淺談犬糞包蟲抗原實驗室檢測及分析

王婷

摘要：在現代社會的發展進程中，養殖業領域的發展速度越來越快，綜合發展水平顯著提升，但是仍舊存在一定的致病菌和寄生蟲，會給人畜的身體健康造成嚴重影響，其中包蟲病也稱棘球蚴病，可以直接感染人畜，對動物及人體的危害尤為嚴重?；诖?，本文主要探討犬糞中包蟲抗原實驗性檢測及分析，首先對包蟲進行概述，其次分析了包蟲疾病的流行原因和惡性影響，最后有針對性的探討犬糞包蟲抗原檢測及結果分析并提出一定防治措施，希望能夠對犬糞中包蟲的檢測技術水平提高提供必要參考。

關鍵詞：犬糞;包蟲;抗原;實驗室檢測;分析

在全世界范圍內，我國屬于包蟲病流行嚴重的國家之一，這主要是由于我國畜牧業的飛速發展，特別是很多農戶在養殖牲畜的過程中并沒有過多的重視包蟲病的防治，并導致人畜之間交叉感染，嚴重危及了人民群眾和牲畜的健康，同樣也會在一定程度上阻礙地區畜牧業的正常發展，因此包蟲此類寄生蟲疾病的抗原檢測和有效防治至關重要，直接關乎我國畜牧業發展水平，因此本文主要從犬糞中分析包蟲抗原并進行深入的探討，以期能夠進一步促進包蟲抗原檢測綜合水平的提高。

1 包蟲病概述

包蟲病主要可以分為棘球蚴病和泡球蚴病兩種類型，能夠直接影響牲畜健康和人體健康，同時也會對地區的畜牧業發展造成嚴重影響。此類地方性疾病在我國流行廣泛，其中我國的包蟲病流行區在我國整體陸地面積中占據4成，眾多人口始終受到包蟲病的影響和流行危害，例如我國新疆、青海、西藏等畜牧業相對發達的地區，同樣也是包蟲病的特高流行區。除了牛羊此類家畜以外，犬類、狐貍、狼類等動物，同樣也更加容易感染棘球絳蟲，并在與人的互動和生活過程中直接將此類包蟲病傳染給人。

2 包蟲疾病的流行原因和惡性影響

包蟲病傳染的根源在于牲畜和犬類的糞便，對于家犬而言，其生長環境和體制環境更加容易被包蟲寄生，此類包蟲往往會寄生于家犬的小腸部位，在7～14d左右蟲卵成熟。包蟲為無性繁殖壽命相對較長，同時并不會受到外界自然生態環境的影響，在不同牲畜之間傳染率和患病率較高，包蟲同樣也會對人體造成感染，此類感染往往在于無意識的感染狀態，主要來源于人體與家犬或其他牲畜之間的親密接觸。也正因如此，包蟲病的最嚴重災區往往在農牧場等牲畜較多的地區，如果家中飼養的家犬有舔肛門的習慣，那么飼養者需要切實觀察家犬是否存在包蟲蟲卵，避免與其進行接觸，減少家犬體內包蟲傳染到人體的可能性。

當前包蟲病、棘球蚴病的最終宿主往往為犬科動物，因此對于犬類以及犬糞中棘球絳蟲的感染性進行診斷，往往需要通過解剖檢驗方法或直接檢測犬科動物糞便中的蟲卵含量、采取氫溴酸檳榔堿瀉下法、血清抗體檢測方法等多種方法，但是在現有的檢測方法中廣泛使用的方法仍舊為氫溴酸檳榔堿瀉下法以及解剖檢測法，其中以解剖檢測方式最為直觀，檢測結果更為準確。但是不容忽視的是，在針對犬類感染包蟲情況進行抗原實驗室檢測時，如果一味使用解剖檢測法，則會導致動物的死亡或難以挽回的傷害，因此在對犬類感染包蟲病的情況進行檢查時，可以采取氫溴酸檳榔堿瀉下法。

3 犬糞包蟲抗原實驗室檢測分析

3.1 實驗室檢測

在針對犬糞中所含有的包蟲進行抗原檢測中，應用酶聯免疫方法進行吸附實驗，提高檢測的基礎性。在犬糞的收集過程中，可以率先保證實驗犬的空腹，隨后應用氫溴酸檳榔堿瀉下法讓犬類能夠排出糞便，同時將此類犬糞進行有效收集，為隨后開展的實驗室監測提供保障。如果所檢測的犬糞樣品中已經含有包蟲抗原，那么可以將其與包蟲抗體進行酶標結合物特異性融合，其次在間接融合過程中也可以根據包被板上的顯色情況進一步判斷犬糞樣品中是否含有包蟲抗原。

1）樣品采集與處理

在此次實驗室檢測中主要應用新鮮犬糞進行測試和實驗，主要實驗儀器為酶標儀、恒溫箱、移液器以及電子天平等等。首先需要根據實驗檢測需要，提前采集犬糞樣品。在樣品采集過程中要做好采樣人員的防護，避免受到犬糞中所含有的包蟲卵影響。樣品采集完成之后需要應用蒸餾水進行洗滌液稀釋，可以按照1：10的比例進行混勻待用。隨后可以將待檢測的犬糞樣品置于低溫環境之下冷凍一周以上，此種低溫要盡量保持在零下70℃左右的溫度，通過此類長時間的低溫冷凍能夠有效消滅犬糞中的包蟲活卵。在檢測過程中可以在犬糞樣品中應用電子天平稱取1g糞便并加入1mL的稀釋液進行攪拌混勻，將混合溶液靜置10min以后應用離心機離心10min，提取清液進行后續檢驗[1]。

