青皮配方顆粒制備工藝和質量標準研究

朱 倩，時向利，張江艷

（1.江蘇康緣藥業股份有限公司質量部，江蘇連云港 222000；2.江蘇康緣醫藥商業有限公司質量部，江蘇連云港 222000）

青皮是蕓香科植物橘以及相關變種的干燥幼果或尚未成熟果實的果皮，最早對青皮記載出自金·張元素的《珍珠囊》：“青皮主氣滯，破積結，少陽經下藥也”。目前臨床中主要將其用于治療胸肋脹痛、胃痞、疝氣、食積、乳房腫脹、乳核等諸多癥狀。配方顆粒是應用現代科學生產工藝，經提取濃縮、干燥、制粒、分裝等工藝將單味中藥飲片制備成可直接沖飲的顆粒制劑，不僅有利于藥物的吸收，更有利于中藥房的調劑效率，是對傳統中藥飲片劑型的改革[2]。本次研究將以標準湯劑的出膏率、橙皮苷含量等作為參照，對青皮配方顆粒制備工藝進行評價和優化，同時建立青皮配方顆粒的質量標準，以期為有效控制產品質量提供參考。

1 材料

青皮飲片購自于中藥飲片廠（批號分別為2020012、2020033以及2019009），經專業人士鑒定均為蕓香科植物橘及其變種的干燥幼果或未成熟果實的果皮，符合《中國藥典》（2020）中關于青皮藥材的相關條件；青皮對照藥材（批號：121155200502，中國食品藥品檢定研究院）；橙皮苷（批號110721201115，以95.3%計，中國食品藥品檢定研究院）。甲醇（色譜級）；水（超純水）。

2 方法及結果

2.1 青皮提取工藝

2.1.1 正交試驗設計

參考相關文獻設計正交試驗。根據預實驗結果，本次研究以橙皮苷含量、出膏率作為考察指標，以加水量、煎煮時間、煎煮次數作為因素，應用L9（3）4正交表開展實驗研究，見表1。

表1 因素水平

2.1.2 實驗設定及結果

采用電子天平（MS-105瑞士 Mettler Toledo公司）精準稱取各個批次的青皮飲片各3份，每份10g，共9份樣品。根據設計好的正交試驗表的研究方法加工青皮煎煮液，然后將煎煮液濃縮，對濃縮的青皮煎煮液中的橙皮苷含量和出膏率進行測定，見表2。

表2 青皮配方顆粒煎煮正交試驗

表3 方差分析表

通過試驗結果可以看出，各個因素之間影響大小順序分別為C＞A＞B，且以A3B3C2作為煎煮條件時制備所得的青皮配方顆粒效最佳。在考慮A2與A3，B2與B3之間數據相差的差異性無顯著意義，從節約能耗、降低工時、節約生產成本等方面進行綜合考慮，選擇A2B2C2作為最佳的青皮配方顆粒提取調節，即在加水12倍量、煎煮兩次，每次30min的條件下，即可獲得最佳的煎煮效果。

2.1.3 對照品指標

采用標準湯劑作為配方顆粒衡量基準制備青皮標準湯劑。取青皮對照品飲片10g，12倍加水量浸泡30min后煮沸，文火微沸30min后，再加入10倍量水平煎煮20min，去渣留液。將兩次濾液合并后減壓濃縮到150mL。將制備好的濃縮液利用真空冷凍干燥機（RE-3000A，上海亞榮生化儀器廠）凍干處理后，即可得到青皮標準湯劑凍干粉。

取橙皮苷對照品適量，加入制備好的50%甲醇（標準品），制備成每1mL含橙皮苷0.15mg的對照品溶液。

制備青皮配方顆粒時取青皮飲片2 500g，按照上述設計好的流程制備煎煮液，濾過后加入適量的麥芽精，采用噴霧干燥技術干燥后再次加入適量的麥芽精華和二氧化硅助流，攪拌制粒后制備成青皮配方顆粒。每個批次各制備一批配方顆粒（QP01、QP02、QP03）。

2.3 正交試驗結果驗證

2.3.1 薄層色譜鑒別

取青皮樣本0.2g，研磨后加入10mL甲醇，利用數控超聲波清洗器（KQ-600型，昆山市超聲儀器有限公司）超聲處理20min后過濾留液，蒸干后再次加入甲醇2mL溶解，制備成供試品溶液。

取制備好的青皮配方顆粒加入甲醇10mL，按照供試品制備方法制成對照品溶液。另取青皮陰性樣本0.2g，按照供試品溶液制備方法制備陰性對照品溶液。取制備好的各組樣本各2μL，對照藥物溶液1μg，加入1%氯氧化鈉溶液制備的硅膠C薄層板（G型，青島海洋化工有限公司）中，采用乙酸乙酯-甲醇-水（100∶17∶13）作為展開劑，展開至3cm后取出晾干，再次以甲苯-乙酸乙酯-甲酸-水（20∶10∶1∶1）的上層溶液作為展開劑，展至8cm，取出晾干。再噴三氯化鋁溶液，利用暗箱三用紫外分析儀（ZF-7，上海佳鵬科技有限公司）進行檢驗，檢驗波長設定為365nm?？梢姽┰嚻啡芤荷V與對照藥材溶液色譜對應位置存在著相同顏色的熒光斑點，而陰性對照則無干擾。

2.2.2 出膏率測定

青皮標準湯劑的出膏率根據凍干粉量來計算，即出膏率=凍干粉重量/湯劑制備所用飲片量 ×100%。青皮配方顆粒出膏率則根據干燥后的干膏粉量計算，即配方顆粒出膏率=浸膏干膏粉重量/原料飲片重量 × 100%。通過測定可見，3個不同批次青皮提取物出膏率在16.03%～29.14%，均值為25.48%，SD=2.15%。根據相關標準計算青皮標準湯劑出膏率在17.84%～33.12%，而三個不同批次青皮飲片的出膏率分別為24.83%、26.04%和25.57%，均在標準湯劑出膏率范圍之內，表明本次研究設計的青皮配方顆粒提取工藝合理。

