白酒原酒中總酯皂化回流時間對總酯測定結果的影響分析

王 慧，陳 宇，王海英，越祖梅，劉 婷

（內蒙古河套酒業技術中心，內蒙古巴彥淖爾 015400）

白酒中的呈香呈味物質種類較多，呈香物質主要為酯類物質。酯類物質主要包括乙酸乙酯、丁酸乙酯、己酸乙酯、醋酸戊酯、丁酸戊酯和乳酸乙酯等等，統稱為白酒中的總酯。通常情況下，每個酒企都要對原酒進行總酯的檢測，來判定在發酵過程中呈香物質含量是否達標。一般情況下是采用國標GB/T 10345—2007 8.1 指示劑法來檢測白酒中的總酯，在檢測步驟中回流皂化30 min，由于酯類皂化不完全，影響檢測結果的準確度和穩定性。

本研究對該項方法進行優化和改進，延長酯類皂化反應回流時間，同時設計加標回收實驗，檢測結果穩定性與準確度較好。

1 材料與方法

1.1 材料、試劑及儀器

酒樣：本公司車間生產的白酒原酒樣品。

試劑：NaOH標準滴定溶液c（NaOH）=0.1 mol/L；NaOH 標準滴定溶液c（NaOH）=3.5 mol/L；HSO標準滴定溶液c（HSO）=0.1 mol/L；乙醇溶液（無酯）40%（v/v）；酚酞指示劑（10g/L）；乙酸乙酯。

儀器設備：全玻璃蒸餾器；全玻璃回流裝置；堿式滴定管；酸式滴定管。

1.2 試驗方法

1.2.1 檢測原理

用堿中和樣品中的游離酸，再加入一定量的堿與酯類發生皂化反應，最后用硫酸標定剩余的堿。通過堿消耗量計算總酯的含量。

1.2.2 檢測方法

取白酒原酒樣品50 mL 于250 mL 圓底燒瓶中，加1 滴酚酞指示劑，以NaOH 標準滴定溶液[c（NaOH）=0.1 mol/L]滴定至粉紅色，記錄數據。再準確加入NaOH 標準滴定溶液[c（NaOH）=0.1 mol/L]25 mL（若樣品總酯含量高時，可加入50 mL），放入沸石，裝上冷凝管（冷卻水溫度宜低于15 ℃），沸水浴，冷凝回流30 min，冷卻，用HSO標準滴定溶液[c（HSO）=0.1 mol/L]標定多余的NaOH，記錄數據。

取乙醇溶液（無酯）[40%（v/v）]50 mL于250 mL圓底燒瓶中，按上述方法同樣操作做空白試驗，記錄數據。白酒原酒樣品中總酯含量的計算：

式中：X——樣品中總酯的質量濃度，以乙酸乙酯計，g/L；

在《傲慢與偏見》這部小說的話語分析當中，可以找到很多真實語料進行語義學和語用學意義分析的對比研究。筆者從下面三個原文的語料片段入手進行研究。

C——硫酸標準滴定溶液的實際濃度，mol/L；

V——空白實驗樣品消耗硫酸標準滴定溶液的體積，mL；

V——樣品消耗硫酸標準滴定溶液的體積，mL；

88——乙酸乙酯的摩爾質量的數值，g/mol；

50.0——吸取樣品的體積，mL。

1.2.3 試驗方案設計

1.2.3.1 酯類皂化時間設計

按照檢測方法進行樣品處理，在檢測步驟中準確加入25 mL 的0.1 mol/L 氫氧化鈉溶液后這一環節，設計皂化回流時間梯度，考察酯類皂化是否完全。在實驗的過程中每個樣品至少做1 個平行樣。具體設計方案見表1。

表1 皂化時間實驗設計

1.2.3.2 加標回收實驗

按照檢測方法進行樣品處理，在檢測步驟中酯類皂化這一環節中加入標準物質，設計加標回收實驗，考量酯類皂化時間的不同是否對標準物質有損失，通過回收率來驗證最佳的皂化時間，具體設計見表2。

表2 加標回收設計

1.2.3.3 精密度和準確度

采用相對標準偏差RSD 值來表示精密度，相對標準偏差值越低表明檢測值精密度越好，檢測結果的重現性越好。在重復條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值，不應超過平均值的2%。采用相對誤差來表示準確度，相對誤差越低表示檢測結果越準確。

2 結果與分析

2.1 皂化時間對總酯含量測定結果的影響

取多個樣品按照本文標注檢測方法檢測，在酯類皂化回流階段根據設定的實驗方案進行回流皂化，在14 ℃溫度下，不同皂化時間下總酯含量測定結果見表3和表4。

由表3、表4 可知：皂化時間對原酒總酯含量測量結果有一定的影響，在皂化30 min時相對誤差和RSD 值均偏大，隨著皂化時間的延長相對誤差和RSD值逐漸降低，當皂化時間達到45 min時相對誤差和RSD 值處于最低狀態，RSD 值幾乎為零，說明樣品多次測定重復性較好；相對誤差在0 %～2 %范圍之內，說明檢測準確度更高。之后隨著皂化時間的增加趨于穩定狀態。通過皂化時間對檢測結果影響的分析實驗，得出45 min 可以達到皂化完全，相對誤差和RSD 值最低，測定結果幾乎不再隨皂化時間延長而改變。

表3 不同皂化時間原酒中的總酯含量

表4 不同皂化時間測定原酒總酯結果的精密度和準確度

2.2 回收率對皂化時間確定的驗證試驗

在探索皂化時間時檢測的樣品中任意選擇2份原酒樣繼續設計加標回收實驗，驗證已經確定的皂化時間是否可行、準確。在加標回收實驗中，每個樣品做2個平行樣，具體見表5。

表5 回收率對皂化時間驗證

根據表5 可知，本文設定的皂化時間，在做加標回收實驗中回收率均較高，在93%～103%范圍內，在皂化時間為45 min 時回收率達到最高，接近100%，說明在皂化45 min時，被測物質幾乎沒有損失，驗證了檢測結果的準確度。

3 結論

原酒總酯的檢測中冷凝回流皂化過程按照國標GB/T 10345—2007 8.1 指示劑法中所規定的皂化時間30 min是不能完全皂化的，影響到了檢測結果的準確程度和精密度。本文通過多種實驗，探尋到檢測結果更加準確和精密度更高的最佳皂化時間為45 min，即可皂化完全，RSD 值幾乎為零，相對誤差在0 %～2 %，回收率可達100 %，準確程度更高。

原酒酒樣中含有許多微量成分，包括酸、酯、醛、醇、酮、酚等，基質較為復雜，檢測時影響因素較多。本研究對國標方法進行改進，提出在原酒實驗中，延長皂化時間。改進后的方法用于白酒原酒中總酯的測定，檢驗結果穩定性好，更加方便于企業的生產。