2）樣品檢測

犬糞包蟲抗原檢驗首先需要做好加樣反應，在樣品孔中加入待檢樣品，額外添加空白對照和陰性對照、陽性對照各兩孔，根據不同的對照組需要加入適合的對照樣品。全部添加完成之后，需要蓋好封板膜，在常溫環境之下避光反應30min，甩去孔內其他液體并注入洗滌液洗板，重復6次之后可以隨后開展加酶反應。加酶反應開展過程中，除了原有設定好的空白對照孔以外，需要對其他各孔添加酶結合物100μL并蓋好封板膜，讓其充分進行顯色反應，最后應用酶標儀器，讀取OD值。

3）檢測注意事項

在進行實驗的過程中要特別注意犬糞樣品試劑從冷藏環境中拿出之后需要放置到室溫狀態之后才能進行啟用，避免過冷的環境對犬糞樣品造成影響。如果在實驗過程中存在未應用的試劑組，也重新放回5℃左右的溫度進行密封保存。在添加試劑之前，需要針對不同類型的試劑進行輕搖和混勻，避免試劑混合不均而影響檢測，減少犬糞的腐敗幾率。做好個人防護，實驗過程中所應用的各類器具和防護用品都要進行統一的無害化處理或焚燒，避免成分中含有的包蟲卵蔓延滋生。

3.2 檢測結果分析

通過對260份犬糞樣品進行包蟲抗原檢測，共有4份樣品檢測出陽性反應，此類結果顯示了該地區家養犬類在一定程度上有感染包蟲的幾率。在對犬類進行驅蟲之前，抗原感染率達3%左右，而對犬類進行驅蟲之后，其感染包蟲的幾率會降到0.5%左右，感染率的大幅度下降也在一定程度上說明了對犬類進行藥物驅蟲能夠有效治療犬類的包蟲疾病。在對犬類進行驅蟲之后重復檢測犬糞包蟲抗原實驗則得到的感染率為0，所以犬糞樣品的采集時間與是否進行犬類藥物驅蟲有很大程度的關系;另一方面，如果包蟲在犬體內滋生破裂，會導致感染率上升，如果卵體尚不成熟，則感染率會顯示為陰性[2]。

除此之外，如有需要也可以對參與進行犬糞包蟲抗原實驗的實驗犬進行解剖檢測，以進一步判斷包蟲抗原實驗室檢測結果的有效性和精準度。在應用解剖檢測法時，可以將實驗犬進行解剖，并從其內臟中分離出小腸，將小腸內的各類物質全部置于盆中，隨后應用生理鹽水進行漂洗沉淀，棄去上清，多次之后可以應用平皿進行逐一檢查;也可以直接將實驗犬的腸管應用剪刀進行剪開，并使用生理鹽水沖洗腸壁，通過肉眼觀察的形式或采取放大鏡觀察方法，檢測實驗犬腸道內側是否存在棘球絳蟲情況，如有棘球絳蟲則需要進行計數。不同類型的檢測方法，在犬類感染棘球絳蟲精準度方面差別明顯，特別是不同類型的檢測方法在操作可行度以及適用性等方面各不相同，因此在針對犬類感染包蟲病情況進行有針對性的診斷中，需要綜合應用多種方法實現檢測形式的有效互補，最大程度上彌補不同方法的缺陷與問題，提高檢測結果的精準度和科學性效果。

在針對犬糞所進行的抗原實驗室檢測中，可以進一步分析犬糞包蟲抗原效果同時，也可以切實提高犬類包蟲病的防治效果。在進行包蟲病篩查和犬糞包蟲篩查過程中要真正實現分類指導和因地制宜，嚴格控制各類傳染源，切實掐斷包蟲蟲卵的傳播途徑。通過綜合性的防治策略和防治手段，全面開展家畜包蟲病的有針對性防治，進一步減少包蟲病的危害。在早期包蟲病發生和診斷過程中，可以應用藥物治療方法進行治療，同時在犬類飼養過程中要避免應用已經感染了包蟲的動物腎臟或肝臟等組織器官喂養犬類，也可以在飼養過程中對犬只進行定期驅蟲，驅蟲完成之后的糞便要統一進行焚燒或其他類型的無害化處理;日常養犬過程中要注意喂養的衛生條件和飲水衛生，避免出現犬糞污染問題。

4 結語

綜上所述，在新時代發展背景之下，我國需要進一步提高對各類寄生蟲病的防治和檢測措施，避免多種類型的寄生蟲病對人體造成嚴重的影響。本文從犬糞包蟲抗原實驗室檢測及分析入手，不僅探索了犬類包蟲病的流行因素和主要感染源，同樣也圍繞實驗室檢測方法和檢測結果、具體的防治措施進行全面論述，希望能夠對我國包蟲病的檢疫和畜牧業的發展奠定良好基礎。

參考文獻：

[1]宋育娟.剛察縣犬糞包蟲抗原實驗室檢測及分析[J].青海農牧業，2018（4）：3.

[2]鄭雪瑩，張啟龍，陳會玲，等.北京市某區犬細粒棘球絳蟲感染情況與風險因素分析[J].中國獸醫雜志，2020，56（3）：99-101+139.