2.2.3 橙皮苷含量測定

采用A2B2C2作為制備工藝，以標準湯劑的橙皮苷含量作為對照，對正交試驗準確性進行評價。結果可見，標準青皮湯劑的橙皮苷含量為8.01%，而采取A2B2C2作為提取條件時，青皮樣本的橙皮苷含量為7.90%，通過結果可以看出，A2B2C2作為提取條件效果良好。

2.4 青皮配方顆粒制備

根據《中國藥典》2020版中關于顆粒劑的相關操作方法和規定，以研究設計好的提取工藝制備青皮提取物，再將提取物制備成配方顆粒。制備顆粒時將A2B2CB提取工藝制備的干膏與配料按照1∶1的比例加入輔料，再將濃縮好的藥液加入到全自動顆粒機制備成青皮配方顆粒。

2.5 青皮配方顆粒質量檢驗

2.5.1 粒度檢測

3個批次的青皮各稱取適量制備成青皮配方顆粒，每份10g，分別過5號篩和1號篩，分析青皮顆粒中能過5號篩但未能通過1號篩的顆粒比例。結果可見，3個批次青皮配方顆粒中能夠5號篩但未能通過1號篩的顆粒比例分別為11.9%、12.4%和12.7%，均未超過15%，符合《中國藥典》（2020版）相關規定。

2.5.2 水分檢查

根據《中國藥典》（2020）中顆粒制劑水分測定相關方法，對制備好的青皮顆粒水分進行測定。結果顯示，三個批次青皮配方顆粒水分含量分別為5.08%、4.94%以及5.17%。三個批次的青皮配方顆粒水分均未超過8%，符合相關規定要求。

2.5.3 干燥失重檢查

稱取3個批次的青皮配方顆粒各10g，置入到電熱恒溫干燥箱內，以80℃的溫度恒溫烘烤至顆粒恒重，再次對顆粒進行稱重。結果可見，3份樣本干燥失重比為0.0131g、0.0139g和0.0111g，干燥失重比平均值為0.0127g，符合相關規定標準。

2.5.4 溶化性檢查

取不同批次的青皮配方顆粒各10g置入到燒杯內，加入80℃蒸餾水30mL，對液體勻速攪拌約5min，觀察顆粒的溶化情況。結果可見，顆粒在加入熱水后快速溶解，經攪拌后出現輕微的渾濁現象，所有顆粒均溶化，符合《中國藥典》（2020版）相關規定標準。

2.5.5 流動相考察

休止角測定采用固定漏斗法，即將三個串聯在一起的漏斗采用鐵架臺進行固定，然后將最下方的漏斗放置在距離水平繪圖紙約1cm高度的位置，然后將顆粒小心地沿著漏斗壁傾倒于漏斗內，直至下方顆粒形成的錐體尖端能夠接觸到漏斗下方口為止，對圓錐體的高度以及錐體底部半徑（R）tan?=H/R，其中?即休止角。結果可見，三組樣本的休止角分別為24.6°、23.4°和24.1°，均＜40°，符合相關要求。

2.5.6 重復性考察

以青皮橙皮苷含量作為重復性考察指標，檢測時取青皮橙皮苷，按照供試品溶液配制方法，制備供試品溶液6份，利用色譜法對供試品溶液中的橙皮苷含量進行測定，結果可見，6份樣本平均橙皮苷面積RSD分別為0.68%，可見該方法具有良好的重復性。

2.5.7 加樣回收實驗

精準稱取制備好的青皮配方顆粒粉末6份，每份0.2g，分別置入到50mL量瓶內，加入適量的甲醇，超聲處理30min后冷卻，再次加入甲醇定容后搖勻，精準吸取25mL置入到50mL容量瓶內，精密加入對照品溶液3mL（橙皮苷質量濃度為0.483g/L），再次加入甲醇定容后搖晃均勻，抽取濾液后，按照色譜條件進行測定，計算回收率。通過結果可見，3個不同批次青皮配方顆粒的回收率分別為96.41%、97.58%和98.55%，RSD為1.42%，可見該工藝回收率良好。

3 討論

采用正交試驗對青皮配方顆粒的生產條件進行篩選優化，經優選后，以A2B2C2作為青皮藥物提取工藝，即加水12倍量、煎煮兩次，每次30min，所得提取物無論是在穩定性還是在出膏率方面，均表現良好。橙皮苷可溶于稀堿、吡啶或超過70℃的熱水，微溶于甲醇，因此煎煮液采用水作為溶媒，通過加熱可有效提取到青皮內的橙皮苷成分。研究以青皮作為對照藥材，采用TLC法對青皮配方顆粒和對照品藥材的色譜進行對比，可見兩者相應位置上的斑點顏色相同，斑點清晰，表明兩者成分相同。通過對該工藝制備的青皮配方顆粒質量進行考察，以橙皮苷作為考察指標，結果表明，所得青皮配方顆粒具有良好的穩定性和可重復性，以該參數制備的青皮配方顆粒成本質量穩定，有利于降低生產成本，且質控簡便，可用于工業生產。

4 結論

以加水12倍量、煎煮兩次、每次30min作為青皮配方顆粒的提取工藝，采用自動化制粒機制備顆粒作為制備工藝所制青皮配方顆粒具有較高的穩定性和可重復性，且質控方法操作簡便，適宜工業化大規模生產應用。