藤堿還能明顯降低ADP或膠原合并腎上腺素誘導的大鼠模型肺血栓死亡率。此外，鉤藤還具有抗腫瘤活性。Zhang等[24]發現，鉤藤總堿可逆轉口腔上皮多藥耐藥癌細胞KBv200對長春新堿的耐藥性；Muhammad等[25]表明，麗葉堿(Uncarine D)對腫瘤細胞如SK-MEL，KB，BT-549以及SK-OV-3具有細胞毒性；翅果定堿(Uncarine C)對卵巢癌細胞具有細胞毒性。鉤藤還具有消炎、鎮痛、抗菌、利尿等其它藥理作用[26]。

2 鉤藤的毒性作用

2.1 鉤藤復方制劑及其其它劑型的毒性作用 劉麗春等[27]以復方杜仲片(主要成分是杜仲和鉤藤)進行急性毒性和長期毒性實驗，結果發現，小鼠對復方杜仲片灌胃給藥的最大耐受量為35.6 g/kg，約為臨床劑量的200倍且未見主要臟器組織有異常；大鼠對臨床劑量的60倍為高劑量組連續給藥14 d可見總膽紅素和總膽固醇有下降，停藥15 d后恢復在正常值范圍。復方杜仲片的配伍減毒方面，陳有軍等[28]以水解酪蛋白粉配伍復方杜仲片進行小鼠最大給藥體積灌胃的14 d急毒實驗，結果表明兩者配伍的急毒組與對照組無顯著差異。此外，王盟等[29-30]以鉤藤總堿為主要成分研制的鉤藤總堿緩釋滴丸，進行小鼠14 d急毒實驗，發現鉤藤總堿緩釋滴丸的LD50=1900.7 mg/kg，95%的可信區間為1651.8～2167.9 mg/kg；然后進一步進行大鼠連續給藥12周停藥2周的長毒實驗，其結果為80 mg/kg的高劑量組大鼠可見ALT，AST和ALP升高，肝臟臟體比升高，鏡下可見肝臟部分出現變性和灶狀壞死，提示長期給藥可產生肝毒性。此外，王盟等[31]利用納米技術以鉤藤堿為主要成分制成鉤藤堿固體脂質納米粒，其急毒實驗表明鉤藤堿固體脂質納米粒的LD50=2125.5 mg/kg，95%的可信區間為2019.2～2231.6 mg/kg；大鼠連續給藥12周的長毒實驗表明鉤藤堿固體脂質納米粒各劑量組大鼠均無明顯異常。張密等[32]將半夏生物總堿和鉤藤生物總堿按照1∶4，1∶1和4∶13個配比分別進行小鼠急毒實驗，發現上述3個配比的LD60=2.304 mg/kg，LD40=2.304 mg/kg和LD50=3.888 mg/kg，表明其中4∶1配比的減毒作用明確。

2.2 鉤藤單體及其化學成分的毒性作用 鉤藤的生物堿類物質是其主要的毒性物質基礎。王盟等[29]進行小鼠口服灌胃鉤藤總堿的急性毒性實驗結果表明，小鼠灌胃鉤藤總堿的LD50為649.85 mg/kg，95%置信區間為549.45～768.59 mg/kg。吳二兵等[33]發現，小鼠灌胃鉤藤總堿的LD50=(630.9±118.1)mg/kg，實驗動物毒性表現為活動減少，全身軟弱無力，耗食量降低，藥后約 24 h 恢復正常。劉遂庫[34]對小鼠腹腔注射和皮下注射鉤藤堿的LD50分別是162.3 mg/kg和165 mg/kg， 同時靜脈注射的LD50為105 mg/kg。另外，異鉤藤堿和毛鉤藤堿對小鼠腹腔注射的LD50分別是217 mg/kg和110 mg/kg；對小鼠靜脈注射的LD50分別為80 mg/kg和35 mg/kg[34-35]。

國內外對于鉤藤生物堿的毒性作用的機制研究涉及較少，目前研究表明，鉤藤總堿的毒性作用機制涉及肝臟系統。姜慶城[36]在大鼠連續口服灌胃12周的長期毒性實驗中，分別設定鉤藤總堿水溶液的低中高劑量為2.5 mg/kg，10 mg/kg和15 mg/kg，結果發現鉤藤總堿各劑量組的肝功指標ALT，AST水平均高于對照組且呈劑量相關性，表明鉤藤總堿對大鼠肝臟具有一定損傷作用。王曉聰等[37]進行大鼠連續口服灌胃鉤藤總堿(低中高劑量分別3.5 mg/kg，9 mg/kg和14 mg/kg)10周的長期毒性實驗，其結果表明，高劑量組肝臟指數( 46.28±2.98)和ALT指數(293.14±41.58) 均明顯高于對照組肝臟指數 (28.47 ± 3.55)和ALT指數(152.14 ±11.25)，具有統計學意義(P<0.05) ，提示鉤藤總堿具有肝毒性。另外，張榮梅等[38]用濃縮梔子和黃芩水煎液治療鉤藤總堿誘導的大鼠肝損傷，結果表明梔子和黃芩水煎液可以抑制鉤藤總堿導致的AST,ALT升高及炎性損傷，具有拮抗鉤藤總堿肝毒性作用。鉤藤生物堿類的毒性作用除了累及肝臟系統外，也有研究報道其有累及神經系統。Zhou等[39-40]和江明金等[41]發現，鉤藤堿在低濃度下是安全的，而高濃度具有一定的神經毒性，其最大安全濃度為400 mol/L；同時鉤藤堿能持續上調NR1 mRNA的表達并具有濃度/時間依賴性，同時還能下調NR2B mRNA的表達并具有時間依賴性但不具有濃度依賴性，鉤藤堿上調神經細胞核NR1蛋白表達，同時下調樹突干，樹突棘和軸突上NR2B蛋白表達，導致NR1/NR2B受體族數量水平下降，表明鉤藤堿可能是一種選擇性的非競爭性NMDA受體抑制劑，而非選擇性NMDA受體拮抗劑的靶點作用與離子通道，存在嚴重的神經系統不良反應[42-43]。

3 結語

鉤藤是廣西壯族自治區在2021年確定的31種區域特色中藥材之一，有多種藥理作用，同時也存在肝毒性和神經系統毒性。研究表明鉤藤主要活性成分有生物堿類，黃酮類，萜類，酯類以及其它成分，其毒性成分的研究主要集中在生物堿類成分上(如鉤藤堿)。目前國內外文獻多采用整體動物毒理學研究(主要大小鼠急毒和大小鼠長毒等)表明，鉤藤生物堿類成分所具有肝毒性的毒性機制尚不明確，而其神經毒性潛在的毒性機制可能為非選擇性NMDA受體拮抗劑的擴大作用。值得注意的是，上述對于鉤藤肝毒性和神經毒性大多是基于鉤藤堿單體得到的實驗數據所得。對于鉤藤其它成分中(如異鉤藤堿、黃酮類、萜類等)是否有獨特結果的毒性或者活性成分，以及其含量水平與所表現的活性或毒性是否成劑量相關性依然需要驗證和探索。