高 宇,楊金明,畢保良,嚴 暉
(云南農業大學動物科學技術學院,云南省教育廳高原漁業資源保護與可持續利用重點實驗室,云南 昆明 650201)
本文通過研究聚維酮碘、苯扎溴銨、硫酸銅和高錳酸鉀4 種常見藥物對昆明裂腹魚稚魚的急性毒性,探究昆明裂腹魚稚魚對不同藥物的敏感性,為其養殖過程中的科學用藥提供理論依據。
昆明裂腹魚稚魚為人工繁殖的魚苗,體長(15.0±1.0)毫米,體重(18.4±1.5)毫克;身體健康,游泳活潑,無傷無畸形。
聚維酮碘(水產用,碘含量為10%)購買自山西康派偉業生物科技有限公司;苯扎溴銨(水產用,含量為45%)購買自常州市金太陽動物保健品有限公司;硫酸銅(化學純,含量不少于99%)購買自北京化工廠;高錳酸鉀晶體(化學純,含量不少于99%)購買自重慶川東化工(集團)有限公司。
實驗用水為自來水,經曝氣3天后使用,水溫(18±1.5)℃,pH 8.0±0.5,溶氧(7.5±0.5)毫克/升。暴露實驗開始前,先在3 升的長方體聚乙烯盒中加入1升曝氣水,每盒放入昆明裂腹魚稚魚10尾,馴養72小時,馴養期間不充氧、不喂食。
采用靜水暴露實驗法進行實驗,預實驗將藥物濃度限定在一個較大的范圍內,每個濃度設置兩個平行,每個平行隨機放入10 尾稚魚。根據預實驗的結果,分別設置聚維酮碘暴露濃度為0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5 毫克/升,苯扎溴銨暴露濃度為 0、0.35、0.45、0.55、0.65、0.75 毫克/升,硫酸銅暴露濃度為0、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0 毫克/升,高錳酸鉀暴露濃度為0、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 毫克/升,每隔 24 小時更換1次藥液,實驗期間不充氧、不喂食。實驗開始后8小時內連續觀察各實驗組稚魚的活動狀況、中毒情況和死亡情況等,記錄各藥物濃度組24、48、72、96 小時的死亡情況,將死亡稚魚及時撈出。判定死亡的標準為先用玻璃棒輕輕攪動周邊的水體,稚魚無反應,再輕觸其尾部無反應,最后將其撈出觀察鰓蓋無振動、口張開,則判定已死亡。
采用寇氏法(Karber method)進行半致死濃度(LC50)的計算,其中
式中:d為相鄰兩組劑量對數之差,Xm為最大劑量對數,P 為死亡率(用小數表示),Sx50為標準誤,n為實驗魚數量。
安全濃度(SC):SC=LC50(96小時)×0.1
根據《化學農藥環境安全評價實驗準則》(GB/T 31270-2014)中規定的有毒物質對魚類毒性等級評價標準,按96小時半致死質量濃度劃分為4個等級(表1),用此標準評判實驗藥物對昆明裂腹魚稚魚的毒性等級。
表1 魚類毒性等級評價標準
4 種藥物對昆明裂腹魚稚魚的毒性實驗結果見表2~表5。
表2 聚維酮碘對昆明裂腹魚稚魚的毒性實驗結果
表3 苯扎溴銨對昆明裂腹魚稚魚的毒性實驗
表4 硫酸銅對昆明裂腹魚稚魚的毒性實驗
表5 高錳酸鉀對昆明裂腹魚稚魚的毒性實驗
實驗結果表明,聚維酮碘、苯扎溴銨、硫酸銅和高錳酸鉀對昆明裂腹魚稚魚的96小時半致死濃度分 別 為 1.39、 0.49、1.68、1.63 毫克/升,安全濃度分別為0.14、0.05、0.17、0.16 毫克/升,4 種藥物對昆明裂腹魚稚魚的毒性大小依次為苯扎溴銨>聚維酮碘>高錳酸鉀>硫酸銅。根據《化學農藥環境安全評價實驗準則》中相關標準,苯扎溴銨對昆明裂腹魚稚魚的毒性為高毒,聚維酮碘、硫酸銅以及高錳酸鉀3 種藥物對昆明裂腹魚的毒性為中毒。
通常用半致死濃度和安全濃度來衡量藥物的毒性強弱,以96小時半致死濃度作為急性毒性的分級標準。聚維酮碘可以在昆明裂腹魚苗種培育階段病害防治中使用,其安全濃度在常用劑量范圍,相對比較安全。硫酸銅和高錳酸鉀安全濃度低于藥物推薦使用濃度,應盡量減少使用。苯扎溴銨屬于高毒,使用劑量不當會造成苗種的大量死亡,因此不推薦使用苯扎溴銨作為昆明裂腹魚病害防治的藥物。